Высшие съедобные базидиомицеты в чистой культуре - Бухало А.С.
ISBN 5-12-000267-6
Скачать (прямая ссылка):
Таким образом, культивирование неправильно идентифицированных как базидиомицеты штаммов дейтеромицетов привело к возникновению представления, согласно котором}' происходят кардинальные изменения в морфологии высших базидиомицетов и появление у них спороношений, типичных для родов дейтеромицетов, имеющих сумчатую анаморфу под влиянием глубинного культивирования. Обоснование такой ошибочной концепции привело к тому, что начатое за рубежом промышленное культивирование непригодных для пищевого использования штаммов дискредитировало саму идею получения белка из высших съедобных базидиомицетов.
Актуальны исследования морфогенеза высших съедобных базидиомицетов в глубинной культуре и характеристика встречающихся у определенных видов типов спороношений по сравнению с таковыми, наблюдающимися у них на агаризованных питательных средах.
В колбах на качалке культуры растут в виде мицелиальных агломератов более или менее правильной округлой формы или угловатых, которые у разных испытанных видов отличаются по форме и размерам (табл. XXVIII). В определенных условиях культивирования у каждого вида преобладают однотипные по размерам и форме шарики, чпго создает общую картину роста. Scleroderma citrinum растет в виде крупных пушистых шариков, аналогичный рост отмечен у Schizophyllum commune, Phellinus igniarius. В случае, когда посев проводится мицелием с агарового косяка, иногда наблюдается рост в виде одного большого комка мицелия.
У некоторых видов образуются гладкие угловатые или округлые, очень плотные комочки. Такой рост наблюдается у Coprinus ephemerus, С. micaceus, Agaricus silvaticus, Marasmius scorodonius, Phallus impudicus, Pholiota aurivella, Armillarieila mellea, Suillus luteus и др. Образование плотных, гладких, неправильной формы колоний вместо пушистых шариков происходит у некоторых видов при культивировании на бедных синтетических средах в случае плохого роста культуры.
Рост в виде мелких пушистых агломератов наблюдается у Lepista nuda. Lactarius helvus, Russula decolorans, Fiammulina velutipes, Panus tigrinus, Agaricus bisporus, Pholiota adiposa, Fistulina hepatica и др.
Наряду с мелкими плотными пушистыми шариками иногда образуются и более крупные гладкие шарики с пустой срединой. Обычно в культуральной жидкости присутствуют одновременно шарики разной величины — от плохо различимых невооруженным глазом до крупных,достигающих нескольких миллиметров в диаметре. В культуральной жидкости присутствуют также обрывки гиф, длинные разветвленные гифы, иногда образующие тяжи, рыхлые шариковидные скопления гиф, дающие начало крупным шарикам.
При исследовании с помощью сканирующей электронной микроскопии глубинной мицелиальной колонии P.tigrinus отмечено, что центральная часть колонии состоит из тесно переплетенных гиф, напоминающих ткань (табл. XXIX). Такая структура, обычная для всех мицелиальных грибов, затрудняет поступление питательных веществ и кислорода, в результате чего в центральной части мицелиально-го шарика наступает лизис (Перт, 1978) .
При культивировании Panus tigrinus в ферментере мы установили, что на форму роста значительное влияние оказывает режим механического перемешивания. Так, при скорости перемешивания 200—250 об/мин образуются плотные пушистые шарики, от которых отходят пучки разветвленных гиф (табл. XXX). При режиме перемешивания 500 об/мин отмечен рост в виде плотных гладких шариков, в периферической части которых образуется густой слой радиально расположенных слабо разветвленных гиф (табл. XXX).
В Литературе имеются данные, что дисперсному росту мицелия способствует добавление в среду СаСОз или агар-агара (Pat. 2850841, USA; Биосинтетическая деятельность ..., 1969). Как показали наши исследования, внесение в питательную среду небольших количеств (0,01—0,1 %) этих механических мелкодисперсных компонентов не оказывает заметного влияния на размер и форму мицелиальных шариков. Добавление агар-агара приводит к увеличению биомассы всех испытанных видов. СаСОз тормозит накопление биомассы у видов, проявляющих тенденцию к образованию крупных колоний.
Анаморфы и гифы глубинного мицелия: а - Panus tigrinus, б - Sparassis crispa, в - Oudemansiella tadicata, г — Agaricus arvensis
На форму роста колонии в глубинной культуре влияет способ инокуляции. Так, рост в виде плотных гладких шариков на качалке при 200 об/мин наблюдается обычно при инокуляции мицелием с агаровых косяков или плохо диспергированным поверхностным мицелием, выращенным на жидкой питательной среде. В том случае, когда инокуляция проводится дисперсным поверхностным или глубинным мицелием, рост, как правило, происходит в виде не очень крупных пушистых шариков.
Исследованные в процессе первичного отбора в глубинной культуре на качалке виды базидиомицетов при непродолжительном сроке культивирования образуют нормальные разветвленные септированные гифы с пряжками, если последние вообще свойственны данному виду. При старении культуры или неблагоприятных условиях культивирования внутри мицелиальных агломератов наблюдается образование гиф с утолщенными стенками, искривленных, вздутых, вакуолизирован-90 ных, с пустыми клетками, многочисленными боковыми ответвлениями (рис. 10).
