Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка):
AAC проводят при следующих условиях: резонансная длина волны 283,3 нм, ток лампы с полым катодом 10 мА, спектральная полоса пропускания монохроматора 0,7 нм. Режим работы электротермического атомизатора: высушивание — 100 °С (30 с), озо-ление — 500 °С (30 с), атомизация — 2100 °С (5 с). Расход аргона на стадии атомизации 25 мл/мин. Объем вводимой в атомизатор пробы 20 мкл.
Расчет. Содержание свинца в исследуемом материале вычисляют по формуле
где X — содержание свинца, мг/кг; С — концентрация свинца в анализируемом растворе, мг/л; 5 — коэффициент; P — масса навески пробы, г.
Клиническое значение. Обнаружение в почках и печени подозреваемых в отравлении животных свинца в количестве 10 мг/кг и выше дает основание для постановки предварительного диагноза на свинцовую интоксикацию. Окончательный диагноз может быть поставлен по результатам анализа анамнестических данных (использование для окраски животноводческих помещений свинцовых белил, попадание в места выпаса животных пластин списанных свинцовых аккумуляторов и др.), клинических признаков инток-
28 — 4196
433
сикации (судороги, скрежет зубами, слюнотечение, затрудненное дыхание, потеря зрения), характера патологоанатомических изменений (гастроэнтерит с некрозом отдельных участков слизистой оболочки, дистрофические изменения в печени и почках).
Источник литературы
1. Башмурии А. Ф. Руководство по токсикологическому анализу в ветеринарии. — M.: Колос, 1968.
2. Временные методические указания по определению синтетических пиретрои-дов (амбуш, децис, рипкорд, сумицидин) методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии в растениях, почве, воде водоемов. — M.: Минздрав СССР, 1981.
3. Временная методика определения T-2-токсина в кормах с применением имму-ноферментного анализа. — M.: Департамент ветеринарии Минсельхозпрода России, 1996.
4. Ермаков В. В., Кроль М. Ю., Устенко В. В. Методы определения тяжелых металлов: ртути, кадмия, свинца, меди / В кн.: Справочник—санитария кормов. — M.: Агропромиздат, 1991.
5. Клисенко М. А. Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах, внешней среде. — M.: Колос, 1983.
6. Методы определения нитратов и нитритов. — M.: Отделение ветеринарии ВАСХНИЛ, 1986.
7. Методика определения дезоксиниваленола в зерне с применением обращен-но-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии. — M.: Отделение ветеринарной медицины РАСХН, 1995.
8. Методические указания по санитарно-микологической оценке и улучшению качества кормов. — M.: ГУВ Госагропрома СССР, 1986.
9. Николаев А. В. Теория и практика химико-токсикологического анализа в ветеринарии. — M.: Колос, 1968.
10. Серов В. M., Волкова В. А. Методы определения алкалоидов / В кн.: Справочник — санитария кормов. — M.: Агропромиздат, 1991.
11. Таланов Г. А., Хмелевскнй Б. Н. Справочник—санитария кормов. — M.: Агропромиздат, 1991.
ГЛАВА 9
ИММУНОФЕРМЕНТНЫЕ МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГОРМОНОВ
9.1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТРИЙОДТИРОНИНА (T3)
В СЫВОРОТКЕ ИЛИ ПЛАЗМЕ КРОВИ (DIAGNOSTIC
SYSTEM LABORATORY, США)
Принцип. Метод основан на ферментном иммуноанализе, в основе которого лежит конкуренция немеченных и меченных ферментом антигенов за определенное число антигенсвязывающих участков антител. Количество фермент-меченых антигенов, связавшихся с антителами, обратно пропорционально концентрации немеченых антигенов исследуемого образца. Показатель абсорбции обратно пропорционален количеству трийодтиронина в пробе.
Реактивы: 96 полистириновых микротитрационных ячеек (плашка), внутренние стенки которых покрыты сывороткой с антителами овцы к Тз;
стандарты трийодтиронина — 6 флаконов по 1,0 мл в каждом, обозначенные A—F, содержащие концентрации Т3 соответственно
0 нг/дл, 50, 100, 250, 500 и 750 нг/дл в бычьей альбумин-стабили-зированной основе;
Тз-контроли — 2 флакона по 0,5 мл. Уровни I и II, содержащие высокую и низкую концентрации Т3 в бычьей альбумин-стабили-зированной основе с нертутным консервантом;
Тз-энзимный конъюгатный концентрат — 1 флакон (1,0 мл), содержащий конъюгат трийодтиронинпероксидазы хрена в бычьей альбумин-стабилизирующей основе; содержит консервант;
буфер для приготовления конъюгата Тз-энзим (красный) —
1 флакон (U мл) содержит буфер с консервантом и связанные с протеином ингибиторы;
ТМБ-хромогенный раствор — 1 флакон (11 мл) содержит тетра-метилбензидин (ТМБ) в цитратном буфере с пероксидом водорода;
концентрат моющего раствора — 1 флакон (105 мл) содержит поверхностно-активные вещества в фосфатно-солевом буферном растворе и консервант;
стоп-раствор — 1 флакон (11 мл) содержит 0,2 M раствор серной кислоты.
Примечание. Образцы крови помещают в воду со льдом и немедленно доставляют в лабораторию, где быстро отделяют сыворотку или плазму эритроцитов. Все реагенты и пробы перед исследованием следует привести к комнатной температуре (25 °С) и тща-
28*
435
тельно перемешать. Сыворотку (плазму) крови хранить не более 48 ч в холодильнике при 2—8 °С. Для более длительного хранения исследуемые образцы замораживают и хранят при —20 °С и ниже. Не рекомендуется исследовать гемолизированные и ли-пемичные образцы. Образцы сыворотки (плазмы) крови, стандарты и контроли рекомендуется исследовать в дублях. Оборудование: микропланшетный иммуноферментный анализатор Stat Fax-2100, настраиваемый на длину волны 450 нм; инкубатор-шейкер (встряхиватель) Stat Fax-2200, настраиваемый на 500—700 движений в 1 мин; автоматическое промывающее устройство Stat Fax-2600; полуавтоматические дозаторы объемом 5—50, 50—200 и 200—1000 мкл, наконечники; градуированная лабораторная посуда, полистириновые пробирки; фильтровальная бумага для просушивания стрипов; бидистиллированная вода; миллиметровая бумага для построения калибровочного графика (при отсутствии программного обеспечения).
