Высшие съедобные базидиомицеты в чистой культуре - Бухало А.С.
ISBN 5-12-000267-6
Скачать (прямая ссылка):
Имеющиеся в настоящее время данные об образовании высшими съедобными базидиомицетами в культуре ферментов, антибиотиков и других биологически активных веществ свидетельствуют о важности и перспективности проведения дальнейших исследований в этом направлении. Биологически активные и ценные химические вещества могут явиться как конечным продуктом при культивировании мицелия съедобных грибов, так и побочным при промышленном производстве пищевой биомассы.
* *
Таким образом, литературные данные, хотя и очень неполные, позволяют считать, что в условиях глубинной культуры могут быть достигнуты такие показатели скорости роста, продуктивности, питательной ценности культурального мицелия, которые дают основание рассматривать высшие съедобные базидиомииеты как потенциальные продуценты пищевой биомассы. В то же время имеющиеся в литературе сведения не дают ответ на вопросы о методах получения чистых культур высших базидиомицетов, их идентификации, о видовом составе съедобных грибов, которые могут культивироваться глубинно, физиологии и морфологии роста в глубинной культуре конкретных видов. Не обоснованы критерии, которым должен соответствовать высший съедобный базидиомицет — продуцент пищевой биомассы. Некоторые требования к продуцентам, которые выдвигаются отдельными авторами, основываются на недостоверных или экспериментально не подтвержденных данных относительно биологических особенностей культивируемых видов и влияния на проявление свойств грибов специфических условий культивирования.
Состояние изученности высших базидиомицетов в чистой культуре и их практического использования определило основные направления нашего исследования, положенного в основу данной монографии. Большое внимание уделялось совершенствованию методов выделения в культуру конкретных видов, критической оценке признаков, использующихся для их идентификации в вегетативной стадии роста, изучению физиологии выделенных в культуру грибов, подбору питательных сред для культивирования их в крупных масштабах, разработке принципов селекционного отбора съедобных базидиомицетов.
ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Получение чистых культур высших базидиомицетов -
В настоящее время методы выделения высших базидиомицетов в чистую культуру разработаны недостаточно полно. Изоляция в культуру многих ценных съедобных грибов представляет значительные трудности, что делает невозможным их исследование и практическое использование. В связи с этим много внимания уделялось нами разработке воспроизводимых методов получения чистых культур определенных видов грибов (Бухало, 1966; 19736, 19826) . Мицелиальные культуры выделяли из ткани плодовых тел, базидиоспор, в отдельных случаях из субстратного мицелия, склероциев, ризоморф и т.д.
Плодовые тела собирали по возможности в период их обильного плодоношения, отбирали молодые, неповрежденные карпофоры — наиболее подходящий материал для изолирования тканевой культуры. Грибы собирали в дни, когда не было осадков, так как пропитанные водой плодовые тела обычно сильно инфицированы посторонней микрофлорой. Каждое плодовое тело помешали отдельно в полиэтиленовый мешочек или бумажный конверт и хранили в холодильнике при температуре 4—10 °С. Если сбор материала в условиях экспедиции длился 2—3 сут, плодовые тела до выделения тканевой культуры помещали в специальные деревянные ящики, разделенные на ячейки и устланные сухим мхом. Ящики с грибами хранили в прохладном месте открытыми.
Виды Coprinus, плодовые тела которых быстро расплываются, собирали так: часть субстрата, пронизанную мииелием, с зачатками плодовых тел подсушивали на воздухе и. когда позволяло время, инкубировали во влажной камере до образования плодовых тел.
Плодовые тела гастеромииетов для выделения тканевой культуры собирали, как правило, молодыми, до побурения глебы. Исключением были виды рода Scleroderma, у которых и в молодом возрасте глеба темноокрашенная. Виды родов Cyathus. Crucibulum. Nidularia собирали до разрыва пленчатого покрывала, закрывающего ’’корзиночки” с перидиолами, а виды Phallus - до разрыва перидия, что обеспечивает стерильность тканевой культуры.
При сборе плодовых тел отмечали важные для идентификации признаки, изменяющиеся при высыхании: цвет, запах, консистенцию шляпки, перидия, наличие чешуек, волосков, покрывала, изменение цвета отдельных частей плодового тела при разрезании, надавливании и тл. (Бондарцев, Зингер, 1950; Вассер, 1980).
Для сбора спорового материала использовали стерильные бумажные пакеты. Шляпку плодового тела на несколько часов закладывали в такой пакет пластинками или трубочками книзу и после получения спорового отпечатка удаляли. Пакет закрывали и хранили в холодильнике до момента выделения культуры. Аналогичным образом споровые отпечатки получали в чашках Петри.
Для выделения культур гастеромииетов из спорового материала собирали как плодовые тела в молодом возрасте, так и неповрежденные зрелые грибы. В первом случае плодовые тела сохраняли до потемнения глебы и изменения ее консистенции до пороши стой и сухой. Если выделение предполагали проводить из споровой массы не сразу, то плодовые тела высушивали при комнатной температуре неразрезанными и хранили завернутыми в чистую бумагу.
