Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Чард Т. -> "Радиоиммунологические методы" -> 4

Радиоиммунологические методы - Чард Т.

Чард Т. Радиоиммунологические методы — М.: Мир, 1981. — 248 c.
Скачать (прямая ссылка): radioimunnologicheskiemetodi1981.djvu
Предыдущая << 1 .. 2 3 < 4 > 5 6 7 8 9 10 .. 100 >> Следующая

1.3. Начальные этапы развития радиоиммунологии
Теперь довольно трудно проследить историю развития методов связывания из-за многочисленных претензий и споров приоритетного характера. Этого всегда можно ожидать в тех случаях, когда значение открытия далеко выходит за пределы ожиданий его авторов. Мы не будем детально рассматривать все обстоятельства и ограничимся простым и, на наш взгляд, достаточно аргументированным заключением: метод, в котором в качестве связывающего агента используется антитело (т. е. радиоиммунологический метод), впервые был описан Ялоу и Берсоном (Yalow, Berson, I960) в США, а метод, в котором используются природные связывающие белки плазмы (т. е. метод конкурентного связывания), впервые был описан Экиисом (Ekins, 1960) в Англии.
Для полноты исторической картины необходимо оглянуться назад, на тот период, когда не появились еще первые сообщения об отдельных методах. Развитие первых методов связывания, несомненно, началось в лабораториях медицинской радиологии. Само создание этих методов стало возможным благодаря получению радиоактивных изотопов, которые в качестве побочных продуктов атомного производства оказались доступными для широкого использования в биологии и медицине. Замечательная особенность многих радиоактивных изотопов состоит в очень высокой энергии их излучения, благодаря которой удается обнаруживать всего несколько атомов с помощью относительно простых приборов. Если атомы этих изотопов входят в состав каких-то молекул, то последние можно обнаружить в столь же малых количествах. Изначально к развитию радиоиммунологического метода привела, судя по всему, именно эта возможность измерения очень малых количеств меченых соединений, а не понимание потенциальных возможностей использования антител и других связывающих агентов, обладающих высоким сродством к лигандам; что же касается принципа метода, то здесь претензии на приоритет должны быть отнесены к значительно более ранним временам, поскольку в его основе лежнт, по существу, сочетание закона Архимеда и закона действующих масс.
Работа Ялоу и Берсона вытекала из их более ранних исследований по поведению белков, меченных 131I in vivo; в то время (начало 50-х годов) это был новый и очень эффективный подход к изучению белкового обмена. Одним из таких белков оказался меченный 1311 инсулин. Исследования, проведенные с использованием этого меченого белка, показали, что у больных диабетом, получающих инсулин, в крови почти всегда присутствует белок, связывающий инсулин (Berson et
al., 1958). С большим трудом Ялоу и Берсону удалось убедить научный мир в том, что этот связывающий белок является антителом (впоследствии этот факт был много тысяч раз подтвержден). Обнаружив явление связывания [ш1]-инсулина, они показали также, что путем добавления больших количеств немеченого инсулина можно вытеснить метку из комплекса со связывающим агентом, и установили, что степень связывания метки находится в количественной зависимости от общего количества присутствующего инсулина. Эти наблюдения послужили основой для создания первого радиоиммунологического метода определения инсулина, который был использован авторами для определения экзогенного бычьего инсулина после введения его кроликам (Yalow, Berson, 1971). Вскоре, однако, ' стало очевидным, что при использовании антител, выделенных из сыворотки больных диабетом, получавших инсулин, чувствительность метода недостаточно высока для того, чтобы с его помощью можно было измерять относительно низкие концентрации эндогенного инсулина, присутствующего в крови у людей. Одной из причин оказался тот факт, что антисыворотка была получена на бычий инсулин; человеческий инсулин, хотя и давал в этой системе перекрестную реакцию, однако обладал во много раз меньшей активностью. Следующий шаг состоял поэтому в получении специфической антисыворотки к человеческому инсулину. Этот шаг был осуществлен путем иммунизации морских свинок и привел к созданию первого радиоиммунологического метода, пригодного для определения эндогенного инсулина в крови у людей (Yalow, Berson, 1960).
В то время, когда проводилась эта работа, Экинс в Англии исследовал возможность использования глобулина, связывающего тироксин, для измерения тироксина в плазме людей. Вместе с методами определения витамина В12, в которых в качестве связывающего агента использовали внутренний фактор, эти исследования положили начало всему последующему развитию тех методов измерения, в которых применяются связывающие белки крови. Особенно хорошие результаты были получены в пионерской работе Беверли и Мёрфи, в которой эти^ методы были использованы применительно к стероидным гор» моиам.
Из большого числа дальнейших усовершенствований, благодаря которым эта область достигла современного уровня, особенно следует выделить метод иодирования пептидов с помощью хлорамина Т, предложенный Гринвудом и сотр. (Greenwood et al., 1963). Этот метод обладает огромными практическими премуществами по сравнению с ранее существовавшими методами, в которых приходилось иметь дело с большими количествами радиоактивных изотопов, что было
Предыдущая << 1 .. 2 3 < 4 > 5 6 7 8 9 10 .. 100 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed