Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.
Скачать (прямая ссылка):
высокопатогенны для морских свинок и малопатогенны для кроликов, М. bovis
непатогенны для морских свинок и кроликов.
Серодиагностика. Проводится ограниченно, ставят РСК и РПГА. Положительные
результаты отмечаются при активном туберкулезном процессе в организме, а
также при инфицировании микобактериями туберкулеза и вакцинации БЦЖ.
Кожно-аллергическая проба. Ставится с туберкулином - очищенной белковой
фракцией, полученной из микобактерий туберкулеза, для характеристики
состояния аллергии у людей с целью определения инфицированное(tm), оценки
течения туберкулезного процесса, определения эффективности вакцинации и
отбора контингентов для ревакцинации против туберкулеза. Туберкулин
вводят внутрикожно в строго определенной дозировке. Учитывают реакцию
через 24 - 48 ч по
образованию гиперемии и папулы (см. рис. 50).
*
Диагностические, профилактические и лечебные
препараты
Туберкулин сухой очищенный. Получен из фильтрата бульонной культуры
микобактерий путем добавления химических веществ, осаждающих белок, с
последующей очисткой. Применяется для постановки кожно-аллергической
пробы (реакция Манту).
168
Вакцина БЦЖ. Живая лиофильно высушенная культура апатогенного штамма
микобактерий туберкулеза, полученного французскими учеными Кальметтом и
Гереном. Применяется внутрикожно для активной специфической профилактики
туберкулеза.
Антибиотики и химиотерапевтические препараты, применяемые для лечения
туберкулеза. К препаратам первого ряда относятся основные
противотуберкулезные препараты: стрептомицин, ПАСК и производные ГИНК:
тубазид, фтивазид, метазид, к препаратам второго ряда - циклосерин,
канамицин, этионамид. При лечении больных обычно комбинируют препараты
первого и второго ряда с учетом клинической характеристики заболевания и
чувствительности микобактерий туберкулеза к лекарственным препаратам.
Микробиологическая диагностика актиномикоза
Возбудителями актиномикоза являются Actinomyces bovis, Actinomyces
israelii. Они вызывают заболевания, проявляющиеся в поражении легких и,
реже, других органов и тканей. Основным методом лабораторной диагностики
актиномикоза являются бактериоскопическое и бактериологическое
исследования.
Методические указания
Материал для исследования: гнойное отделяемое, мокрота, моча, пунктат и
биоптаты ткани из глубоких и закрытых очагов поражения.
Микроскопическое исследование. Подозрительные плотные комочки из
патологического материала переносят на предметные стекла в каплю 10-20%
раствора гидрокарбоната натрия, слегка подогревают и готовят препарат
"раздавленная" капля, который исследуют под микроскопом с объективами 8 и
40. В положительном случае в препаратах обнаруживаются актиномицеты в
виде друз - характерных зернистых образований с плотным центром,
окруженным лучистыми нитевидными клетками. Наряду с друзами встречаются
отдельные грамположительные неравномерно окрашивающиеся ветвистые
бактерии (см. рис. 15).
Бактериологическое исследование. Материал засевают штрихом на две чашки с
кровяным агаром, содержащим экстракт сердечной мышцы. Одну чашку
инкубируют в атмосфере азота, водорода и СО2, вторую - в анаэробных
условиях с добавлением 5% СО2. Через 18-24 ч образуются микроколонии, а
через
1-2 нед -зрелые колонии. Характерным признаком является "паукообразная"
структура микроколонии с многочисленными
169
ветвящимися нитями или зернистый центр с ветвящимися нитями по периферии.
Зрелые колоний могут быть плоскими, морщинистыми, бугристыми или
пленчатыми. Характер колонии и морфология клеток во многих случаях
позволяют отнести исследуемую культуру к роду Actinomyces. Окончательная
идентификация культуры до вида проводится на основании биохимических и
антигенных свойств (табл. 31).
Таблица 31. Дифференциальные признаки Actinomyces bovis и Actinomyces
Israelii
Признак A. bovis A. israelii
Характер микроколоний Г ладкие Шероховатые
Гидролиз крахмала (широкая зона) + -
Ферментация (до кислоты): арабинозы +/-
рибозы - +
ксилозы +/- +
рафинозы - +/-
растворимого крахмала + +/-
Условные обозначения: + наличие признака; - отсутствие
признака;
+ / - вариабельность признака.
Быстрые и специфические результаты дает иммунофлюорес-центное
исследование.
Серодиагностика. Ставится РСК с сывороткой крови больного и антигеном,
представляющим собой поливалентный актинализат. Положительная реакция
наблюдается у 80% больных людей.
Кожно-аллергическая проба. Ставится с экстрактом из актиномицетов.
Диагностические и лечебные препараты
Актинолизат. Фильтрат бульонной культуры спонтанно лизи-рованных штаммов
актиномицетов. Применяется для специфической иммунотерапии и в качестве
антигена для постановки РСК.
Актиномицетная поливалентная убитая вакцина. Готовится из спороносных
штаммов актиномицетов. Применяется с лечебной целью.
Антибиотики и химиотерапевтические препараты: тетрациклин, стрептомицин,
левомицетин, ристомицин, канамицин, сульфаниламиды.
170
Тема 27. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ДИФТЕРИИ
