Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Киршвинк Дж. -> "Биогенный магнетит и магниторецепция. Новое о биомагнетизме. Том 1" -> 97

Биогенный магнетит и магниторецепция. Новое о биомагнетизме. Том 1 - Киршвинк Дж.

Киршвинк Дж., Джонса Д. Биогенный магнетит и магниторецепция. Новое о биомагнетизме. Том 1 — М.: Мир, 1989. — 353 c.
ISBN 5-03-001274-5
Скачать (прямая ссылка): biogenniymagnetit1989.djvu
Предыдущая << 1 .. 91 92 93 94 95 96 < 97 > 98 99 100 101 102 103 .. 150 >> Следующая

графиях, и в таких условиях эксперимент проводить нельзя, так как при этом трудно или вообще невозможно достичь высокого разрешения.
Предварительные испытания оборудования можно проводить на образце, подлежащем исследованию, или на специально изготовленных тест-объектах. Последние используют в процессе технического обслуживания микроскопа. Следует помнить также, что при продолжительном наблюдении исследуемый образец может повреждаться электронным пучком или загрязняться.
3.2. Работа с микроскопом
Исследование и фотографирование большинства обычных образцов в электронном микроскопе относительно несложны, если не требуется особо точной работы с высоким разрешением. При исследовании хорошо приготовленных и равномерно нанесенных на сетку образцов минеральных частиц остается лишь выбрать случайным образом несколько участков для фотографирования при одном или нескольких увеличениях. Изображение тщательно фокусируют и следят, нет ли дрейфа образца - медленного однонаправленного смещения из-за нестабильности подложки или зарядных эффектов. Если высокое разрешение не обязательно, лучше немного недофокусировать изображение, что обычно легко осуществить на практике. Если дрейф есть, то не следует пытаться делать фотографии, так как они все без исключения будут плохими.
Изображение, создаваемое просвечивающим электронным микроскопом на флуоресцирующем экране, образуется - как и следует из названия микроскопа - электронами, прошедшими через образец. Поэтому изменения контраста образца могут быть обусловлены несколькими причинами, в частности различиями в химическом составе за счет масс-абсорбционных эффектов, поскольку более тяжелые атомы поглощают больше электронов, чем более легкие. Существенны также различия в толщине образца и его кристаллической структуре. Так, непрозрачный вид гранулы может объясняться либо слишком крупными размерами, либо электроноплотным материалом, из которого она состоит, либо особенностями кристаллографической ориентации.
При изменении ориентации или фокусировки изображение кристаллических образцов изменяется. Значительные изменения контраста являются результатом дифракции на кристаллической структуре, обусловленной различиями в толщине гранулы при разных ориентациях. Небольшие изменения величины угла Брэгга могут существенно повлиять на изображение, и исследователь должен быть готов к этому, когда производит фокусировку. Интерпретацию таких изображений облегчает серия картин, получаемых при различных расфокусировках. При удалении диафрагмы объектива эти эффекты усиливаются, поскольку при этом увеличивается вклад в общую картину лучей, претерпевших дифракцию. У некристаллических материалов эти явления отсутствуют. Поэтому наличие или отсутствие дифракционных контуров и подобие
изображений очень полезны для решения вопроса о кристаллических свойствах неизвестного твердого материала.
Большая часть минералов и в особенности минералы железа сильнее поглощают электроны, чем неокрашенные биологические ткани. Это свойство можно успешно использовать при поиске минеральных включений в серийных сверхтонких срезах тканей. После выявления областей минерализации делают новые срезы, которые можно окрашивать для детектирования биологических структур. Необходимость в новых срезах возникает потому, что после исследования в просвечивающем электронном микроскопе срезы редко хорошо воспринимают красители.
При фотографировании дисперсного зернистого материала возникает проблема определения выдержки. Автоматические экспонометры могут давать неверные показания, и тогда гранулы могут быть недо-экспонированы по сравнению с фоном. Исследователь должен решить, что более важно -передача общей формы или внутренней структуры. Серия снимков с различными экспозициями гарантирует, что, по крайней мерю на одной из фотографий, большая часть гранул будет снята с правильной выдержкой. Когда размеры и толщина частиц в поле зрения варьируют, невозможно выбрать экспозицию, подходящую для всех зерен.
При работе с электронным микроскопом время от времени наблюдают структуры, которые заслуживают упоминания в связи с тем, что они могут иметь артефактное происхождение. Двумя наиболее существенными из них при исследовании дисперсного материала являются кайма и включения.
Светлая или темная кайма по краям объекта может возникать различными путями. Когда кайма расположена вокруг гранул более или менее симметрично, она может быть артефактом фокусировки, возникающим из-за сильной пере- или недофокусировки. Кайма может быть также результатом общего загрязнения, вызванного длительным пребыванием препарата под электронным пучком. Она может возникать и при загрязнении вследствие высыхания растворимых органических материалов, солей, буферов или красителей. Асимметричная кайма может быть вызвана сильным астигматизмом линзы объектива. Не исключено, что ее появление на фотографиях связано с дрейфом образца или изменением ускоряющего напряжения во время фотографирования. В виде каймы может также выглядеть покрытие и тяжелый металл на «солнечной» стороне гранулы, если образец оттенен слишком сильно.
Предыдущая << 1 .. 91 92 93 94 95 96 < 97 > 98 99 100 101 102 103 .. 150 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed