Высшие съедобные базидиомицеты в чистой культуре - Бухало А.С.
ISBN 5-12-000267-6
Скачать (прямая ссылка):
В то же время эта теория не указывает путей поиска активных штаммов. Логично предположить наличие у конкретных видов грибов определенных биологически активных веществ в связи с их функцией в природе, т.е. экологической приуроченностью. Следует, однако, учитывать, что в настоящее время существуют значительные трудности идентификации трофических групп высших базидиомицетов. Дискуссионен вопрос о различиях между двумя основными экологическими группами макромицетов: сапротрофами и микоризообразователями. Л.Г.Бурова (1984) считает, что выделенные трофические группы отличаются лабильностью типа питания и неустойчивостью связи с определенной древесной породой или субстратом. Многие симбиотрофы более или менее продолжительное время существуют сапротрофно в стадии свободноживущего мицелия. Автором в растительных сообществах, находящихся в неблагоприятных условиях температуры, влажности, питания, отмечена потеря облигатности связей симбиотрофов с определенными растениями. В то же время Л.Г.Бурова придерживается взглядов некоторых авторов о том, что симбиотрофы лишены ферментов, участвующих в разложении лигнинового комплекса, в частности лакказы, не образуют антибиотиков. Такая точка зрения не подтверждается рассмотренными выше литературными данными и проведенными нами исследованиями. Так, положительная реакция на лакказу (табл. 6) определена нами у симбиотрофных видов родов Boletus, Suillus, Amanita, Clitocybe, Lactarius и др. Антибиотические вещества известны у таких микори-зообразователей, как Lactarius deliciosus, Clitocybe nebularis, С. gigantea, C.illu-dens и др. (Биосинтетическая деятельность ..., 1969). Это свидетельствует об искусственном, до определенной степени, характере выделяемых в настоящее время экологических групп макромицетов, диктует необходимость уточнения и пересмотра критериев, на основании которых выделены эти группы.
При селекционном отборе штаммов высших съедобных базидиомицетов нами применялся наиболее рациональный многоступенчатый скрининг. Он позволяет устранить артефакты и отобрать штаммы с несколькими желаемыми свойствами, отвечающими условиям культивирования продуцента на конечном этапе. В случае многоступенчатого отбора селекционное воздействие осуществляется последовательным чередованием условий культивирования на каждом уровне. Следующим этапом после отбора на агаризованных средах явился отбор быстрорастущих и продуктивных штаммов в глубинной культуре на качалках на стандартной лабораторной питательной среде (пивном сусле).
Отбор проведен нами среди представителей разных таксономических и экологических групп по ряду признаков, существенных для продуцентов биомассы в глубинной культуре. Отбирались штаммы, активно накапливающие биомассу. Исследовался морфогенез, была определена штаммовая специфичность к основным источникам питания, стимуляторам роста, pH среды. Проводился подбор субстратов для глубинного культивирования иэ отходов промышленности и сельского хозяйства. Для более полной характеристики штаммов съедобных грибов, интродуцируемых в глубинную культуру, исследовалось образование некоторых биологически активных веществ.
4.1. Изучение питательных потребностей грибов
Выращивание мипелия высших базидиальных грибов в искусственных условиях требует изучения их отношения к факторам внешней среды, которые регулируют накопление биомассы или желаемых продуктов метаболизма. Изучение питательных потребностей позволило установить физиологические особенности определенных штаммов, а также использовать полученные результаты в дальнейшей работе по оптимизации. питательных сред, выбору субстратов для крупномасштабного культивирования. На жидких синтетических питательных средах исследовали рост при различном значении показателя концентрации водородных ионов (pH) в питательной среде, на питательных средах с разными источниками углерода, азота, стимуляторами.
4.1.1. Концентрация водородных ионов в питательной среде
Одним из важнейших факторов, регулирующих рост и метаболизм высших базидиомицетов в культуре, является pH питательной среды. Большинство видов способно расти при значительных изменениях показателей кислотности, хотя для многих оптимальные значения находятся в пределах pH 5—6 (Шиврина и др., 1969). Существует мнение, что настоящие микоризообразователи хорошо растут при кислых значениях pH среды, хуже — при нейтральных, а при щелочных совсем не развиваются (Melin, 1922, 1923; Modess, 1941; .Шемаханова, 1962). Грибы, принадлежащие одной и той же экологической или систематической категории, могут значительно отличаться по отношению к исходному pH среды, изменяя его в благоприятную или неблагоприятную для роста сторону. Это зависит как от состава питательной среды, так и от физиологических особенностей гриба (Шиври-на и др., 1969).
ВРипачек (1967) указывает на свойство видов, способных разрушать целлюлозу (возбудителей белой гнили), регулировать кислотность среды до более низких значений pH, по сравнению с лигниноразрушающими грибами (возбудителями бурой гнили). По его мнению, штаммы одного и того же вида, выделенные из разных местообитаний, различаются по отношению к pH среды. О.П.Низковская и НММилова (1973), изучавшие влияние исходного pH питательной среды на образование мицелия культурами базидиомицетов, установили, что имеются культуры как с высокой, так и с низкой оптимальной кислотностью, у некоторых видов отмечено два оптимума кислотности.
