Иммунология. Том 2 - Дэвид Г.
ISBN 5-03-000497-1
Скачать (прямая ссылка):
различных химер, иммунных к ДНФ-белкам Ascaris suum. Затем клетки в облученных реципиентах Fj стимулировали ДНФ-КЬН.
7 дней спустя определяли IgG БОК. Все три популяции Т-клеток с одинаковой эффективностью взаимодействовали с контрольными В-лимфоцитами химер Fj (к. м.) —Fj (обл.). Однако с В-лимфоцитами химер Fj^ (к. м.) -> Рх (обл.) кооперировали Т-клетки мышей Fx и Рх, но не Р2, тогда как с В-лимфоцитами химер Fx (к. м.) -> Р2 (обл.) кооперировали Т-клетки мышей Fx и Р2, но не Рх. Во всех случаях отвечающие В-лимфоциты имели Р1-фенотип, так как они происходили из костного мозга химерных животных. Отсюда Кац и др. заключили, что В-лимфоциты прошли адаптивную дифференцировку при созревании в химерном микроокружении Fx (к. м.) -> Рг (обл.) или Р2 (обл.), так что они преимущественно взаимодействовали с хелперными Т-клетками родительских линий мышей того же МНС-гаплотипа, что и у облученного химерного живот-ного-реципиента.
Последующие эксперименты Спрента и Брюса [62], однако, не подтвердили эти наблюдения. Как видно из табл. 15.34, Т-клетки химер Fx (к. м.) —
Таблица 15.34. Отсутствие адаптивной дифференцировки В-клеток *¦) (по [62])
Донор Т-лимфоцитов Донор В-лимфоцитов Анти-ЭБ БОК
IgM IgG
Fx (к. м.) -> Рх (обл.) Pi 11800 50 800
Р2 0 0
Fx (к. м.) Рг 10 400 94 400
Fi (к. м.) Р2 8800 134 000
Ft (к. м.) -> Р2 (обл.) Pi 500 900
Р2 9800 21 700
Ft (к. м.) Рг 6400 98 500
Fj. (к. м.) Р2 8200 90 600
1) Химерные Т-клетки примировали ЭБ в облученном реципиенте Fi, затем смешивали с примированными В-лимфоцитами нормальных или химерных животных и повторно иммунизировали ЭБ в облученном реципиенте Fi. Ответ прямых и непрямых БОК селезенки определяли через 7 дней.
Рх (обл.), примированные БЭ в нормальном реципиенте Flt эффективно взаимодействовали с примированными БЭ В-лимфоцитами химер Fx (к. м.) —
—>• Р! (обл.) и Fj (к. м.) ->- Р2 (обл.). Таким образом, способность В-лимфоцитов к кооперативным взаимодействиям, по-видимому, не ограничивается фенотипом микроокружения химер, в котором происходит созревание клеток. В отличие от этого, как было описано ранее, кооперативная способность Т-лимфоцитов ограничена: Т-клетки химер Fx (к. м.) -> Рг (обл.) взаимодействуют только с В-лимфоцитами Р1? но не Р2, а Т-клетки химер Fx (к. м.) —*¦ Р2 (обл.) — с В-лимфоцитами Р2, но не Pj. Сходные результаты были получены с двумя различными типами нормальных Т-клеток при анализе кооперации с В-лимфоцитами химер Fx (к. м.) —Рг (обл.) или Р2 (обл.).
Наиболее убедительный эксперимент, свидетельствующий в пользу адаптивной дифференцировки В-лимфоцитов, провели Сингер и Хоуде [63]. При изучении ответа на ТНФ-фиколл в условиях, в которых Т-клетки не нужны для акти-
вации В-лимфоцитов, они обнаружили, что В-лимфоциты аллогенных химер Pi (к. м.) Р2 (к. м.) отвечают только на антиген, презентированный на облученных макрофагах Р2 (МНС гаплотипа облученного реципиента). Дефект ответа В-лимфоцитов химер на ТНФ-фиколл в ассоциации с молекулами МНС донора (Рх) не компенсируется добавлением нормальных гибридов Т-клеток Flt что свидетельствует о рестрикции на уровне В-лимфоцитов. Принципиальный опыт, демонстрирующий измененное В-клеточное распознавание у химер, приведен в табл. 15.35. Нормальные В-лимфоциты смешивали в культуре с химерными В-лимфоцитами и стимулировали ТНФ-фиколлом. Можно было различать два типа В-клеток, поскольку использовали нормальные В-лимфоциты гибридов Fi, полученных в результате скрещивания родительской линии Рх с рекомбинантной линией Рх, отличающейся только по областям D и Т1а. Следовательно, нормальные В-лимфоциты можно было удалить обработкой антителами против H-2D и комплементом. Данные, приведенные в табл. 15.35, свидетельствуют
Таблица 15.35. Нормальные В-лимфоциты и В-лимфоциты химер Pi (к. м.) Р2(обл.) по-разному отвечают на ТНФ-фиколл в одной культуре х) (по [63])
Анти-ТНФ БОК
Отвечающие клетки селезенки только Антитела против
комплемент D^'-r комплемент
1. Нормальные В10.А 726 750
2. Нормальные Fx (BIO .А X 2R) 618 18
3. F1(B10.Ax2R) + B10.A 702 351
4. Fi(B10.Ax2R) + B10.A(K. м.) -* В10 (обл.) 438 18
1) Клетки селезенки нормальных мышей В10.А и Fi (В10.АХВ10.A (2R)) отвечают на ТНФ-фиколл. Эти отвечающие клетки можно разделить с помощью обработки антителами против H-2D^ и комплементом, что приводит к удалению клеток Fj (вторая строка), но не В10.А (1-я строка) животных. При смешивании нормальных клеток В10.А и Fx (B10.AX2R) мышей в соотношении 1 : 1 оба типа В-лимфоцитов в равной степени участвуют в ответе на ТНФ-фиколл (3-строка). Однако, если В-лимфоциты нормальных мышей Fi(B10.Ax2R) смешивали с В-лимфоцитами химерных мышей В10.А(к. м.) -* В10(обл.), то отвечали только клетки гибридов Fi (4-я строка).
