Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.
Скачать (прямая ссылка):
кокки. Дифференцирование стафилококков, стрептококков и гонококков
проводится на основании взаимного расположения клеток, локализации их
внутри или вне лейкоцитов, окраски по Граму. Стафилококки и стрептококки
являются грамположительными кокками, которые располагаются, как правило,
вне лейкоцитов. Гонококки - грамотрицательные диплококки бобовидной формы
(0,96-1 мкм), располагающиеся внутри лейкоцитов (рис. 83). Положительный
бактериоскопический диагноз ставится в основном при острой форме гонореи
до применения антибиотиков. При хронической гонорее бактериоскопическое
исследование часто дает отрицательный результат.
Бактериологическое исследование'. Исследуемый материал петлей засевают на
чашки с сывороточным или асцитическим питательным агаром для получения
изолированных колоний. Посевы инкубируют при 37°С в течение 24-72 ч.
Гонококки образуют круглые прозрачные колонии, напоминающие капли росы, в
отличие от более мутных колоний стрептококка или пигментированных колоний
стафилококка, которые также будут расти на данной среде. Подозрительные
колонии пересевают в пробирки с той же средой для получения чистых
культур, которые идентифицируют по сахаролитическим свойствам на средах
"пестрого" ряда. Гонококк в отличие от других гноеродных кокков
ферментирует только глюкозу с образованием кислоты.
Микробиологическая диагностика уретрита,
вызванного микоплазмой
Бактериоскопия не применяется, поскольку обнаружить Mycoplasma hominis
или Mycoplasma urealyticum в патологическом материале не представляется
возможным.
1 Бактериологическое исследование при бленнорее проводят точно так же.
222
Бактериологическое исследование. Проводится путем посева материала,
взятого из уретры, петлей на твердую питательную среду в чашку Петри и
уколом в пробирку с полужидкой средой того же состава. В качестве
питательной среды используют триптический перевар бычьего сердца, пептон,
хлорид натрия, к которому добавляют дрожжевой экстракт и пенициллин (1000
ЕД) для задержки роста бактериальной микрофлоры. Посевы инкубируют при
37°С в течение 48 ч. Микоплазма образует колонии в виде яичницы-глазуньи
с врастающим в среду центром и полупрозрачной периферией. Идентификацию
выделенной культуры микоплазмы проводят по ферментации углеводов,
разложению аргинина и серологическим свойствам в реакции ингибиции роста
культуры специфической сывороткой и нейтрализации метаболизма аргинина
той же сывороткой. М. hominis в отличие от других видов микоплазм не
ферментирует углеводы и разлагает аргинин.
Микробиологическая диагностика мягкого шанкра
Материал для исследования: отделяемое язвы (мягкого шанкра).
Бактериоскопическое исследование. Проводится путем микроскопии мазков,
окрашенных по Граму и метиленовым синим.
Схема 21. Микробиологическое исследование при гонорее и бленнорее
Материал Гной из мочеполовых органов, осадок мочи, гной Сыворотха крови
из конъюнктивы глаза при бленнорее __________________
1-й этап
" I
Бактериоско- Бактериологическое исследо-пическое ис- вание
следование
1
Мазок, окраска Посев на сывороточный пи-по Г раму тательный агар в
чашку
_____________ Петри
Ответ'
Серодиагностика
РСК
2-й этап Характер колоний <------------
Мазок, окраска по Граму
Ответ
3-й этап
Пересев на сывороточный питательный агар (чистая культура)
п 1 о 1
Посев на "пест- Определение чувст-
рый" ряд вительности к анти-
биотикам
Окончательный ответ
223
Схема 22 Микробиологическое исследование при сифилисе
Материал Отделяемое твердого Сыворотка крови, ликвор
шанкра, пунктат лимфати- 1
ческих узлов, отделяемое
кожных поражений при
вторичном сифилисе Серодиагностика
1 I Микроскопическое ис- Реакция Вассермана 1 Реакция
иммобилиза-
следование ции трепонем
| РПГА <
Нативный препарат для Осадочные реакции 1- -> Иммунофлюоресцент-
микроскопии в темном Закса - Витебского, ное исследование
поле Кана
Ответ Ответ
Наличие в мазках грамотрицательных бактерий, располагающихся в виде
длинных цепочек, позволяет подозревать присутствие возбудителя - палочки
Дюкрея-Унны.
Бактериологическое исследование. Проводится путем выделения чистой
культуры возбудителя. Материал засевают на кровяной агар или другие
среды, содержащие дефибринирован-ную кровь. На этих средах гемофильная
палочка Дюкрея- Унны через 48-72 ч образует мелкие круглые колонии,
окруженные зоной гемолиза. Идентификацию выделенной культуры проводят по
ферментации сахаров и по способности агглютинироваться сывороткой этого
же больного.
Кожно-аллергическая проба. Ставится с антигеном из гемо-фильных бактерий
Дюкрея-Унны для подтверждения диагноза.
Микробиологическая диагностика сифилиса
Наиболее достоверный метод лабораторной диагностики сифилиса - выявление
возбудителя в пробах, взятых у больных в ранних стадиях заболевания,
путем бактериоскопического исследования в темном поле (схема 22).
Методы и материал, используемые для лабораторной диагностики сифилиса,
