Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Чард Т. -> "Радиоиммунологические методы" -> 68

Радиоиммунологические методы - Чард Т.

Чард Т. Радиоиммунологические методы — М.: Мир, 1981. — 248 c.
Скачать (прямая ссылка): radioimunnologicheskiemetodi1981.djvu
Предыдущая << 1 .. 62 63 64 65 66 67 < 68 > 69 70 71 72 73 74 .. 100 >> Следующая

5) Сродство связывающего агента. Если в методе анализа со сниженной чувствительностью используют связывающий агент в относительном избытке, то, очевидно, не обязательно, чтобы он обладал исключительно высоким сродством. Это обстоятельство в большой степени расширяет круг различных связывающих агентов, которые могут быть использованы: те антисыворотки, которые обычно не применяются в связи с тем, что они не обеспечивают определенного уровня чувствительности, вполне могут быть использованы в мётоде анализа, настроенном на более низкую чувствительность. Обратная сторона этого преимущества состоит в том, что в связи с ис' пользованием метода анализа со сниженной чувствительностью в условиях высоких концентраций связывающего агента последний будет требоваться в значительных количествах. 1 мл исходной антисыворотки при разбавлении в 100000 раз хватает для анализа 40000 образцов, а при разведении в 1000 раз — для анализа всего лишь 400 образцов.
6) Удобство в работе. С технической точки зрения -большинство описанных выше особенностей, а именно короткий период инкубации, небольшое время счета радиоактивности и оптимальная форма калибровочной кривой, облегчают проведение анализа. Вряд ли следует часто повторять, что в конечном счете клиническая ценность метода непосредственно и полностью зависит от легкости, быстроты и надежности проведения анализа.
8.4. Практическая целенаправленность метода анализа; важное значение интервалов между раотворами отандартов
В связи с тем что метод анализа должен быть приспособлен к запросам клиники, а не наоборот, имеет смысл кратко рассмотреть вопрос о принципе выбора интервалов для калибровочной кривой. Цель такого выбора состоит с практической точки зрения в том, чтобы участок калибровочной кривой, характеризующийся максимальной точностью (обычно , это средняя часть кривой), приходился на такой интервал концентраций, который представляет практический интерес: такой интервал может включать либо все нормальные величины (если с точки зрения диагностики имеют значения как высокие, так и низкие величины), либо только те величины, которые лежат на одной из крайних границ нормы (если с точки зрения диагностики важны только высокие илн только низкие величины, а не те и другие одновременно). Принцип выбора интервалов иллюстрируется данными, приведенными иа рис. 8.7 и 8.8.
8.5, Оптимизация метода количеотвениого определения с помощью тееретичеокого анализа
Если система связывающий агент — лиганд может быть полностью охарактеризована, т. в. для йее известны абсолютные концентрации реагентов, коистанты связывания лиганда связывающим агентом и ошибки, допускаемые при определении соотношения между свободным и связанным лигандом, то на осиоваиии всех этих факторов может быть построена теоретическая модель, математический анализ которой позволяет подобрать оптимальные концентрации реагентов и другие условия проведения анализа. В основе простейшей из существующих моделей лежит алгебраическое выражение
JOO г- Интервал, представляющий риэиоло -г iuvec/fi/й и ffni/Huvsc/ruu интерес
0,032 0,123 0,5 Z
Концентрация стандарта
Рис. 8.7. Приспособление методики анализа к практическим нуждам путем подбора концентрации связывающего агента. В изображенной системе концентрация связывающего агента 0,1 обеспечивает высокую чувствительность анализа, одиако при этом калибровочная кривая включает только часть интервала, представляющего интерес с точки зреиия физиологии и клиники. При повышении концентрации связывающего агента до 1,0 чувствительность анализа снижается, одиако калибровочная кривая включает прн этом необходимый интервал величии и к тому же является значительно
более крутой.
Концентрация гормона
Рис. 8.8. Приспособление методики анализа к практическим нуждам. Если анализ проводится с целью исследования нормальной популяции, то средняя точка калибровочной кривой должна быть выбрана таким образом, чтобы соответствовать среднему значению нормальных величин (правая кривая). Если же в задачу исследования входит раздельное изучение нормальной и патологической популяций, то средняя точка калибровочной кривой должна соответствовать величине» лежащей иа их границе (левая
кривая).
закона действующих масс, приведенное в разд. 1.9, и уравнение (1.6). Однако эта простая модель не учитывает такие исключительно важные факторы, как различие между меченым и немеченым лигандом, гетерогенность связывающего агента и ошибки определения. Описаны значительно болееv сложные модели, в которых эти факторы учитываются, но все они требуют применения компьютеров и определенной математической подготовки, которой редко обладает большинство специалистов, работающих в области биологии и медицины. Этим вопросам посвящены превосходные обзоры (например, Ekins, 1974); желающие овладеть этими методами могут получить полную консультацию у признанных авторитетов. Однако следует помнить, что за редким исключением вполне удовлетворительные результаты могут быть получены методом проб и ошибок.
Предыдущая << 1 .. 62 63 64 65 66 67 < 68 > 69 70 71 72 73 74 .. 100 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed