Радиоиммунологические методы - Чард Т.
Скачать (прямая ссылка):
Вид используемого счетно-решающего устройства и способ введения данных в какой-то степени зависят от доступности и практической необходимости. Лаборатория, в которой анализируется лишь несколько десятков образцов в неделю, вполне может обойтись простым построением графиков с последующей их интерполяцией без использования вычислительных устройств. Однако, если число образцов превышает определенный предел, который соответствует, вероятно, одновременному анализу приблизительно 100 образцов, проведение расчетов при помощи счетно-решающего устройства становится более эффективным (поскольку при этом исключаются некоторые ошибки) и более выгодным (поскольку дает значительную экономию рабочего времени операторов).
Использованиё калькулятора или цифрового компьютера определяется в основном их доступностью. Преимущество большого компьютера состоит в том, что при правильно составленной программе он позволяет проводить детальный анализ полученных данных и выдает результаты в четкой цифропечатной форме. Однако доступ к большому компьютеру почти всегда затруднен и ограничен определенным количеством часов, что может задерживать получение результатов. Большие калькуляторы имеют более ограниченные возможности; с их помощью удается получать, в частности, меньший объем выходных данных, однако они значительно дешевле больших компьютеров, в связи с чем они доступнее для использования непосредственно в аналитической лаборатории. Последние достижения в развитии настольных калькуляторов и их периферических устройств выдвинули их почти в один ряд с цифровыми компьютерами, что связано главным образом с отсутствием необходимости в большом запасе памяти при применении счетно-решающих устройств в аналитической лаборатории.
Способ введения данных зависит также от имеющихся возможностей. При работе с калькулятором результаты счета можно вводить вручную, однако при этом легко допустить ошибку, в связи с чем лучше пользоваться перфолентой.
Цифровой компьютер почти всегда считывает с бумажной ленты. В принципе калькулятор и компьютер можно депвсред-ственно связать со счетчиком радиоактивности, однако это крайне неэкономично, поскольку в связи с медленным поступлением данных (обусловленным продолжительностью счета) процессор будет работать со скоростью, составляющей всего 1% от потенциально возможной. Снабженные такими приспособлениями счетчики стоят обычно очень дорого, и вряд ли их следует рекомендовать. Исключением из этого правила являются те случаи, когда один встроенный процессор обслуживает несколько счетчиков или один счетчик с большим числом детекторов; последние приобретают в настоящее время все большее распространение.
Новым достижением следует считать применение процессоров, специально предназначенных для анализа данных, получаемых методами связывания (Bell, Howell Ltd.). Создание этих процессоров представляет собой одно из проявлений революции в вычислительной технике. Они могут быть небольшими по размеру и дешевыми, обладая при этом возможностями самых крупных цифровых компьютеров (они позволяют, в частности, аппроксимировать экспериментальные данные в виде полиномов, отбрасывая при этом ошибочные точки). В недалеком будущем такие процессоры безусловно найдут широкое применение в большинстве лабораторий.
7.4. Определение доверительных пределов при интерпретации результате* анализа
При проведении каждого анализа допускается определенная ошибка, и, строго говоря, эта ошибка должна как-то отражаться на общем результате. Иными словами, получаемое значение иадо было бы давать не просто как 10, а скорее, как 9—11. Простейший способ расчета состоит в том, чтобы исправить полученную цифру с учетом допущенной ошибки. Так, напрнмер, если известно, что вариационный коэффициент составляет 5%, то доверительный интервал будет равен 95%, т. е. наблюдаемая величина известна в пределах ± 10%. Однако в методах связывания оценка доверительного интервала представляет определенную трудность в связи с тем, что точность анализа зависит от концентрации (см. разд. 10.2.1.5). Были предприняты остроумные попытки определять ошибки (Rodbard, 1971), используя относительную статистическую достоверность каждой нз наблюдаемых величин с учетом концентрационной зависимо-
сти. Однако такого рода расчеты требуют наличия сложных счетно-решающих устройств. Не менее важным является также то обстоятельство, что большинство методов связывания используется в клинических целях, и для среднего врача важно получать данные в виде одной цифры, а не в виде нескольких величин. Для большинства практических целей оценка ошибки не диктуется необходимостью, и она является лишь характеристикой качества используемого метода анализа (см. гл. 10).
Ч
ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА СВЯЗЫВАНИЯ; ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ
8.1. Определение понятия «чувствительность»
Под чувствительностью понимают то минимальное количество вещества, которое может быть обнаружено при помощи данного метода анализа при данных условиях. Практически же термин «чувствительность» часто неправильно употребляют для обозначения параметров, к которым чувствительность имеет лишь косвенное отношение, таких,, как, например, наклон калибровочной кривой. Приведенное выше представление о чувствительности требует детального его рассмотрения, поскольку при определении чувствительности часто ограничиваются поверхностным и слишком оптимистическим анализом результатов всего лишь одного эксперимента. Пожалуй, правильнее было бы определить чувствительность как ту минимальную концентрацию немеченого лиганда, при которой еще можно заметить различие в результатах анализа стандарта (т. е. образца с известным содержанием лиганда) и нулевого стандарта (т. е. образца, заведомо не содержащего немеченого лиганда), причем это различие должно базироваться на доверительных интервалах, найденных как для нулевого стандарта, так и для стандарта (это положение иллюстрирует рис. 8.1). Более того, доверительные интервалы должны быть в этом случае статистически достоверны, а не просто вычислены как среднее арифметическое для отдельных пар параллельных определений. Если, например, при двух параллельных определениях получены значения 100 и 105 (это может быть любой параметр, в котором выражается ответ на калибровочной кривой), то среднее арифметическое будет 102,5, а доверительный интервал составит 97,6—107,4. Если же будут проведены дополнительные параллельные определения, то доверительные интервалы резко сократятся. Так, при показателях 99,100, 105 и 106 среднее не изменится, однако набор значений больше, и доверительный интервал будет 99,1—105,9.
