Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Кондрахин И.П. -> "Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики" -> 39

Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.

Кондрахин И.П., Архипов А.В., Левченко В.И., Таланов Г.А., Фролова Л.А., Новиков В.Э. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики: Справочник. Под редакцией Сайтаниди В.Н. — М.: Колос, 2004. — 520 c.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка): metodvetkllabdia2004.djvu
Предыдущая << 1 .. 33 34 35 36 37 38 < 39 > 40 41 42 43 44 45 .. 246 >> Следующая


В клинической практике диагностическое значение имеет неорганический фосфор. Нормативы содержания его в сыворотке (плазме) крови здоровых животных приведены в приложениях 5 и 6.

Снижение уровня фосфора в крови отмечается при длительном недостатке его в рационе, плохом усвоении, при расстройствах желудочно-кишечного тракта или дефиците витамина D, при гиперфункции паращитовидных желез и гипофункции щитовидной железы, когда увеличивается секреция паратгормона и уменьшается выработка кальцитонина. Отмечается оно и при алиментарной осте-одистрофии, рахите, уровской болезни, пеллагре, длительном лечении инсулином, кальция хлоридом, болезнях желудочно-кишечного тракта.

Повышение уровня фосфора в крови может быть вызвано уменьшением секреции паратгормона, когда тормозится реабсорбция фосфора в почках. Увеличение кальцитонина стимулирует реаб-сорбцию фосфора в почках и приводит к гиперфосфатемии.

Гиперфосфатемия встречается при сердечной недостаточности, кетозе, приеме больших доз витамина D, нефрите, нефрозе, токсикозах беременности, мышечном перенапряжении. У телят молочного периода содержание фосфора в крови несколько выше, чем у взрослых животных. Содержание фосфора в безбелковом фильтрате цельной крови, плазмы и сыворотки, обработанных одновременно, одинаково.

Определение неорганического фосфора в сыворотке кровн животных с аскорбиновой кислотой. Принцип. В безбелковом

84

центрифугате неорганический фосфор реагирует с молибденовой кислотой с образованием фосфорно-молибденовой кислоты, которая восстанавливается аскорбиновой кислотой до синего фосфор-но-молибденового комплекса. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации неорганического фосфора.

Реактивы: хлорная кислота — 20 мл;

50%-ный раствор трихлоруксусной кислоты (ТХУ) — 100 мл (флакон № 1);

5%-ный раствор молибдената аммония — 100 мл (флакон № 2); аскорбиновая кислота — 1 г (флакон № 3); основной стандартный раствор фосфора — 100 мг% (ампула); 1 н. соляная кислота — 10 мл.

Подготовка рабочих растворов. 10%-ныйраствор ТХУ: содержимое флакона № 1 переносят в колбу на 500 мл и доводят объем дистиллированной водой до метки. Можно приготовить 100 мл: 20 мл 50%-ного раствора ТХУ в колбе на 100 мл довести дистиллированной водой до метки. В случае появления мутности раствор фильтруется.

5%-ный раствор молибдената аммония (флакон № 2) готов к применению.

0,1 н. раствор соляной кислоты: содержимое флакона (10 мл) 1 н. соляной кислоты переносят в мерную колбу на 100 мл и доводят дистиллированной водой до метки.

Раствор аскорбиновой кислоты: содержимое флакона № 3 растворяют в 100 мл 0,1 н. раствора соляной кислоты. Раствор готовят перед использованием.

Рабочий калибровочный (стандартный) раствор фосфора: в мерную колбу на 100 мл вносят 5 мл (ампула) основного калибровочного раствора фосфора и доводят объем дистиллированной водой до метки. Получают 5 мг%-ный (50 мг/л) раствор фосфора.

Ход определения. Опытная проба. В центрифужную пробирку вносят 2,5 мл дистиллированной воды, 0,5 мл сыворотки крови и 3 мл 10%-ного раствора ТХУ. Перемешивают стеклянной палочкой. Через 10 мин центрифугируют 20 мин при 3000 мин Осторожно с помощью шприца отбирают 3 мл центрифугата, добавляют 0,6 мл раствора молибдената аммония, 0,12 мл раствора аскорбиновой кислоты и 1,3 мл дистиллированной воды. Перемешивают и через 20 мин колориметрируют в кювете с толщиной слоя 1 см при красном светофильтре (630—690 нм) против контроля.

Контроль. К 3 мл 10%-ного раствора ТХУ добавляют 0,6 мл раствора молибдената аммония, 0,12 мл раствора аскорбиновой кислоты, 1,3 мл дистиллированной воды.

Калибровочный раствор. Перемешивают 2,5 мл дистиллированной воды, 0,5 мл 5 мг%-ного раствора фосфора, 3 мл 10%-ного раствора ТХУ. Через 30 мин 3 мл этой смеси переносят в другую пробирку, добавляют 0,6 мл раствора молибдената аммония, 0,12 мл раствора ас-

85

корбиновой кислоты, 1,3 мл дистиллированной воды. Через 20 мин колориметрируют при тех же условиях, что и опытную пробу. Расчет ведут по формуле

где X — количество неорганического фосфора, мг/100 мл; E0n — экстинкция опытной пробы; Ест — экстинкция 5 мг/100 мл раствора фосфора; 5 — коэффициент для перевода в мг/100 мл (мг%).

При переводе мг% в ммоль полученную величину умножают на 0,323.

Источник: 27.

Определение магния в сыворотке (плазме) крови по цветной реакции с титановым желтым (по Кункелю, Пирсону, Швейгерту в модификации И. В. Петрухина). Принцип. Магний реагирует с титановым желтым в щелочной среде с образованием окрашенных соединений. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации магния.

P е а к т и в ы: 20 %-ный раствор трихлоруксусной кислоты (ТХУ);

0,01%-ный раствор титанового желтого. Готовят в день определения;

0,02%-ный раствор поливинилового спирта;

основной стандартный раствор магния. Растворяют 8,458 г магния хлорида (MgCl2 • 6 H2O) в дистиллированной воде и доводят до 1 л в мерной колбе: 1 мл раствора содержит 1 мг магния (100 мг%). Можно готовить 0,01 н. раствор магния сульфата из стандарт-титра (фиксанала), который содержит 12,15% магния;
Предыдущая << 1 .. 33 34 35 36 37 38 < 39 > 40 41 42 43 44 45 .. 246 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed