Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Борисов Л.Б. -> "Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии" -> 16

Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.

Борисов Л.Б. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии — М.: Медицина, 1984. — 256 c.
Скачать (прямая ссылка): rukovodstvoklabzadaniyampomikroekonomiki1984.djvu
Предыдущая << 1 .. 10 11 12 13 14 15 < 16 > 17 18 19 20 21 22 .. 96 >> Следующая

2. Техника приготовления питательных сред.
Демонстрапня
1. Ингредиенты, используемые для приготовления питательных сред.
2. Питательные ср§ды: основные, дифференциально-диагностические,
элективные, синтетические.
3. Приготовление питательной среды из порошка или пасты.
4. Определение pH питательного бульона.
Методические указания
Приготовление питательных сред. Основные среды. Пасту триптического
гидролизата растворяют в определенном объеме
44
дистиллированной воды, устанавливают pH, разливают в соответствующую
посуду, закрывают ватно-марлевыми пробками и стерилизуют в автоклаве.
Порошок питательного агара вносят в определенный объем воды и кипятят в
течение 10-15 мин, после чего разливают в чашки Петри или пробирки. Для
приготовления скошенного питательного агара пробирки с разлитым агаром
оставляют застывать в наклонном положении на столе.
Кровяные, сывороточные и асцитические среды. К расплавленному и
остуженному до 45-50°С питательному агару стерильно добавляют 5-10%
дефибриниро-ванной крови или в таком же количестве сыворотку крови, или
25% асцитической жидкости, хорошо перемешивают и сразу же разливают в
чашки Петри, пробирки или другую лабораторную посуду. Для приготовления
жидкой среды такие же количества сыворотки или асцитической жидкости
добавляют к питательному бульону.
Среды с углеводами. К питательному агару или бульону добавляют 0,5-1%
глюкозы или другого углевода. Стерилизацию производят текучим паром или
паром под давлением 0,5 атм.
Элективные питательные среды. Пептонная вода 1%, pH 8,0. Элективна для
холерного вибриона, который размножается быстро, опережая рост других
микробов. Щелочная реакция среды не препятствует росту холерных
вибрионов, но тормозит рост других микроорганизмов.
Щелочной агар. Плотная среда: питательный агар, pH 7,8, аналогично
предыдущей среде, элективен для холерного вибриона.
Среда Леффлера. Смесь 1 ч. лошадиной сыворотки и 3 ч. сахарного бульона,
скошенная в пробирках при нагревании в аппарате Коха, элективна для
дифтерийных палочек. Быстрый рост этих микробов (4-6 ч) обеспечивает
элективность среды.
Среда Мюллера. Элективна для тифо-паратифозных бактерий, которые
значительно менее, чем кишечные палочки, чувствительны к тетратионату
натрия (это соединение образуется в питательном бульоне, куда добавляют
раствор Люголя и серноватистокислый натрий).
Желточно-солевой агар (Ж С А). Содержит повышенные концентрации хлорида
натрия (8-10%), которые не препятствуют размножению стафилококков, что
создает элективность этой среды для данных микробов. Среда дифференцирует
стафилококки, продуцирующие лецитовител-лазу, от стафилококков, не
выделяющих этот фермент, по
45
образованию зон помутнения с перламутровым оттенком вокруг колоний
лецитовителлазоположительных микробов (фермент расщепляет лецитиназу
куриного желтка, который вносится в расплавленный и остуженный до 45°С
питательный солевой агар).
Дифференциально-диагностические среды. Среды Г и с-с а. К 1% пептонной
воде добавляют 0,5% определенного углевода (глюкоза, лактоза, мальтоза,
маннит и др.) и индикатор Андреде (кислый фуксин в 1 н. растворе NaOH);
разливают по пробиркам, в которые помещают поплавок (трубка длиной около
3 см, один конец которой запаян) для улавливания газообразных продуктов,
образующихся при разложении углеводов. Стерилизацию проводят текучим
паром или паром под давлением 0,5 атм; поплавок при этом заполняется
питательной средой. Среда при pH 7,2-7,4 бесцветна. При разложении
углеводов приобретают красный цвет.
Промышленность выпускает в виде порошка полужидкие среды с углеводами и
индикатором ВР (смесь водного голубого и розоловой кислоты). Индикатор ВР
при нейтральной ¦реакции среды бесцветен, в кислой среде он имеет синюю
окраску, в щелочной - красную. Образующийся газ разрывает столбик
полужидкого агара.
Среда Эндо. Выпускается в виде порошка, который состоит из высушенного
питательного агара с 1% лактозы и индикатора - основного фуксина,
обесцвеченного сульфитом натрия. Перед употреблением определенную навеску
порошка вносят в дистиллированную воду, кипятят, а затем разливают по
чашкам Петри. Свежеприготовленная среда бесцветна или имеет бледно-
розовую окраску. При росте лактозоположительных бактерий их колонии
окрашиваются в темно-красный цвет с металлическим блеском;
лактозоотрицательные бактерии образуют бесцветные колонии.
Среда Левина. Выпускается. в виде порошка и состоит из высушенного
питательного агара с лактозой, К2НР04, метиленовым синим и эозином.
Готовится так же, как и среда Эндо. Среда темно-фиолетового цвета.
Лактоположитель-ные бактерии образуют колонии насыщенного синего цвета,
лактозоотрицательные - бесцветные колонии.
Среда Плоскирева (бактоагар Ж). Выпускается в сухом виде и содержит
питательный агар с лактозой, бриллиантовым зеленым, солями желчных
кислот, минеральными солями и индикатором (нейтральный красный). Эта
среда является не только дифференциально-диагностической, но и
Предыдущая << 1 .. 10 11 12 13 14 15 < 16 > 17 18 19 20 21 22 .. 96 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed