Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Кочетов Г.А. -> "Тиаминовые ферменты " -> 11

Тиаминовые ферменты - Кочетов Г.А.

Кочетов Г.А. Тиаминовые ферменты — М.: Наука, 1978. — 234 c.
Скачать (прямая ссылка): tiaminovinoviefermenti1978.djvu
Предыдущая << 1 .. 5 6 7 8 9 10 < 11 > 12 13 14 15 16 17 .. 86 >> Следующая

со
I *
соон
30
фосфата в &-карбанион при pH ниже 8 протекает с очень низкой скоростью. В то же время оптимум pH нпруватдекарбоксилазы, с которой проводили исследования, лежит в области 6—7.
Поэтому стали считать [352, 508, 509, 515], что первичным продуктом реакции декарбоксилирования пирувата (и других а-кетокислот) является а-карбанион, который должен легко вступать во взаимодействие с остатком липоевой кислоты в реакциях, катализируемых дегидрогеназнымн комплексами а-кетокислот, и с молекулой альдегида при ацилонновой конденсации.
S
\n-------/
Лип/ | + НО. _ I \ S ХС—с
1
Лип
SH
\
N-
о ь
о
II
Н-С.+ R
+
N-
\s/\ ___/
R
ОН
\
С—С
\SX\
XV1I1
ОН он f I н—с—с—
1 I R R
^N-
—С \S/\ -У
Предполагают, что по этому же типу осуществляется катализ и транскетолазой.
~ ~ \Nt
0 ОН
II \
II-C+ с~~
1 I л
R СН ОН
С
\s/\
\к|±
он он ^
I I II
vH-C—с—с
R СН.ОН
\с/\
Несколько сложнее обстоит дело с фосфокетолазой, расщепляющей ксилулозо-5-фосфат (фруктозо-6 фосфат) до ацетилфосфата и глицеральдегид-3-фосфата (эритрозо-4-фосфата). Реакции, катализируемые данным ферментом, необратимы, и в его присутствии не происходит обмена ни между ацетилфосфатом и радиоактивным фосфатом, ни между ксилулозо-5-фосфатом и триозофосфатом (вне зависимости от того, имеется ли в 'среде фосфат или он отсутствует) [209]. Это как будто бы исключает возможность образования «активного гликольальдегида» в качестве промежуточного продукта
31
в фосфокетолазной реакции. Был предложен следующий механизм действия данного фермента [241].
СНоОН
I
с=о
I
сноп
I
R
N5-
+ ~с \s/\
он он
I 1
н—с—с-------
I [
R HJZ—ОН
\jsj-

\s/\
-Н+
-он-
oil 1
с—
сн.
\g/\ It
О
\N-
i
I
сня
\c/\
О
h.po; и
------> H,P08-0-C-CHa
Согласно этому механизму, сначала, как и в случае других тиаминовых ферментов, карбонильная группа субстрата взаимодействует со вторым углеродным атомом тиазолового кольца тиаминпирофосфата. Затем одновременно происходит разрыв —С—С-связи субстрата и отщепление молекулы воды (возможно, молекула воды от субстрата отщепляется в момент его взаимодействия с коферментом). В результате последующей кетонизации образуется очень лабильное ацетильное производное тиаминпирофосфата, легко взаимодействующее с фосфатом.
Нельзя, однако, не учитывать того, что в присутствии фосфокетолазы и фосфата диоксиэтилтиаминпирофосфат превращается в ацетилфосфат [452, 533]. Более того, диоксиэтилтиаминпирофосфат обнаруживается при действии фосфокетолазы на ксилулозо-5-фосфат. Реакция эта оказалась обратимой, и в присутствии субстратных количеств фермента наблюдался обмен двууглеродным фрагментом между диоксиэтилтиампнпирофосфатом и ксилулозо-5-фосфатом [532]. Эти данные указывают на возможность образования общего промежуточного про-
32
дукта на ранних стадиях реакций, катализируемых транскетолазон и фосфокетолазой.
Механизм участия тиаминпирофосфата в реакции, катализируемой сульфоацетальдегид : сульфолиазой, не исследовался, но предположительно последовательность отдельных стадии может быть написана следующим образом [301]:
В модсльнь t опытах было показано, что различные соли тиазолпя способны декарбоксилировать а-кетокис-лоты, образуя «активный альдегид» или осуществляя ацнлоиновую конденсацию. Освобождения свободного альдегида, однако, не происходило. Последнее можно было наблюдать при добавлении в систему органических оснований, таких как имидазол, 2-амннопнрнмпдин и др. Это наводило на мысль, что одна из функций пиримидиновой половины тиаминпирофосфата в ферментативных реакциях может заключаться в освобождении альдегида нз связанной с коферментом формы. Данный вопрос детально исследовали в лаборатории Шелленбергера [430, 443, 444, 447, 448].
Оказалось, что любая модификация 4'-аминогруппы тиаминпирофосфата, так же как и замена ее на водород, дает аналоги, полностью лишенные коферментной функции. Отсутствие ферментативной активности могло указывать па то, что аналоги лишены способности взаимодействовать с апоэнзимом. Действительно, это имело место, например, при метилировании 4/-ампногрупны [447]. Однако другой аналог — окситнамннпнрофосфат (//) взаимодействовал с ппруватдекарбоксилазой в
Предыдущая << 1 .. 5 6 7 8 9 10 < 11 > 12 13 14 15 16 17 .. 86 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed