Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Чард Т. -> "Радиоиммунологические методы" -> 79

Радиоиммунологические методы - Чард Т.

Чард Т. Радиоиммунологические методы — М.: Мир, 1981. — 248 c.
Скачать (прямая ссылка): radioimunnologicheskiemetodi1981.djvu
Предыдущая << 1 .. 73 74 75 76 77 78 < 79 > 80 81 82 83 84 85 .. 100 >> Следующая

10.3. Способы проверки точности методов овязывання
Выше было дано определение точности как меры различий между результатами параллельных .анализов одного и того же образца, откуда вполне ясно, в чем, собственно, состоит процедура проверки. В этом разделе будут рассмотрены некоторые практические аспекты проверки точности, а также ряд вопросов, связанных с оценкой качества проводимых анализов.
10.3.1. Приготовление материалов для контроля качества аналива с целью проверки точнооти
Образец или образпы, используемые для проверки точности, должны отвечать следующим требованиям.
1) Они должны представлять собой объединенные образцы— пулы (pools), содержащие эндогенный лиганд именно в той биологической жидкости, для анализа которой предназначен даииый метод (например, в сыворотке крови). Образцы, приготовленные путем добавления очищенного лиганда к свободной от лиганда жидкости или к разбавителю, не могут, строго говоря, служить для контроля качества, а являются скорее стандартами.
2) Объединенные образцы (пулы) должны быть в наличии в большом количестве и разделены на аликвоты с таким расчетом, чтобы одного такого образца хватило на многие месяцы и даже годы работы.
3) Объединенные образцы (пулы) должны храниться в условиях, при которых они хорошо сохраняют свою устойчивость, и при самой низкой температуре, которая может быть достигнута в лаборатории (например, при —70°С). По причинам, отмеченным в разд. 10.2.1.4, следует избегать лиофи-лизации объединенных образцов. Кроме того, при длительном хранении лиофилизованных образцов вне холодильника они могут поглощать влагу, если, конечно, не содержать их в строго герметичных условиях. Во многих случаях доказать стабильность препарата практически невозможно: для того, чтобы проверить, сохраняет ли вещество стабильность при хранении в данных условиях в течение нескольких лет, потребовались бы многолетние' эксперименты и заведомо стабильные системы для сравнения. Для решения последней задачи там, где это возможно, используют «биологические пулы» (см. ниже).
4) В оптимальном варианте пулы должны быть подобраны таким образом, чтобы их концентрация соответствовала высоким, средним и низким величинам, встречающимся при анализе. Это дает возможность проверить точность калибровочной кривой в различных ее участках (см. рис. 10.4).
5) Образцы для создания контрольных пулов следует получать от больных по возможности в строго фиксированных условиях: так, например, пул для определения зстриола в плазме может представлять собой плазму, полученную от здоровых женщин на 36—40-й неделе беременности. Большое достоинство этого биологического пула заключается в том, что он всегда в случае необходимости может быть воспроизведен. При длительном хранении in vitro препараты легко могут подвергаться изменениям, тогда как физиологические состояния более воспроизводимы. Известно, однако, немало случаев, когда биологические пулы оказываются трудно доступными, напрнмер при определении содержания лекарственных препаратов в крови. В таких случаях пулы для контроля качества анализа могут быть приготовлены из анализируемых образцов. Если интервал анализируемых концентраций лиганда лежит в пределах 20—80 (в условных единицах), то из остатков анализируемых растворов, концентрация в которых составляла 20—40, 40—60 и 60—80 условных единиц, можно получить три пула. Трудность работы с такими пулами заключается, однако, в том, что при поцле-дующих анализах средние величины могут быть другими.
6) Все рассмотренные выше положения в равной степени относятся к препаратам контрольных пулов, предназначенных для нескольких лабораторий, а также для анализов, проводимых в рамках национальных, международных и коммерческих программ. В связи с проблемами снабжения та-
кой материал обычно не может быть использован при каждом анализе, однако его можно брать для калибровки пулов, приготовленных на местах. Положение, согласно которому разные лаборатории должны получать идентичные или почти идентичные результаты, имеет исключительно важное значение. Поскольку клиническая интерпретация результатов в большой степени зависит от прешествующего опыта работы данным методом анализа, чрезвычайно важно, чтобы небольшая лаборатория могла эффективно использовать опыт возможно большего числа других лабораторий.
10.3.2. Определение точности о помощью препаратов, преднавначенных для контроля качеотва
При наличии соответствующих пулов путем анализа аликвот определяют коэффициент, характеризующий разброс результатов как внутри одной серии анализов, так и между разными сериями. Для определения первого из этих коэффициентов проводят за один раз серию параллельных определений, обрабатывая аликвоты пула так же, как аликвоты образцов. Так, если образцы анализируют как две параллельные пробы, то из пула также следует готовить двойной ряд проб, причем число пробирок должно составлять не менее двадцати (т. е. оно должно соответствовать десяти анализируемым образцам), и эти пары пробирок должны быть распределены произвольно между анализируемыми образцами таким образом, чтобы исключить при измерениях фактор предвзятости. На основании всех величин, полученных для пула, рассчитывают среднюю величину и стандартное отклонение и выражают результат в виде коэффициента разброса (стандартное отклонение, выраженное в процентах от средней величины). Для большинства способов анализа эта величина составляет 3—8%. В качестве контрольного параметра коэффициент, характеризующий разброс результатов анализа внутри одной серии образцов, не имеет особой ценности: практически не так уж часто все образцы анализируются за один раз.
Предыдущая << 1 .. 73 74 75 76 77 78 < 79 > 80 81 82 83 84 85 .. 100 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed