Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Дэвид Г. -> "Иммунология. Том 2" -> 44

Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.

Дэвид Г., Томас Дж. Иммунология. Том 2 — М.: Мир, 1987. — 456 c.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка): immunologiyat21988.djvu
Предыдущая << 1 .. 38 39 40 41 42 43 < 44 > 45 46 47 48 49 50 .. 283 >> Следующая

Met, N — Asn, P — Pro, Q — Gin, R — Arg, S — Ser, T — Thr, V — Val, W — Trp, Y - Туг
В p2m мыши положение 85 у мышей линии C57BL/6 занимает Ala, у мышей линии BALB/c — Asp. ([21]; печатается с разрешения.)
гии. Тем не менее исследование первого из изученных структурных элементов молекулы HLA, (32-микроглобулина, было выполнено с помощью классических методов белковой химии.
р2-Микроглобулин человека был выделен из мочи пациентов с поражением почечных канальцев. Его мол. масса равна 11,6 кДа. Анализ аминокислотной последовательности показал, что молекула (52-микроглобулина состоит из
99 аминокислотных остатков и содержит два остатка цистеина, образующие дисульфидный мостик. Уже давно была обнаружена гомология между р2т и константными областями иммуноглобулинов, также имеющими дисульфидный мостик. Ниже мы рассмотрим эту гомологию более подробно.
Вначале полная аминокислотная последовательность была установлена для j}2m человека; впоследствии была определена полная первичная структура р2т кролика, морской свинки и мыши. При сопоставлении первичных структур (рис. 14.3) выявляется большая степень гомологии (61—74%) между этими крайне консервативными белками. На малую изменчивость р2т в ходе эволюции указывают также наличие общих антигенных детерминант на молекулах р2т позвоночных разных видов и данные о способности р2т животных низших видов формировать in vitro комплексы с антигенами класса I человека.
Важнейшие вопросы, связанные с р2т> концентрируются вокруг его роли как малой субъединицы антигенов класса I. Некоторые сведения о значении этого белка были получены при изучении линии Дауди (клетки лимфомы Бэр-китта человека), клетки которой не экспрессируют на поверхности антигены HLA-A, В и С. Оказалось, что в этих клетках дефект экспрессии связан с неспособностью продуцировать (52т. Если клетки разрушить детергентом, в лизате обнаруживаются тяжелые цепи молекул класса I, которые можно преципитиро-вать соответствующими антителами. На основании этих данных сделан вывод, что р2т необходим для транспорта молекул класса I в аппарат Гольджи и далее к поверхности клетки. Данные биохимических исследований, связанных с выделением молекул р2т из пула молекул HLA, а также анализ реакций обмена
между молекулами |32т на поверхности клетки и свободными молекулами |}2т в растворе свидетельствуют о том, что |32т не связан ковалентно с тяжелой цепью и не закреплен в поверхностной мембране клетки. Получение моноклональных антител, одни из которых узнают антигены класса I в комплексе с (52т, а другие реагируют лишь со свободными тяжелыми цепями, свидетельствует в пользу того, что в присутствии р2т молекулы класса I претерпевают антигенные изменения.
14.2.2. Антигены HLA-A, В, С человека [11, 13—15]
Как уже было отмечено, МНС человека содержит три локуса, А, В, С, кодирующие главные трансплантационные антигены. По серологическим данным продукт локуса А имеет около 20 аллельных вариантов, продукты локуса В — 40 вариантов и локуса С — 8 вариантов. Первоначальные структурные исследования антигенов HLA принесли лишь ограниченную информацию о N-концевых участках этих молекул. Наиболее полные данные о первичной структуре были получены в результате двух различных подходов. Строминжер и др. [14] получили линию клеток от донора, гомозиготного по локусам А и В. Было показано, что эта линия клеток продуцирует молекулы класса I в очень высоких количествах. Клетки культивировали в условиях, обеспечивающих накопление большой биомассы. Затем из препаратов мембран биохимическими методами выделяли два антигена, А2 и В7. Трагард и др. [15] пошли по другому пути. Они брали трупные селезенки (независимо от HLA-гаплотипа доноров), выделяли из них пул антигенов класса I и использовали его для структурных исследований.
В табл. 14.1 приведена первичная структура внеклеточных участков HLA-А2, HLA-B7 и пула молекул класса I. Структура фрагмента В7, полученного в результате обработки клеток папаином, определена полностью; секвенирова-ние трансмембранного участка почти завершено (см. табл. 14.2). Некоторые особенности этих структур заслуживают особого внимания. Прежде всего внеклеточные участки молекулы можно подразделить на три области, которые напоминают домены иммуноглобулинов и состоят приблизительно из 90 остатков каждая; эти области получили названия альфа 1, альфа 2 и альфа 3. Два домена, альфа 2 и альфа 3, содержат внутрицепочечные дисульфидные мостики, замыкающие петли длиной соответственно 63 и 86 аминокислотных остатков. В молекуле имеется один участок гликозилирования по остатку аспарагина в положении 86. Трансмембранный участок молекулы состоит из незаряженных и большей частью гидрофобных остатков; он прилегает к С-концу участка, j отщепляемого папаином. Остальная часть молекулы, по-видимому, локализо- ; вана на цитоплазматической стороне клеточной мембраны. Имеются данные : о том, что некоторые остатки серина в этой части молекулы фосфорилированы.
В своей первоначальной работе по расшифровке последовательностей А2 и В7 Орр и соавторы [13] отметили, что участок, определяющий аллоантиген-ность, расположен, вероятно, между остатками 65 и 83. Анализ структур А2 и В7 показывает, что вариабельность ограничена немногими областями и тяжелые цепи обладают значительной гомологией на протяжении большинства отрезков. Наиболее яркий пример гомологии представляют участки между 194-м 1 и 271-м остатками; последовательности этих участков идентичны для всех изученных антигенов, за исключением одной-единственной замены: молекула i HLA-A2 в положении 253 вместо глутаминовой кислоты содержит глутамин. ’ Тем не менее для выявления участков, определяющих аллоантигенность, f. потребуется еще множество сравнительных исследований структуры аллельных |
Предыдущая << 1 .. 38 39 40 41 42 43 < 44 > 45 46 47 48 49 50 .. 283 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed