Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.
Скачать (прямая ссылка):
определяют его лецитиназную активность (табл. 25).
Положительная реакция на лецитиназу проявляется в виде помутнения
жидкости в пробирке при отрицательной реакции, характеризующейся
нейтрализацией фермента соответствующей антисывороткой, жидкость остается
прозрачной.
Вследствие того что токсины разных видов клостридий отличаются по своим
антигенным свойствам, их серологическую идентификацию проводят в реакции
нейтрализации на лабораторных животных. С этой целью смесь исследуемого
токсина с антитоксической сывороткой (Cl. perfringens или Cl. novyi)
вводят подкожно морской свинке. В случае нейтрализации токсина животное
остается живым; при отрицательной реакции морская свинка погибает через
30 мин - 4ч после инъекции.
Микробиологическая диагностика столбняка
Возбудитель столбняка Cl. tetani (рис. 66) проникает в организм человека
через поврежденные кожные покровы при травмах и ранениях, у женщин через
родовые пути при родах и абортах, у новорожденных через пупочную рану.
Материал для исследования: кусочки ткани вокруг предполагаемых входных
ворот инфекции, гной, перевязочный материал, кетгут. При подозрении на
столбняк у женщин после родов или аборта - выделения из матки.
Бактериологическое исследование. Материал засевают в среду Китта -
Тароцци и инкубируют в анаэробных условиях при 37°С в течение 3-4 сут;
наблюдают придонный рост бактерий. Затем делают пересевы на сахарный
кровяной агар в чашки Петрй и в столбик сахарного питательного агара в
пробирке. Посевы также инкубируют в анаэробных условиях.
На поверхности кровяного агара палочка столбняка образует нежные
прозрачные колонии, окруженные малозаметной зоной гемолиза. Для получения
чистой культуры подозрительные колонии пересевают в пробирки со средой
Китта -Тароцци и сохраняют их под слоем вазелинового масла или в
эксикаторе, заполненном смесью инертных газов.
Биопроба. Основной метод лабораторной диагноста столбняка. Проводится для
обнаружения столбнячного токсина в исследуемом материале. С этой целью
материал растирают в стерильной ступке с песком, заливают изотоническим
раствором хлорида натрия для экстрагирования токсина и фильтруют через
бумажный фильтр. Часть фильтрата смешивают с антитоксической сывороткой и
внутримышечно вводят белым мышам (контрольная группа); подопытным
животным вводят один фильтрат.
148
Через 1-2 сут у мышей появляется ригидность мышц хвоста и задних
конечностей. В результате резкого сокращения хвостовых мышц хвост
поднимается в виде дуги. Затем подопытные животные погибают. Для
определения токсигенности выделенной культуры белым мышам вводят
надосадочную жидкость, полученную при центрифугировании этой культуры,
выращенной на жидкой питательной среде.
Профилактические и лечебные препараты
Антитоксические сыворотки - антиперфрингенс, антиэдема-тиенс (автинови),
антисептикум. Выпускаются в жидком и сухом виде после очистки и
концентрации методом фермента^ тивного гидролиза (диаферм-3)
антитоксической сыворотки, полученной при иммунизации лошадей
соответствующими анатоксинами. Применяется для профилактики и
специфической терапии раневой анаэробной инфекции (газовой гангрены).
Адсорбированный столбнячный анатоксин. Получен путем обезвреживания
формалином столбнячного токсина с последующей его очисткой, концентрацией
и адсорбцией на гидрате окиси алюминия. Входит в состав ассоциированной
коклюшно-дифтерийно-столбнячной вакцины и других препаратов. Применяется
для активной иммунизации против столбняка.
Противостолбнячная сыворотка. Получена из крови лошадей,
гипериммунизированных столбнячных анатоксином. Очищена и концентрирована
методом диаферм-3. Активность измеряется в международных единицах.
Применяется для профилактики и лечения столбняка.
Иммуноглобулин человеческий противостолбнячный. Получен из гамма-
глобулиновой фракции сыворотки крови людей-доноров, ревакцинированных
очищенным сорбированным столбнячным анатоксином. Применяется для
пассивной экстренной профилактики столбняка в сочетании со столбнячным
анатоксином при травмах кожных покровов, а также для лечения начавшегося
заболевания.
ВОЗБУДИТЕЛИ ВОЗДУШНО-КАПЕЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ
Возбудители инфекций, передающихся воздушно-капельным путем, принадлежат
к бактериям, риккетсиям и хламидиям, микоплазмам (табл. 26).
Перечисленные в табл. 26 микроорганизмы относятся к разным семействам,
родам и видам, которые существенно
149
Таблица 26. Возбудители бактериальных воздушно-капельных инфекций
Наименование возбудителей и заболеваний, вызванных
бактериями риккетсиями и хламидиями михоплазмой
Staph, aureus - пневмония Coxiella burnetii - Mycoplasma pne-
Str. pneumoniae - пневмония пневмония(в umoniae -
Str. pyogenes - пневмония 15% случаев) пневмонии
Klebsiella pneumoniae - пневмония Chlamidia psitta-
Bordetella pertussis - коклюш Corynebactcrium diphtheriae - дифтерия
Mycobacterium tuberculosis - туберкулез легких Actinomyces bovis -
актиномикоз летних Neisseria meningitidis - менннгокок-ковая инфекция
