Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
Сходные эксперименты также свидетельствуют о функционировании генов /г в В-лимфоцитах [41]. По этому вопросу существовали значительные разногласия, так как в то время отсутствовали данные о существовании по меньшей мере двух принципиально разных форм взаимодействия Т- и В-лимфоцитов при антительном ответе. Теперь уже очевидно, что в некоторых случаях анти-тельного ответа, опосредованного, в частности, субпопуляцией В-лимфоцитов, несущих дифференцировочный антиген Lyb5 (В-лимфоциты Lyb5+), кооперативное взаимодействие В-лимфоцитов с Т-клетками заключается в утилизации растворимых неспецифических Т-клеточных факторов [42]. При таких взаимодействиях Т-клетки могут не распознавать антиген и молекулы МНС класса
II на поверхности В-лимфоцитов. Тогда Т-клетки животных (R X NR) будут взаимодействовать с В-лимфоцитами мышей линий R и NR при факторзави-симом антительном ответе, который контролируется генами 1г. Однако для активации Т-клеток, продуцирующих факторы, необходимо МНС-рестриктиро-ванное взаимодействие этих Т-лимфоцитов с АПК. В этой системе функционируют АПК только отвечающего (R) гаплотипа.
С другой стороны, антительный ответ В-лимфоцитов Lyb5~ на тимусзави-симые антигены зависит от МНС-рестриктированных взаимодействий Т- и В-клеток. При таких взаимодействиях Т-клетки иммунных животных Fx (R X NR) стимулируют образование антител В-лимфоцитами линии R; В-клетки линии NR не образуют антител даже в присутствии АПК животных линии R. Таким образом, для этого типа клеточных взаимодействий существуют, по-видимому, веские доказательства экспрессии функции генов /г на уровне В-лимфоцитов.
16.3.2. Является ли иммунореактивность, контролируемая генами /г, врожденной или приобретенной?
Эксперименты, описанные в предыдущем разделе, основаны на изучении взаимодействия активированных Т-клеток мышей Fx (R X NR) с АПК или В-лимфоцитами родительских линий R и NR. Поскольку установлено, что Т-лимфоциты взаимодействуют с клетками только отвечающей линии, был сделан вывод об экспрессии генов /г именно в этих клетках. Сходные эксперименты по изучению экспрессии генов /г в Т-клетках выполнить не просто, так как в большинстве описанных к настощему времени систем анализа используются
иммунные Т-клетки. Чтобы определить, отсутствует ли у Т-клеток в принципе способность отвечать на данный антиген или, что по нашему мнению более вероятно, Т-клетки не могут отвечать на сочетание антигена и молекул МНС класса II неотвечающего гаплотипа (т. е. на антиген, презентированный на АПК неотвечающей линии), следует изучить способность Т-клеток линий R и NR давать первичный ответ на антиген в присутствии АПК как линий R, так и линий NR.
16.3.2.1. Использование радиационных костномозговых химер
Наиболее четкое доказательство потенциальной иммунореактивности Т-клеток животных линий NR было получено при исследованиях радиационных костномозговых химер. Такие мыши широко использовались для выяснения вопроса, является ли признак МНС-рестрикции Т-клеток врожденным или приобретенным. Детальный анализ этого подхода можно найти в гл. 15. В этих экспериментах клетки костного мозга линии X, из которых тщательно удаляли зрелые Т-клетки, переносили летально облученным реципиентам Fx (X X Y), причем линии X и Y различались по МНС. Такие химеры обозначаются X ->F, (X X Y). Костномозговые клетки, содержащие клетки-предшественники гемопоэза, в облученном реципиенте дают начало лимфоидным клеткам, включая Т-клетки и макрофаги. Т-клетки линии X при созревании в животном Fj (X X Y) индуцируют толерантность под влиянием среды дифференцировки гибридов Fx. Если таких животных иммунизировать данным антигеном, то индуцированные иммунные Т-клетки будут «ограниченно» распознавать антиген в сочетании с рестриктирующими элементами линии X. Это и неудивительно, поскольку все АПК химер X ->¦ Ft (X X Y) характеризуются гаплотипом МНС линии X. В таком случае происходит активация только Т-лимфоцитов, специфичных к антигену в ассоциации с рестриктирующими элементами гаплотипа X.
Однако можно перенести Т-клетки неиммунных химер X Fx (X X Y) вместе с источником АПК Fx (X X Y) свежеоблученным реципиентам Fx (X X Y). Химерные Т-клетки толерантны к антигенам животного Fx (X X Y) хотя и несут генотип линии X. При иммунизации в присутствии АПК, экспрессирующих рестриктирующие элементы как гаплотипа линии X, так и гаплотипа линии Y, часть таких активированных Т-клеток с гаплотипом линии X распознает антиген в ассоциации с рестриктирующими элементами линии X, а другая — с рестриктирующими элементами линии Y [43]. Данный результат свидетельствует о том, что способность Т-клеток к сочетанному распознаванию рестриктирующих элементов не ограничивается лишь теми рестриктирующими элементами (структурами), которые определяются их собственным геномом.
16.3.2.2. Химеры NR Fj (R X NR)
Подобный экспериментальный подход может быть использован для изучения способности Т-клеток NR-животных отвечать на антиген, презентированный на АПК отвечающего Я-гаплотипа. Типичный эксперимент из этой серии заключается в переносе клеток костного мозга донора линии NR летально облученным реципиентам Fx (R X NR) [44, 45]. Иммунизация антигеном, на который не отвечают животные донорской линии, как и предполагалось, не вызывает иммунного ответа у таких химер, NR -> Fx (R X NR), так как АПК этих животных полностью представлены клетками NR-типа, созревающими из стволовых клеток трансплантированного костного мозга. Однако
