Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
Первые четкие эксперименты, убедительно продемонстрировавшие отсутствие взаимодействий между иммунными лимфоцитами, различающимися по антигенам гистосовместимости, выполнили Кац и др. [5]. В использованной ими экспериментальной модели (рис. 15.1) мышам FX(A X Q) вводили в качестве источника Т-лимфоцитов, примированных белком-носителем, клетки селезенки мышей линии А, иммунных к бычьему гамма-глобулину (БГГ). Через 24 ч мышей-реципиентов облучали в дозе 600 рад и затем им вводили (в качестве источника гаптен-специфических В-лимфоцитов) клетки селезенки мышей линии А
Клетки
Рис. 15.1. Схема эксперимента, в котором различающихся по Антигенам гистосовмести-установлено отсутствие кооперации в ходе мости. (По [ 93].) антительного ответа Т- и В-лимфоцитов,
или Q, иммунизированных динитрофенилированным гемоцианином моллюска фисуреллии (ДНФ-КЬН). Перед введением клетки обрабатывали антисывороткой против антигена Thy-1 и комплементом. После этого мышей-реципиентов иммунизировали ДНФ-БГГ и через 7 дней определяли титры антител к ДНФ-группе в сыворотке этих животных. Результаты типичного эксперимента приведены в табл. 15.1. Синтез антител против ДНФ наблюдался лишь в том слу-
чае, если использовались Т- и В-лимфоциты одной линии (группы I и II). Однако, если использовались Т-лимфоциты линии А, а В-лимфоциты — линии Q, или наоборот, то антитела против ДНФ либо совсем не образовывались, либо образовывались в незначительном количестве (группы III и IV). Говоря о значимости этих экспериментов, следует особо подчеркнуть воспроизводимость результатов в контрольных группах V и VI (табл. 15.1).
Таблица 15.1. Отсутствие кооперативных взаимодействий in vivo Т- и В-лимфоцитов, различающихся по антигенам гистосовместимости1 (обобщенные данные Каца [5])
Опыт Группа Т-лимфоциты В-лимфоциты Анти-ДНФ-анти-
тела, мкг/мл
1 I А А 220
II Q Q 120
III А Q 5
IV Q А 15
V (AXQ) (AxQ) 1800
2 VI А (AXQ) 1850
1 Схема опытов показана на рис. 15.1.
В этой части экспериментов ясно показано, что В-лимфоциты FX(A х Q) взаимодействуют с Т-лимфоцитами линии А (VI) так же, как и с сингенными Т-лимфоцитами F^A X Q) (V). Этот контроль убедительно свидетельствует о том, что отсутствие кооперации Т-лимфоцитов линии А с В-лимфоцитами линии Q не связано с реакцией на аллоантигены В-лимфоцитов линии Q (т. е. отторжением), так как та же самая реакция должна развиваться в ответ на антигены гистосовместимости линии Q В-лимфоцитов FX(A х Q). На этом основании Кац и др. [5] объяснили свои наблюдения отсутствием кооперации различающихся по антигенам гистосовместимости Т- и В-лимфоцитов в ходе антительного ответа.
Было постулировано, что кооперация объясняется наличием молекул клеточного взаимодействия (CI — от англ. cellular interaction) на поверхности двух сингенных клеток. В серии работ по генетическому картированию с использованием резистентных конгенных линий мышей гены, кодирующие молекулы CI, были сначала отнесены к МНС-области, а затем к ее /-району [6]. Пример подобного генетического картирования бляшкообразующих клеток (БОК) приведен в табл. 15.2. В этих экспериментах изучался синтез анти-ДНФ-антител
Таблица 15.2. Продукты генов, кодируемых районом I, определяют МНС-рестрикцию хелперных Т-лимфоцитов х)
Источник Аллели МНС Источник Аллели МНС Количе
К 1-А 1-J 1-Е 1-С S D К I-А I-J 1-Е 1-С S D
A/J к к к к d d d B10 .BR к к к к к к к 1350
A/J к к к к d d d A.TL s к к к к к d 1800
А.ТН S S S S s s d A.TL s к к к к к d 100
!) Буквами обозначен гаплотип аллельного варианта каждой из областей МНС. Жирным шрифтом выделены общие аллельные варианты МНС доноров Т- и В-лимфоцитов.
методом определения пятен гемолиза после иммунизации ДНФ-КЬН. В качестве В-лимфоцитов использовались обработанные анти-Thy-l и комплементом клетки селезенки мышей, примированных ДНФ-модифицированным экстрактом Ascaris suum, а в качестве Т-лимфоцитов — облученные селезеночные клетки мышей, примированных KLH.
Если использовали примированные В-лимфоциты от мышей линии A/J, а примированные Т-лимфоциты — от мышей линии B10.BR, то наблюдалась кооперация этих клеток при генерации анти-ДНФ антител. Эти две линии мышей несут общие аллели области К, а также субобластей I-А, I-J и I-Е генов МНС, но отличаются друг от друга по областям J-C, S и D помимо многих различий по другим локусам вне МНС. Следовательно, для эффективного взаимодействия клеток необходимо совпадение аллелей только в левой половине МНС.
Если же В-лимфоциты линии А/J добавляли к Т-лимфоцитам линии A.TL, о которой имелись общие аллели только I-А, I-J и I-Е субобластей, то взаимодействие клеток также отмечалось. Из этого следует, что для стимуляции ответа достаточна идентичность клеток по области I (табл. 15.2). Наконец, если В-лимфоциты линии А.ТН использовали в сочетании с Т-лимфоцитами линии A.TL, то кооперации клеток не происходило. Эти две линии различаются только по I-и 5-области МНС и небольшому числу локусов, расположенных правее области D (ближе к теломере). Рассмотренные данные указывают на то, что гистосовместимость по области I необходима для кооперации клеток, а идентичность по прочим локусам, а именно К и D районам МНС, не является обязательной. Дальнейшие работы по картированию показали, что локус, имеющий критическое значение для ответа на ДНФ-КЬН, расположен в субобласти I-А. В свое время был сделан вывод, что эти эксперименты свидетельствуют об обязательной экспрессии продуктов одной и той же субобласти I-А на клетках, вовлеченных в кооперативный иммунный ответ. Подобные структуры могли бы быть идентичными аллельными продуктами одного гена или продуктами тесно сцепленных разных генов субобласти I-А. Однако, как будет показано ниже, этот вывод оказался неверным.
