Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка):
Сущность происходящих при титровании химических реакций, выбор индикатора, условия проведения реакции, порядок титрования описаны в соответствующих руководствах. Методы химического анализа в применении к биологическим объектам постоянно совершенствуются. Методики публикуются. В настоящее время в лабораториях широко используют автоматическое титрование.
В расчетах по результатам титрования в объемном анализе важно усвоить понятие «титр раствора по определяемому веществу». Титр раствора, как уже говорилось, показывает содержание вещества (г) в 1 мл раствора и связан с нормальностью этого раствора соотношением
T= [c(\/zx)M(]/zx))/\000.
Например, титр 0,1 н. раствора HCl
Тнсі = снсі^нсі/ЮО0 = (<U • 36,5)/1000 = 0,00365 (г HCl в 1 мл раствора HCl).
Если рабочим раствором HCl необходимо проводить неоднократные определения какого-либо вещества, например NaOH, рассчитывают титр раствора HCl по определяемому веществу NaOH, с которым будет происходить реакция при титровании. В таком случае в формулу для расчета титра войдет эквивалентная масса того вещества (NaOH), с которым реагирует рабочий раствор (HCl). Ответ получают в граммах определяемого вещества NaOH, которые реагируют с 1 мл рабочего раствора:
7HCVNaOH = (CHCI' MNaOH)/1000 (г NaOH, вступивших в реакцию с 1 мл раствора HCl данной нормальной концентрации).
3*
35
Титр раствора по определяемому веществу облегчает расчеты при анализе, так как достаточно умножить данный титр на объем рабочего раствора, пошедший на титрование, чтобы узнать массу нужного вещества, содержащегося в анализируемой порции. Например, если в приведенном случае при титровании какого-либо раствора NaOH израсходовано 15 мл 0,1 н. рабочего раствора HCl, то масса щелочи
0(NaOH) = Гнсі/NaOH^HCi = 0,00365 • 15 = 0,05475 г.
В таблице 2 приведены примеры приготовления индикаторов для кислотно-основного титрования.
2. Приготовление индикаторов
Окраска
кислотной формы
щелочной формы
Розовая Красная
Оранжево-желтая
Желтая
»
Синяя
Бесцветная
Красная
Желтая
»
Бесцветная
Синяя
Индикатор
Область перехода (интервал pH)
Метиловый
3,1-4,4
оранжевый,
0,1%-ный рас-
твор
Метиловый
4,4-6,2
красный,
0,1%-ный рас-
твор
Лакмус
5,0-8,0
(азолитмин),
0,5%-ный рас-
твор
Фенолфталеин,
8,0-10,0
0,1%-ный рас-
твор
Феноловый
6,8-8,0
красный,
0,1%-ный рас-
твор
Тимол фталеин,
9,3-10,5
0,5%-ный рас-
твор
Универсальный
2,0-10,0
индикатор (по
Кольтгофу)*
Способы приготовления
в 100 мл воды
0,1 г индикатора растворяют
в 100 мл этилового спирта
0,5 г индикатора растворяют
в 100 мл воды
0,1 г индикатора растворяют
в 100 мл этилового спирта
0,1 г индикатора растворяют в 100 мл 25%-ного водного раствора этилового спирта
0,5 г индикатора растворяют
в 100 мл этилового спирта
Смешивают 0,1%-ные спиртовые растворы индикаторов: диметиламиноа-зобензол 15 мл, бромтимол синий 20 мл, метиловый красный 20 мл, фенолфталеин 20 мл, тимол фталеин 20 мл
* Универсальный индикатор имеет окраски: при pH 2 (и меньше) — красно-розовую, pH 3 — красно-оранжевую, pH 4 — оранжевую, pH 5 — желто-оранжевую, pH 6 — лимонно-желтую, pH 7 — желто-зеленую, pH 8 — зеленую, pH 9 — сине-зеленую, pH 10 (и выше) — фиолетовую.
36
2.5. ПРИГОТОВЛЕНИЕ БУФЕРНЫХ СМЕСЕЙ, КОЛОНОК, СИЛИКАГЕЛЬНЫХ ПЛАСТИНОК
Растворы большинства чистых химических веществ имеют неустойчивый pH, который изменяется при добавлении кислот и щелочей. Многие биохимические анализы требуют выполнения реакций в условиях определенного интервала pH, мало изменяющегося при внесении небольших количеств кислоты или щелочи. Для этой цели применяют буферные растворы, представляющие собой смеси слабых кислот с солями этих кислот или смеси слабых оснований с солями слабых оснований. Буферным действием могут обладать смеси кислых солей разной основности, например NaH2PO4 + Na2HPO4, где первая соль играет роль слабой кислоты, а вторая — ее соли.
Способность раствора противостоять прибавлению кислоты или щелочи называется его буферной емкостью. Выражается она числом эквивалентных масс кислоты или щелочи, которые нужно прибавить к 1 мл раствора, чтобы его pH изменился на единицу. Для большинства буферных смесей интервал pH, в котором они обладают достаточным буферным действием, не превышает 2. Чтобы расширить этот интервал, пользуются буферными смесями, состоящими из нескольких слабых кислот и их солей, подобранных с таким расчетом, чтобы там, где кончается область буферного действия одной из них, начиналась область другой. Такие буферные смеси называются универсальными.
Буферные растворы готовят согласно разработанным рецептам. Исходные растворы для буферных смесей приготавливают особенно тщательно. Так, раствор NaOH не должен содержать соды. Для этого 100 г х. ч. NaOH растворяют в 120 мл воды и сливают в цилиндр, плотно закрытый пробкой. В таком концентрированном растворе сода не растворяется и выпадает в осадок. Затем раствор осторожно декантируют и разводят до требуемой концентрации.
