Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
100 аминокислотных остатков) пяти различных полипептидных цепей Н-2 класса I; цепи эти представляют собой продукты двух или трех локусов (К, D, L) двух различных гаплотипов (Ъ и d). При сопоставлении этих последовательностей выявляются некоторые интересные особенности антигенов Н-2. Прежде всего видно, что серологически выявляемые различия между продуктами генов отражают соответствующие различия в первичной структуре; обнаружение этого факта имело особенно важное значение в случае с молекулами Ld и Dd. Дело в том, что гены, кодирующие L и D, до настоящего времени не удавалось разделить рекомбинацией. Поэтому, только располагая данными о первичной структуре, можно было однозначно доказать, что соответствующие молекулы ве являются продуктами одного и того же гена.
При сопоставлении первичной структуры молекул, в табл. 14.3,
Рис. 14.4. Схематическое изображение аминокислотной последовательности молекулы Н-2КЬ и ассоциированной с ней молекулы f$,m.
Дисульфидные мостики Cys — Cys обозначены черными полосами. Молекула состоит из трех функциональных фрагментов: вне-клеточный фрагмент (остатки 1-281), мембранный фрагмент (остатки 282-308) и цитоплазматический фрагмент (остатки 309-346). Внеклеточная часть молекулы подразделяется приблизительно на три субобласти; такое подразделение основано на гомологии угле-
водных групп, расположенных на расстоянии 90 остатков друг от друга в доменах N и CI, а также на наличии двух внутримолекулярных дисульфидных мостиков в С1 и С2. Предположение о глобулярной природе внеклеточных субрайонов основано на ограниченной чувствительности молекулы к папаину. При обработке папаином получаются лишь два вида продуктов: интактный внеклеточный фрагмент молекулы и фрагмент, обозначенный как pap II, включающий домены N и С1. ([2]; печатается с разрешения.)
видно, что молекулы могут отличаться от «прототипной» (эталонной) молекулы Кь лишь по 13 остаткам (Dd) или в значительно большей степени (по 24 остаткам — Kd). Тот факт, что в данной ситуации наиболее отличной от молекулы Кь является ее аллельная форма Kd, не оставлял надежды на то, что в этой области полипептидной цепи можно выявить аминокислотные различия, которые могли бы служить маркерами конкретного локуса или области.
Таблица 14.3. Сравнение N-концевых последовательностей молекул класса I, принадлежащих гаплотипам Н-2Ь и H-2d 1)
1 2 3 4 5
Н-2К6 GPHSLRYFVTAVSRPGLGEPRYMEVGYVDDTEFVRFDSDAENPRYEPRAR
H-2DD .....М....Е...........Е.......I-S....N-K......................Р
Н-2Ка ...........................F-I-A.......Q...........D--A---F...Р
H-2De --S.................F................N..........................
H-2La .....М....Е...................I-S ...N-K......................Р
6 7 8 9 Ю
H-2Kb WMEQEGPEYWERETQKAKGNEQSFRVDLRTLLGYYNQSKGGSHTIQVISG
H-2Db .........................Q W......S---N..........А.....L---QM —-
Н-2Ка ...............E-Q — R-V--S-D-W...S-T--A-OR..............F--RMF-
H-2Da ---I..............R-R..................A-R.......А.......L--WMA--
H-2L* ...............I---1....43---W...N..............А---Т---U-W-MV-
1) Последовательности Н-гКDb, К**, приведены из работы Натенсона и др. [в]. Последовательность L.d была составлена на основании результатов секвенирования белка и ДНК [34].
Наиболее вариабельная область в последовательности из ста N-концевых остатков расположена между остатками 61 и 83; исходя из результатов сравнительного анализа HLA-B7 и HLA-A2, Строминжер [14] предположил, что эта область может быть участком, несущим аллоантигенную детерминанту. Этот вариабельный сегмент заканчивается высококонсервативной последовательностью, фланкирующей остаток Asn-86 (участок гликозилирования). В рассматриваемой последовательности из 100 остатков имеется одна наиболее вариабельная точка (положение 97), в этом положении у пяти молекул обнаружены четыре различные аминокислотные замены.
Различия между молекулами класса I более значительны, чем можно было бы ожидать для группы молекул, имеющих аналогичные функции и в ряде случаев представляющих продукты аллельных генов. Тем не менее сходство последовательностей достаточно велико, чтобы свидетельствовать об общем эволюционном происхождении соответствующих генов. Из 100 остатков 61 идентичен во всех молекулах, в еще 31 положении обнаружены лишь две аминокислотные замены в пяти положениях, причем в 19 положениях лишь один остаток из этих пяти отличается от остальных.
Помимо приведенных сведений, касающихся продуктов гаплотипов bud, имеются разрозненные данные о N-концевых последовательностях продуктов
некоторых других гаплотипов. Среди молекул класса I областей К и D есть лишь одна молекула, о первичной структуре которой ничего не известно, это молекула H-2R, кодируемая в области D гаплотипов d и q. Данную молекулу определяли серологическими методами. Единственные данные о структуре H-2R были получены методом ДСН-ЭПГ (электрофорез в полиакриламидном геле в присутствии ДСН).
