Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка):
Отобранный материал тщательно дробят и 10—15 г помещают в предварительно прокаленный и взвешенный до постоянной массы большой тигель. Кость обугливают, для чего тигель ставят на электроплитку с асбестовой сеткой (в вытяжном шкафу) и нагревают до тех пор, пока кость не перестанет дымить. Затем тигель помещают в муфельную печь и прокаливают при темно-красном накаливании (450—500 0C) в течении 4—5 ч. Зола после сжигания должна быть светло-серого или белого цвета без примесей частиц угля. После остывания тигель переносят в эксикатор, взвешивают на тех же аналитических весах и вновь ставят в муфельную печь на 1—2 ч, затем снова взвешивают. Разница между первым и вторым взвешиваниями не должна превышать 0,0002 г. При необходимости можно рассчитать содержание сырой золы (jc) по формуле
r= M-J)-IOO H '
где А — масса тигля с золой, г; В — масса тигля, г; 100 — коэффициент для пересчета в проценты; H — навеска, г.
Содержимое тигля переносят в фарфоровую ступку, измельчают в однородную массу. На аналитических весах взвешивают 1 г зольного остатка (лучше в ранее прокаленном и взвешенном тигле). Взятую навеску в том же тигле растворяют в 10 мл 25%-ного раствора соляной кислоты при постоянном перемешивании стеклянной палочкой. Полученный раствор переносят в мерную колбу на 250 мл, тигель несколько раз обмывают дистиллированной водой, которую сливают в ту же колбу, объем ее доводят до метки дистиллированной водой. Содержимое колбы хорошо перемешивают и после отстаивания проводят анализ, как описано в методике определения общего кальция в сыворотке крови.
Источник: 21.
Определение ионизированного кальция расчетным методом (по Й. Тодорову). Ионизированный кальций определяют вычислением по формуле
80
0,2+ = 6Са-Д/3 Б+ 6 '
где Ca2+ — ионизированный кальций, мг%; Ca — общий кальций, мг%; Б — общий белок, г%.
Для вычисления ионизированного кальция необходимо знать количество общего кальция и общего белка сыворотки крови. Источник: 68.
Определение ионизированного кальция с применением обменной адсорбции (по Д. Т. Волкову). В качестве адсорбента используют нейтральный алюминия оксид, стандартизированный по Брохма-ну, II степени активности. Ионизированный кальций устанавливают по разнице между общим кальцием и кальцием, не вступившим в ионный обмен. Последний определяют следующим образом: берут 2,5 мл плазмы (сыворотки) крови, добавляют 50 мг адсорбента из расчета 20 мг алюминия оксида на 1 мл плазмы (сыворотки) крови. Содержимое пробирки тщательно перемешивают стеклянной палочкой и центрифугируют 5 мин при 3000 мин . Надоса-дочный раствор осторожно сливают в пробирку, не допуская взмучивания осадка. Затем определяют содержание кальция в 0,1 мл полученного раствора по вышеописанной методике определения общего кальция. В плазме крови концентрация ионизированного кальция ниже, чем в цельной крови и сыворотке.
Источник: 12.
Примечание. В качестве антикоагулянта используют гепарин.
Ca2+ стабилен в цельной крови при 4—8 °С в герметически закрытых шприцах в течение 2 ч. Не допускается контакт крови с воздухом.
Для измерения содержания ионизированного кальция крови и мочи используются ионоселективные анализаторы, которые производят зарубежные фирмы «Radiometer» (Дания), «Novabimedical» и «Beckman-Conlter» (США), «AVL» (Австрия).
Клиническое значение. В крови циркулирует кальций в трех формах: 45—50 % находится в ионизированном состоянии, 40—45 % связано с белками, остальное количество образует комплексы с различными моно- и бивалетными низкомолекулярными анионами. Физиологически активен ионизированный кальций.
Уровень общего кальция в крови определяется суммой ионизированного связанного с белками крови и различными анионами кальция. Определения только общего кальция для характеристики нарушений метаболизма недостаточно.
Преимущественно кальций — внеклеточный элемент. Около 99 % его находится в костной ткани в составе гидрооксиапатита, остальное количество — во внеклеточной жидкости.
Кальций — один из важнейших компонентов системы, регулирующей проницаемость мембран. Его ионы способствуют взаимодействию актина и миозина, т. е. сокращению мышечных волокон. Это осуществляется с участием магния и АТФ. В нервно-мышеч-
6-4196
81
ных синапсах ионы кальция способствуют выделению ацетилхоли-на и связыванию его с холин-рецептором, а при избытке ацетил-холина активизируют холинэстеразу, расщепляющую ацетилхо-лин. Ион кальция активизирует процесс свертывания крови.
Всасывание, транспортировка, распределение в тканях и выделение кальция протекают с участием активных форм витамина D и паратгормона.
Уровень кальция в крови здоровых животных указан в приложениях 5 и 6. Он зависит от содержания кальция, фосфора и витамина А в рационе, состояния гормональной системы, желудочно-кишечного тракта, почек, печени и других органов.
Снижение содержания кальция в крови отмечается при длительном недостаточном поступлении его с кормом, плохом усвоении вследствие дефицита витамина D и паратгормона, которые обеспечивают его всасывание в кишечнике и препятствуют выведению с мочой. Гипокальциемия сопровождает алиментарную остеодист-рофию, рахит, вторичную остеодистрофию и многие другие болезни. Уровень кальция в крови стабильно удерживается длительное время за счет мобилизации его из костной ткани. Компенсаторные механизмы проявляются при развитии алиментарной остеодистрофии и рахита, при которых низкое количество кальция в крови обнаруживают при затяжном, тяжелом течении патологического процесса.
