Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Борисов Л.Б. -> "Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии" -> 28

Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.

Борисов Л.Б. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии — М.: Медицина, 1984. — 256 c.
Скачать (прямая ссылка): rukovodstvoklabzadaniyampomikroekonomiki1984.djvu
Предыдущая << 1 .. 22 23 24 25 26 27 < 28 > 29 30 31 32 33 34 .. 96 >> Следующая

инкубации посевов при 37°С учитывают результаты опыта. Вокруг посевов
исследуемых культур, продуцирующих колицины, появляются прозрачные зоны
подавления роста индикаторного штамма.
Определение колнцинотипа. В питательный агар в чашке Петри уколом
засевают эталонные штаммы бактерий с известным колициногенотипом. Посевы
инкубируют при 37°С в течение 24 ч, после чего бактерии убивают в парах
хлороформа. Затем по поверхности агара равномерно распределяют 3 мл
расплавленного и остуженного полужидкого агара, смешанного с 0,1 мл 4-
часовой бульонной культуры E.coli неизвестного колициногенотипа
(например, Col А,
74
Col В и др.). Через 18-24 ч отмечают результаты опыта по наличию или
отсутствию роста исследуемой культуры вокруг эталонных штаммов. Рост
наблюдается лишь в том случае, если обе культуры (исследуемая и
индикаторная) имеют один и тот же колициногенотип, т. е. содержат
идентичные Col-плазмиды. В противном случае вокруг эталонных штаммов
появляются прозрачные зоны подавления роста бактерий.
АНТИБИОТИКИ
Антибиотики занимают ведущее место среди химиотерапевтических средств,
используемых для лечения различных бактериальных инфекций. В зависимости
от происхождения, химического строения, механизма антибактериального
действия и числа чувствительных к ним бактерий (спектр антибактериального
действия) антибиотики подразделяют на ряд групп. Наряду с антибиотиками
узкого спектра (пенициллины, це-фалоспорины) широко применяются
антибиотики широкого спектра действия (тетрациклины, левомицетйн и др.).
В связи с широким распространением антибиотикорезистентных бактерий выбор
препарата для лечения определенного
Таблица 6. Классификация бактерий по степени их чувствительности к
антибиотикам
Антибиотик Группа бактерий
I П III IV
чувстви- тельные среднечувст- вительные умеренно- устойчивые
устойчивые
Бензилпенициллин 0,25 16 128 >128
Метициллин 0,25 - - -
Ампициллин 0,25 16 128 >128
Карбенициллин - 16 128 >128
Цефалоспорины 2 16 128 >128
Стрептомицин 4 - 128 >128
Канамицин 4 - 128 >128
Неомицин 4 - 128 >128
Г ентамицин 0,5 4 64 >128
Левомицетин 1 8 - -
Тетрациклины 1 4 64 >64
Эритромицин 1 4 64 >64
Линкомицин 1 4 64 >64
Примечание. Цифрами обозначены минимальные ингибирующие концентрации
антибиотика в мкг/ мл или ЕД / мл; - группа не установлена.
75
больного зависит прежде всего от чувствительности к данному антибиотику
выделенного возбудителя. В настоящее время бактерии по степени их
чувствительности к антибиотикам разделены на четыре группы (табл. 6).
Тема 12. МЕТОДЫ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ
АНТИБАКТЕРИАЛЬНОГО ДЕЙСТВИЯ АНТИБИОТИКОВ
Программа занятия
1. Рассмотрение (по таблицам и схемам) механизмов антибактериального
действия важнейших групп антибиотиков.
2. Качественные и количественные методы определения чувствительности
бактерий к антибиотикам.
3. Метод определения активности антибиотика в жидкостях организма
человека (кровь, моча и др.).
4. Метод определения р-лактамазы.
Демонстрация
1. Препараты различных антибиотиков.
2. Стандартные бумажные диски, пропитанные антибиотиками, для определения
чувствительности к ним бактерий.
3. Таблицы и схемы антимикробных спектров важнейших групп антибиотиков и
механизмов их антибактериального действия.
Задание для выполнения лабораторной работы
1. Поставить опыт по определению чувствительности стафилококка к
различным антибиотикам методом дисков.
2. По результатам поставленных опытов определить: а) минимальную
ингибирующую концентрацию пенициллина для различных бактериальных культур
методом серийных разведений; б) концентрацию пенициллина (ЕД/мл),
содержащегося в сыворотке крови больного; в) способность различных
штаммов стафилококка продуцировать р-лактамазу, инактивирующую
пенициллин.
Методические указания
Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом дисков.
Исследуемую бактериальную культуру засевают газоном на питательный агар в
чашке Петри, после чего на его поверхность пинцетом помещают на
равномерном расстоянии друг от друга бумажные диски, содержащие
определенные дозы разных антибиотиков (рис. 43). Посевы инкубируют при
37°С до следующего дня. По диаметру зон задержки роста культуры
стафилококка судят об ее чувствительности к соответствующим антибиотикам.
При зоне задержки роста диаметром до 10 мм культура расценивается как
малочувствительная, а свыше 10 мм -как высокочувствительная. В том
случае, если диски пропитаны разными концентрациями одного
Таблица 7. Определение чувствительности бактериальной культуры к
антибиотику методом серийных разведений
N" пробирки Разведение антибиотика Концентрация антибиотика, мгк/мл
Исследуемая культура, мл Рост бактерий (помутнение среды)
1 1 100 100 0,1
2 1 200 50 0,1 -
3 1 400 25 0,1 -
4 1 800 12,5 0,1 -
5 1 1600 6,25 0,1 +
6 1 3200 3,12 0,1 +
7 1 мл бульона без антибиотика 0,1 + (контроль)
Примечание. - отсутствие роста исследуемой бактериальной культуры; +
наличие роста. Минимальная ингибирующая концентрация антибиотика 12,5 мкг
Предыдущая << 1 .. 22 23 24 25 26 27 < 28 > 29 30 31 32 33 34 .. 96 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed