Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Кочетов Г.А. -> "Тиаминовые ферменты " -> 4

Тиаминовые ферменты - Кочетов Г.А.

Кочетов Г.А. Тиаминовые ферменты — М.: Наука, 1978. — 234 c.
Скачать (прямая ссылка): tiaminovinoviefermenti1978.djvu
Предыдущая << 1 .. 2 3 < 4 > 5 6 7 8 9 10 .. 86 >> Следующая

Ферменты, входящие в состав пируватдегидрогеназ-ного комплекса, связаны иековалентными связями, причем пируватдекарбоксилаза и лииоилдегидрогеназа не взаимодействуют между собой, но оба связываются с ли-поилтрансацетилазой [206, 262, 329, 336]. Этот фермент, таким образом, выполняет не только каталитическую функцию, но и структурную.
Пируватдекарбоксилаза, как в изолированном виде, так и в составе комплекса, способна осуществлять окислительное декарбоксилирование пирувата при добавлении в инкубационную среду искусственных акцепторов электронов, например, феррицианида, дихлорфенолин-дофенола или метиленового синего [132, 189, 263, 296, 428, 458]. При этом происходит образование COs и уксусной кислоты; функцию акцептора ацетила в данном случае ьыполняет вода. В искусственных условиях можно было наблюдать индивидуальные реакции, катализируемые и двумя другими ферментами комплекса — липо-илтрансацетилазой и липоилдегидрогеназой [343].
Пируватдегидрогеназный комплекс катализирует окислительное декарбоксилирование не только пирувата, но и а-кетобутирата и а-кетовалериата, хотя и со значительно меньшей скоростью [226, 269], а также, возможно, а-кетоизокапроата и а-кетокапроата [269, 293].
Кроме окислительного декарбоксилирования указанных а-кетокислот, пируватдегидрогеназный комплекс способен осуществлять образование ацетоина [181, 226, 263, 366]:
СН3СОСООН -f CHsCHO СН3СОСНОНСН3 -f со2, ацетолактата [226, 238, 267]:
2CHsCOCOOH -> СН^СОСОН (CHS) СООН + СО,, и дисмутацию диацетила [181, 263]:
2СН^СОСОСНз -> СНзСОСНОНСНз-f 2СНаСООН.;
Впервые в высокоочищенном состоянии пируватдегидрогеназный комплекс был выделен из грудной мышцы голубя [263, 459]. В настоящее время он получен из Е. coli [143, 295, 297, 298], дрожжей [226], почек и сердца быка [262, 327, 328, 329], сердца [204, 208], печени [328] и мозга [475] свиньи, из Neurospora crassa [201].
Препараты пируватдегидрогеназного комплекса, даже выделяемые из одного и того же источника, имели
11
разный коэффициент седиментации и в ряде случаев существенно различались по величине молекулярного веса [204, 20-3, 226, 293, 327]. Это объясняется тем, что в процессе выделения комплекса от него могут частично отщепляться составляющие его компоненты. Так, например, ферментативная активность и коэффициент седиментации пируватдегидрогеназного комплекса, выделенного из сердечной мышцы свиньи, значительно увеличивались после его предварительной инкубации со свободной пи-руватдекарбоксилазой [206]. Аналогичная возможность (отщепление от пируватдегидрогеназного комплекса в процессе его выделения) предполагается и для липоил-дегидрогепазного компонента [84]. Поэтому в настоящее время трудно говорить об абсолютной величине молекулярного веса пируватдсгидрогеназных комплексов, выделенных из разных источников. Ясно лишь то, что он равен нескольким миллионам (комплексы, выделенные из животных тканей, имеют молекулярный вес
7—8 млн., а комплексы нз микроорганизмов — около
4 млн.).
Разобщение пируватдегидрогеназного комплекса на составляющие его компоненты и затем реконструкцию с восстановлением его исходных свойств (макромолеку-лярнон структуры и каталитической активности) впервые удалось осуществить с препаратами нз Е. coli [298] и с мультиэнзимным комплексом, выделенным из сердечной мышцы свиньи [206, 207, 292]. Сейчас в большей или меньшей степени это сделано с пируватдегидрогеназны-ми комплексами, изолированными и из других источников [7, 8, 66]. Согласно последним данным [150], пиру-ватдегидрогеназныи комплекс из Е coli имеет мол. вес около 4 600 000 и при соответствующей обработке распадается на одну молекулу липоилтрансацетилазы (мол. вес 1 700 000, 24 полипептидные цепи, 24 ковалентно связанных остатка липоевой кислоты), 12 молекул пируват-декарбоксилазы (мол. вес 192 000, по-видимому, две полипептидные цепи на молекулу) и шесть молекул липоил-дегпдрогеназы (мол. вес 112 000, две полипептидные цепи на молекулу).
Приведенные данные величины молекулярного веса комплекса и количественного содержания в нем отдельных ферментов являются, по-видимому, наиболее точными, тем не менее по причине, о которой говорилось выше,
12
нельзя безоговорочно считать, что они относятся к нативному комплексу.
Несколько особняком стоит пируватдегидрогеназный комплекс, выделенный из Azotobacter vinelandii [107, 178]. Он имеет сравнительно низкий мол. вес — порядка
1 ООО ООО В его состав входят восемь молекул пируват-декарбоксилазы (мол. вес каждой равен 89 000), одна молекула лннонлдегидрогеназы, состоящая из двух субъединиц (мин. вес субъединицы — 50 000) и дна типа молекул липоилгрансацетилазы: четыре с мол. весом 82 000 и две — с мол. весом 59 000. Последние два значения мол. веса, как полагают авторы, несколько завышены.
Пируватдегидрогеназный комплекс из Azotobacter vinelandii, кроме обычной последовательности реакций, приводящей к окислительному декарбоксилированию пи-ровиноградной кислоты с образованием ацетил-КоА, способен, в присутствии молекулярного кислорода, осуществлять непосредственное превращение пирувата в уксусную кислоту: пируват+Ог+НгО-^НгОг+СЮг+ацетат.
Предыдущая << 1 .. 2 3 < 4 > 5 6 7 8 9 10 .. 86 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed