Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка):
59. Величина Rf и цвет флуоресценции в зависимости от алкалоида
Алкалоид
Цвет флуоресценции пятна
Аконитин
0,61
Нет
Зонгорин
0,51
Светло-желтый
Лаппаконитин
0,52
Голубой
Кондельфин
0,60
Сине-фиолетовый
Талатизин
0,20
Нет
Лупинин
0,13
»
Секуринин
0,72
Желтый
Анабазин
0,22
Нет
426
Клиническое значение. Обнаружение алкалоидов в кормах дает основание лишь на постановку предварительного диагноза на отравление. Окончательный диагноз может быть поставлен при обнаружении в кормах остатков ядовитых растений — продуцентов данного вида алкалоидов, клиники интоксикации и данных патологоанатомического вскрытия павших животных.
8.10. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИАНИДОВ
К цианогенным растениям относят сорго, суданскую траву, лен обыкновенный, клевер, вику яровую, вику узколистную, бобовник, манник водяной, бухарник шерстистый и некоторые другие. Наибольшее количество цианидов концентрируется в начальной фазе развития растений, поэтому и случаи отравлений возникают при весенних и ранне-летних выпасах животных или же вследствие подкормки скота зеленой массой, полученной из ци-аногенных растений. Случаи отравления животных были отмечены при скармливании им льняных жмыхов и шротов. Причина отравления животных — образование в их организме синильной кислоты, смертельная доза которой составляет 1 мг/кг массы животного.
При поедании животными цианогенных растений, жмыхов или шротов, содержащих цианогенные соединения, в желудке или рубце под действием ферментов в присутствии воды образуется синильная кислота, которая и действует токсически на организм.
Для диагностики отравлений исследуют содержимое желудка или рубца павших животных на присутствие синильной кислоты не позднее чем через 2—3 ч после их гибели.
Принцип. Метод основан на выделении из пробы синильной кислоты путем отгонки с водяным паром с последующим ее определением пробой с бензидиновой или пикратной бумагой, а также путем титрования 0,1 н. раствором серебра нитрата.
Реактивы: 1%-ный водный раствор пикриновой кислоты;
10%-ный водный раствор натрия гидрокарбоната (х. ч.);
0,25%-ный раствор бензидина (х. ч.);
0,5%-ный раствор меди сульфата (х. ч.);
кислота винная (х. ч.);
1,5%-ный раствор калия гидроксида;
0,1 н. раствор серебра нитрата;
пикратная бумага. Полоски фильтровальной бумаги размером 1,0—5,0 см пропитывают 1%-ным раствором пикриновой кислоты и высушивают при комнатной температуре, после чего смачивают 10%-ным раствором натрия гидрокарбоната и вновь высушивают;
427
бензидиновая бумага. Полоску фильтровальной бумаги пропитывают свежим 0,25%-ным раствором бензидина в смеси (1:1) с 0,5%-ным раствором меди сульфата.
Оборудование: прибор для отгонки с водяным паром; водяная баня; колбы круглодонные различной вместимости; цилиндры мерные и другая лабораторная посуда.
Ход определения. В круглодонную колбу помещают 100—150 г содержимого желудка, смешивают с дистиллированной водой до консистенции жидкой кашицы, подкисляют 10 %-ным раствором винной кислоты. Колбу ставят на водяную баню и подсоединяют к аппарату для перегонки водяным паром. Перегонку следует вести медленно, регулируя ее нагреванием парообразователя. Отгонку ведут до получения 100 мл дистиллята. Дистиллят исследует пробами с пикратной или бензидиновой бумагой и определяют содержание синильной кислоты путем титрования 0,1 н. раствором серебра нитрата.
Проба с пикратной бумагой. В колбочку на 50 мл помещают 10—15 мл дистиллята, добавляют 2—3 мл 10%-ного раствора винной кислоты и туда же подвешивают пикратную бумагу. Колбочку закрывают пробкой. При наличии синильной кислоты через 10—15 мин пикратная бумага меняет окраску из золотисто-желтой в красно-оранжевую. Аналогично ставят пробу с бензидиновой бумагой. При наличии синильной кислоты бензидиновая бумага синеет.
Количественное определение синильной кислоты. В коническую колбу отбирают 90 мл дистиллята, добавляют 10 мл 1,5%-ного раствора калия гидроксида и быстро титруют 0,1 н. раствором серебра нитрата при интенсивном взбалтывании. Перед концом титрования исчезает молочно-белый и появляется сиреневатый оттенок титруемой жидкости. После появления оттенка раствор серебра нитрата добавляют постепенно по каплям до появления не исчезающего при взбалтывании осадка.
Расчет. Содержание свободной и связанной синильной кислоты вычисляют по формуле
т, V- 0,318- 100
где X — содержание свободной и связанной синильной кислоты, %; т< — масса серебра нитрата, содержащегося в 1 мл раствора 0,1 н. концентрации, г; к — объем раствора серебра нитрата, пошедшего на титрование, мл; 0,318 — коэффициент пересчета количества серебра нитрата на синильную кислоту; 100 — коэффициент пересчета в проценты; т — масса исследуемой пробы, г.
Клиническое значение. Обнаружение в содержимом желудка или рубца синильной кислоты в количестве 0,02 % и выше дает основание для предварительного диагноза на отравление цианидами. Окончательный диагноз может быть поставлен на осно-