Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.
Скачать (прямая ссылка):
(бактериологические петли, шпатели, иглы, пинцеты и др.), лабораторной
посудой (пробирки, колбы, чашки Петри, матрацы, флаконы, ампулы,
пастеровские и градуированные пипетки) и др.
В лаборатории имеется место для окраски микроскопических препаратов, где
находятся растворы красок, спирт, кислоты, фильтровальная бумага и пр.
Каждое рабочее место снабжено газовой горелкой или спиртовкой и банкой с
дезинфициру-
7
ющим раствором. Для повседневной работы лаборатория должна располагать
необходимыми питательными средами, химическими реактивами,
диагностическими препаратами и другими лабораторными материалами. В
крупных лабораториях имеются термальные комнаты для массового выращивания
микроорганизмов, постановки серологических реакций.
Аппаратура для выращивания микроорганизмов, стерилизации и других
микробиологических целей
1. Термостат. Аппарат, в котором поддерживается постоянная
температура. Оптимальная температура для размножения многих
микроорганизмов 37°С. Термостаты бывают суховоздушными и водяными (рис.
1). Используются для культивирования микроорганизмов.
Рис. l Термостат. 2. Микроаиаэростат. Аппарат для вы-
ращивания микроорганизмов в анаэробных условиях.
3. Сушильный шкаф (печь Пастера). Предназначен для стерилизации
лабораторной посуды и других материалов.
4. Автоклав. Предназначен для стерилизации паром под давлением (рис. 2,
а, б). В микробиологических лабораториях используются автоклавы разных
моделей (вертикальные, горизонтальные, стационарные, переносные).
5. Холодильники. Используются в микробиологических лабораториях для
хранения культур микроорганизмов, питательных сред, кроЬи, вакцин,
сывороток и прочих биологически активных препаратов при температуре около
4°С. Для сохранения биопрепаратов при температуре ниже 0°С используются
низкотемпературные холодильники, в которых поддерживается температура -
20°С и ниже.
6. Центрифуги. Применяются для осаждения микроорганизмов, эритроцитов и
других клеток для разделения неоднородных жидкостей (эмульсии,
суспензии). В лабораториях используют центрифуги, работающие на разных
скоростях.
7. Прибор для счета колоний (рис. 3). Полуавтоматический
8
Рпс. 2. Автоклавы.
а - горизонтальный; 6 - вертикальный (схема); 1 - стерилизационная
камера; 2 -кран для выхода воздуха; 3 - манометр; 4 - предохранительный
клапан; 5 - водопаровая камера; б - воронка для заполнения автоклава
водой; 7 - отверстия для поступления пара в стерилизационную камеру; 8 -
крышка; 9 - подставка для размещения стерилизуемых материалов.
Рпс. 3. Прибор для счета колоний микроорганизмов.
1 - столик для чашки Петри;
2 - игла с пружинным устройством; 3 - показатель счетчика; 4 - тумблер
для включения импульсного счетчика; 5 - тумблер для включения лампы
освещения счетчика.
Рис. 4. Микроскопы.
а - общий вид микроскопа "Биолэм"; б - схема микроскопа МБР-I: 1 -
основание микроскопа; 2 - предметный столик; 3 - винты для перемещения
предметного столика; 4 - клеммы, прижимающие препарат; 5 - конденсор; б -
кронщтейи конденсора; 7 - вннт, укрепляющий конденсор в гильзе; 8 -
рукоятка перемещения конденсора; 9 - рукоятка ирисовой диафрагмы
конденсора; 10 - зеркало; //- тубусодержатель; 12 - рукоятка
макрометрического винта; 13 - рукоятка микрометрического вннта; 14 -
револьвер объективов; 15 - объективы; 16 - наклонный тубус; 17 - винт для
крепления туоуса; 18 - окуляр.
счетчик, снабженный иглой с пружинным устройством. Легкий нажим иглы на
участке дна чашки Петри, соответствующей положению колонии, оставляет на
стекле метку. При этом держатель поднимается вверх, цепь замыкается и
показания счетчика увеличиваются на единицу.
Микроскопы и методы микроскопии
Для микробиологических исследований используют несколько типов
микроскопов (биологический, люминесцентный, электронный) и специальные
методы микроскопии (фазовоконтрастный, темнопольный).
Биологический микроскоп. В микробиологической практике применяют
микроскопы отечественных марок: МБР-1, МБИ-1, МБИ-2, МБИ-3, МБИ-6, Биолам
Р-1 и др. Они предназначены для изучения формы, структуры, размеров и
других признаков различных микроорганизмов, величина которых не . менее
0,2-6,3 мкм.
10
Фронтальная
Рпс. 5. Ход лучей в иммерсионной системе.
иммерсионной
Микроскоп состоит из двух частей - оптической и механической (рис. 4). К
оптике микроскопа относятся объективы, которые состоят из фронтальной
(нижней) линзы, увеличивающей объект, и коррекционных линз, исправляющих
¦недостатки оптического изображения. Объективы подразделяются на сухие и
иммерсионные (от immersio - погружение). В микроскопах МБР-1 и МБИ-1 два
сухих объектива и один иммерсионный. Данные о каждом объективе имеются на
его оправе: 1)Х8, 40, 90; 2) числовая апертура; 3) заводской номер.
Наряду с этими обозначениями иммерсионные объективы 90 имеют
дополнительный буквенный индекс ОИ или МИ (объектив иммерсионный или
масляная иммерсия), а также черную маркировочную линию в нижней части
