Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
93. Cotner Т., Mashimo H., Kung P. С., Goldstein G., Strominger J. S. Human T cell surface antigens bearing a structural relationship to HLA antigens, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 78, 3858 (1981).
94. van Rood J. J., de Vries R. R., Bradley B. A. Genetics and biology of the HLA system. In: The Role of the Major Histocompatibility Complex in Immunobiology, ed. by М. E. Dorf, p. 59—114, Garland STPM Press, New York, 1981.
95. Braun W. E. HLA and Disease: A Comprehensive Review, p. 43, CRC Press, Boca Raton, 1979.
96. Bodmer J. Ia serology. In: Histocompatibility Testing 1977, ed. by W. F. Bodmer et al., p. 35, Munksgaard, Copenhagen, 1978.
97. Robinson P. J., Graf L., Sege K. Two allelic forms of mouse |}2-microglobulin, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 78, 1167, (1981).
98. Melchers /., Rajewsky K., Shreffler D. C. It-DLHb: Map position and functional analysis, Eur. J. Immunol., 3, 754 (1973).
99. Lozner E. C., Sachs D. H., Shearer G. M. Genetic control of the immune response to staphylococcal nuclease. I. Ir-Nase: Control of the antibody response to nuclease by the Ir region of the mouse H-2 complex, J. Exp. Med., 139, 1204 (1974).
100. Fachet J., Ando I. Genetic control of contact sensitivity to oxazolone in inbred, H-2 con-genic and intra-H-2 recombinant strains of mice, Eur. J. Immunol., 7, 223 (1977).
101. Hurme М., Chandler P. R., Heterington С. М., Simpson E. Cytotoxic T-cell responses to H-Y: Correlation with the rejection of syngeneic male skin grafts, J. Exp. Med., 147, 768 (1978).
Глава 14
Антигены главного комплекса гистосовместимости
Томас Дж. Киндт, Мэри Энн Робинсон
(Thomas Т. Kindt, Mary Ann Robinson)
Появление данных о том, что генам главного комплекса гистосовместимости (генам МНС) принадлежит центральная роль в обеспечении иммунной функции, привело к интенсивному изучению этих генов и их продуктов [1—10]. Одним из важнейших аспектов этих исследований было определение тонкой структуры продуктов генов МНС. Выяснение структуры продуктов МНС поможет пролить свет на их функции и продвинуть вперед наши представления о молекулярных основах иммунологических процессов, определяемых данными продуктами. Дальнейшая цель этих исследований состоит в получении достаточной информации о первичной структуре продуктов МНС для осуществления прямого анализа генов МНС методами рекомбинантной ДНК.
Детальное изучение продуктов генов МНС человека и мыши удалось провести лишь в последние годы. Первоначальные сведения о том, что гены МНС кодируют гликопротеины, пополнились данными о полной аминокислотной последовательности ряда антигенов класса I. Методы с использбванием рекомбинантных ДНК позволили более непосредственно изучать гены, кодирующие эти антигены, что дало возможность расшифровать последовательность геномной ДНК некоторых антигенов класса I человека и мыши. Хотя анализ структуры других антигенов МНС до сих пор несколько отстает от результатов изучения антигенов класса I, в отношении этих продуктов также получено много сведений благодаря применению методов сравнительного структурного анализа, таких, как получение пептидных карт и двумерный (2-М)-гельэлектро-форез. Первые сообщения о структурном анализе белков и ДНК антигенов класса II позволяют надеяться на быстрое развитие этой области исследований.
В настоящей главе основное внимание будет уделено исследованиям антигенов МНС классов I и II, кодируемых в лоскусах Н-2 мыши и IILA человека. Мы рассмотрим также основные методы, используемые при изучении структуры этих мембранных антигенов. Кроме того, будут представлены первые результаты анализа организации и структуры генов МНС методами рекомбинантной ДНК.
Й.1. Продукты главного комплекса гистосовместимости
14.1.1. Реагенты и методы, используемые при выделении и обнаружении антигенов МНС
Серологические методы изучения антигенов МНС известны уже давно. Кроме того, используя антисыворотки против различных специфических белков МНС, можно усиливать или подавлять определенные функции иммунитета,
что дает возможность изучать функциональную роль различных специфичностей. Поскольку все эти методы дают возможность проводить анализ на микроаналитическом уровне, они не требуют выделения молекул антигена. Однако при попытках структурного анализа антигенов МНС возникают новые трудности, связанные с двумя особенностями этих антигенов.
Первая из них — это сравнительно низкое количество доступного для работы материала. Так, концентрация антигенов равна примерно 5* 105 молекул на лимфоидную клетку (содержание антигенов на других клетках значительно ниже). Если принять, что выход выделяемого продукта составляет 20%, то для получения 5 мг молекул с мол. массой 50 000 потребуется 1012 клеток. Это соответствует примерно 1 кг клеток; для выращивания такого количества клеток потребовалось бы 500—1000 л культуральной жидкости. Между тем селезенка мыши содержит в среднем около 108 лимфоидных клеток.
Вторая трудность на пути изучения антигенов МНС состоит в следующем: эти антигены связаны с мембраной, и, следовательно, в них имеются гидрофобные участки. Из-за наличия в продуктах генов МНС гидрофобных участков с этими молекулами нельзя работать в буферных системах, обычно применяемых при выделении белков, поскольку в таких условиях молекулы агрегируют и становятся нерастворимыми.
