Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
Отношение эффенторов к мишеням
Рис. 15.17. Цитотоксические Т-лимфоциты, способные распознавать и аллоантиген, и минорный антиген гистосовместимости в ассоциации с собственными молекулами МНС класса I.
Клетки селезенки мышей Fj (A.Y X А.Х) были иммунизированы in vivo и повторно стимулированы in vitro клетками селезенки линии B.Y. Цитотоксическую активность
против мишеней B.Y (кружки), аллогенных мишеней A.Z (квадраты) или сингенных мишеней Fx (A.Y X А.Х) (треугольники) определяли при различных соотношениях эффекторных Т-клеток и мишеней сразу после первой стимуляции in vitro (Л) или после двух последующих стимуляций in vitro облученными клетками селезенки A.Z (Б). (По [72].)
тех или других меченых 51Сг мишеней можно ингибировать холодными мишенями как линии A.Z, так и линии B.Y. Из этого Бивен сделал вывод, что алло-реактивные клетки, которые обнаруживаются в популяции цитотоксических клеток, специфичных к минорным антигенам гистосовместимости, не активированы неспецифически, а представляют собой клетки с двойной специфичностью к аллогенным молекулам МНС и минорным антигенам гистосовместимости в ассоциации с собственными молекулами МНС. Сходные выводы были впоследствии сделаны при исследовании цитотоксических клеток, специфичных к вирусу Сендай.
15.9.3.2. Опыты с Т-клеточными клонами
В последнее время существование Т-клеток с двойной специфичностью к аллоантигену и другим чужеродным антигенам в ассоциации с собственными молекулами МНС было четко продемонстрировано с помощью техники клонирования Т-лимфоцитов (см. гл. 30). Используя метод получения продолженной Т-клеточной линии с последующим клонированием предельными разведениями, фон Бёмер и др. [73] выделили цитотоксический Т-клеточный клон мышей C57BL/6, специфичный к антигену самцов H-Y, в ассоциации с собственной мо-
лекулой МНС, D6. Как видно из рис. 15.18, этот клон лизирует клетки самцов, но не самок линии C57BL/6 (KbDb). Он также лизирует клетки самцов, но не самок линий ВЮ.А (2R) (KhDb) и ВЮ.А (4R) (KhDb). Однако при определении активности на мишенях линии ВЮ.А (5R) (KhDd) клон давал сравнимый уровень лизиса клеток и самцов, и самок. Эта последняя специфичность, как было показано при дальнейшем генетическом картировании с использованием рекомбинантных линий мышей, направлена против продукта Dd и не зависит от присутствия антигена Н-Y. Субклонирование показало, что все потомство исходного клона сохраняет ту же двойную специфичность к аллоантигену Dd и антигену Н-Y в ассоциации с D6. Этот вывод подтвердило также иссле дование холодного торможения. Лизис меченных 51Сг клеток самцов C57BL/6-
50
30
О
tn
to
Ш Ю
Вб9 2R d 2R9
?
Рис. 15.18. Цитотоксический Т-клеточный клон со специфичностью к аллоантигену и минорному антигену гистосовместимости Н-Y в ассо-4R d AR? 5R d 5R 9 циации с молекулой МНС класса I.
§ 50 - 9 р р Мышей-самок C57BL/6 (В6) иммунизировали
клетками селезенки самцов В6 и с помощью jgL J 7 Г повторных стимуляций in vitro клетками самцов
а? { / I В 6 получили цитотоксическую Т-клеточную ли-
* 4 Г нию. Клоны получены из этой линии методом
Ю h ” 4 предельных разведений; их специфичность опре-
- * деляли в цитотоксическом тексте на клетках-
мишенях самцов и самок линий C57BL/6 (В6 : 0?1 3--1 0,3:1 3=1 0^-1 3:1 0Д.1 3-1 KbDb), B10.A(2R)(2F<:AT*Z)b), B10.A(4F<)(4R: А'^О6)
Отношение эффекторов к клеткаиншшеням или ВЮ.А (5R) (5R:KkDd). (По [73].)
несущих D6, блокировался одинаково хорошо сингенными клетками самцов C57BL/6 (H-Y + Db) и аллогенными клетками самок DBA/2 (Dd).
Хотя экспериментальные данные об этом Т-клеточном клоне были достаточно убедительными, авторы по двум причинам не решились утверждать, что это типичные Т-клетки. Во-первых, неудачными оказались попытки с помощью повторных стимуляций in vitro аллогенными клетками DBA/2 (Н-2й) (сходный эксперимент описан на рис. 15.17) селектировать аллореактивные, Б<г-специфи-ческие клетки Т-клеточных линий, иммунизированных in vivo и стимулированных in vitro клетками самцов C57BL/6. В связи с этим можно предположить, что такой клон является аномальным соматическим вариантом, возникшим в культуре. Во-вторых, можно регистрировать только специфичность литиче-ского действия цитотоксического клона, но не специфичность индукции ответа, поскольку выживание цитотоксических клонов полностью зависит от фактора роста Т-клеток; отсутствие этого фактора приводит к гибели клеток в течение 24—48 ч. Это оставляет открытой возможность, что перекрестная реактивность связана с вырожденностью рецептора клона, которая выявляется только при связывании с клеткой-мишенью. Такое связывание достаточно для лизиса мишени, тогда как истинная аллогенная перекрестная реактивность заключается в вырожденности специфичности рецептора на этапе клеточной активации.
