Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
16.3.2.5. Первичная иммунизация Т-клеток неотвечающей (NR) линии антигеном
в присутствии АПК отвечающей (R) линии
В отличие от использования химер, вероятно, более простой подход к исследованию способности Т-клеток ЛГЙ-гаплотипа отвечать на антиген в ассоциации с рестриктирующими элементами .ff-гаплотипа заключается в попытках активировать in vitro Т-клетки NR-животного в присутствии АПК Л-гап-лотипа [491. Исходя из данных, полученных при исследовании химер с трансплантированным тимусом, трудно было представить, что подобные эксперименты окажутся удачными, поскольку популяция Т-клеток животных NR дифференцировалась в NR-тимусе и, следовательно, не должна содержать клеток с сочетанной специфичностью к гистотопам рестриктирующих элементов Д-гапло-типа. Тем не менее такие эксперименты были выполнены и дали интересные результаты. Эти опыты связаны с удалением аллореактивных Т-клеток, присутствие которых затрудняет интерпретацию результатов. Это определяется тем, что Т-клетки линии NR и АПК линии R обязательно несут разные гаплотипы генов области I. Таким образом, АПК Д-гаплотипа способны вызвать ответ (в реакции смешанной культуры) аллореактивных клеток из популяции Т-лимфоцитов животных NR. Один способ удаления аллореактивных Т-клеток заключается в стимуляции Т-лимфоцитов животных NR облученными АПК Л-гапло-типа в отсутствие экзоантигена. Это индуцирует синтез ДНК в аллореактивных клетках. Подобные клетки можно инактивировать при добавлении бромдезо-ксиуридина (БУдР) в культуральную среду с последующим освещением культур. В этих условиях БУдР встраивается в ДНК вместо тимидина. Если клетки
выдерживают на свету, БУдР перекрестно сшивает ДНК, что предотвращает дальнейшее деление клетки. Тогда с Т-лимфоцитами линии NR, оставшимися после удаления аллореактивных клеток, можно провести исследование иммунореактивности на антиген в присутствии АПК Д-гаплотипа. В некоторых случаях наблюдался иммунный ответ в такой системе [49], что подтверждает данные, полученные при изучении отвечаемости Т-клеток химер NR—(R X NR). Таким образом, при определенных условиях Т-клетки животных NR могут сочетанно распознавать антиген и рестриктирующие элементы R-гаплотипа.
16.3.2.6. Роль среди дифференцировки в детерминировании 1т-фенотипа
Схема внутритимусной селекции Т-клеток с данной двойной специфичностью распознавания и одновременное формирование репертуара Т-клеточного распознавания представляют собой изящное описание процесса, в котором определяются Ir-фенотип и MHC-рестрикция. Однако, как упоминалось в предыдущем разделе, были получены данные о существовании в нормальной популяции периферических Т-лимфоцитов ЖД-гаплотипа клеток, способных отвечать на антиген в ассоциации с молекулами класса II R-гаплотипа [49]. На первый взгляд казалось, что эти результаты не совместимы с концепцией селекции в тимусе Т-лимфоцитов, сочетанно распознающих собственные молекулы МНС. Однако представляется возможным, что рецепторы Т-клеток с установленной специфичностью к данному эпитопу антигена и гистотопу чужеродной молекулы МНС класса II связываются также с другим эпитопом в сочетании с гисто-топом собственной молекулы класса II. Если это верно, а примеры подобной перекрестной реактивности описаны [50], то, вероятно, данные о Т-клетках с сочетанной специфичностью к чужеродным молекулам МНС не противоречат теории тимусной селекции. Достаточно просто постулировать, что Т-клетки, способные распознавать чужеродный гистотоп, селектируются в тимусе, поскольку они могут распознавать также и гистотоп собственных молекул МНС класса II.
16.3.3. Теории /r-генного контроля
Представляется вполне обоснованным утверждение, что животные, у которых отсутствует «отвечающий» аллель данного гена /г, не дают ответа, контролируемого этим геном /г, поскольку не активируются Т-клетки, специфичные к эпитопам соответствующего антигена и любому гистотопу собственных молекул МНС. Неясно здесь следующее: почему определенное сочетание антигена и молекул МНС класса II не вызывает ответа.
Для объяснения такой ареактивности предложен ряд теорий. Эти теории можно разделить на две большие группы. В теориях первой группы принимается, что отсутствие ответа на данную «пару» (антиген + молекула МНС класса II) связана с дефектом образования этой «пары». Отсюда следует, что отсутствие иммунореактивности определяется на уровне постулируемого взаимодействия антигена (или процессированного антигена) и молекул МНС класса II. «Пара» не образуется или нестабильна в связи со структурной несовместимостью. Как будет показано ниже, данная гипотеза подразумевает определенный вид распознавания антигена молекулами МНС класса II.
Согласно другой точке зрения, «пары» образуются нормально или вообще не требуется физического образования «пар». Эта гипотеза утверждает, что, скорее всего, среди потенциально активируемых клеток нет Т-лимфоцитов, спо-
собных распознавать антиген и данные молекулы МНС класса II. Дефицит таких Т-клеток может быть следствием: а) отсутствия генов, определяющих Т-кле-точные рецепторы данной специфичности, б) дефекта их положительной селекции в тимусе, в) их удаления при индукции толерантности или г) их супрессии в ходе развития иммунного ответа.
