Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии - Борисов Л.Б.
Скачать (прямая ссылка):
По Романовскому - Гимзе спирохеты возвратного тифа окрашиваются в
фиолетовый цвет, эритроциты крови -в розовый, ядра лейкоцитов -в
фиолетовый. Трепонемы окрашиваются в бледно-розовый цвет, лептоспиры -в
розово-сиреневатый.
Тема 4. МОРФОЛОГИЯ РИККЕТСИЙ И ХЛАМИДИЙ.
МОРФОЛОГИЯ МИКОПЛАЗМ
Риккетсии и хламидии относятся к классу Rickettsia облигатных
внутриклеточных паразитов, который делится на два порядка: Rickettsiales
и Chlamidiales.
Риккетсии представляют собой мелкие грамотрицательные микроорганизмы,
характеризующиеся выраженным полиморфизмом-образуют кокковидные,
палочковидные и нитевидные формы (рис. 22). Размеры риккетсий варьируют
от 0,5 до 3-4 мкм, длина нитевидных форм достигает 10-40 мкм. Спор и
капсул не образуют, окрашиваются по Здродовскому в красный цвет.
Хламидии имеют шаровидную, овоидную или палочковидную форму. Их размеры
колеблются в пределах 0,2-1,5 мкм. Морфология и размеры хламидий зависят
от стадии их внутриклеточного цикла развития, для которого характерно
превращение небольшого шаровидного элементарного образования в крупное
инициальное тельце с бинарным делением. Перед делением частицы хламидий
обволакиваются образованием, напоминающим бактериальную капсулу. Хламидии
окрашиваются"* по Романовскому-Гимзе, грамотрицательны, хорошо видны в
прижизненных препаратах при фазовоконтрастной микроскопии.
К классу Mollicutes относится только один порядок Mycoplasmatales.
Представители этого порядка - микоплазмы -
30
отличаются от бактерий отсутствием клеточной стенки. Вместо нее они
содержат трехслойную липопротеидную цитоплазматическую мембрану. Размеры
микоплазм колеблются в пределах 125-250 мкм. Они имеют форму круглых,
овальных или нитевидных образований, грамотрицательны.
Программа занятия
Изучение морфологических признаков риккетсий, хламидий и микоплазм.
Демонстрация
1. Хламидии в инфицированных клетках эпителия конъюнктивы, мазках-
отпечатках из органов и культуры ткани.
2. Электронно микроскопические фотографии риккетсий, хламидий и
микоплазм.
Задание для выполнения лабораторной работы
Изучить морфологию риккетсий в препарате, окрашенном по Романовскому-
Гимзе.
• " \ : •' \
* * • • *
>=" * * *#
^ •• *
. .1 ч
i
• *** с
Рис. 22. Морфологические ц у*
типы пшгкетеий Knvvn-
типы риккетсий. Кокко- "*
видные, палочковидные и Ц
мицеллярные формы.
31
Методические указания
Окраска риккетсий по методу Здродовского. 1. Окрашивают мазок разведенным
фуксином Циля (10-15 капель на 10 мл дистиллированной воды) в течение 5
мин.
2. Промывают водой.
3. Обрабатывают мазок 0,5% раствором лимонной кислоты или 0,01% раствором
хлористоводородной кислоты.
4. Промывают водой.
5. Окрашивают метиленовым синим в течение 1 мин.
6. Промывают водой, высушивают препарат.
Риккетсии по методу Здродовского окрашиваются в красный цвет, цитоплазма
клеток, в которых они паразитируют,- в голубой, ядра - в синий.
Тема 5. МОРФОЛОГИЯ И УЛЬТРАСТРУКТУРА ВИРУСОВ
Вирусы человека, животных, растений, насекомых и бактерий (фаги) выделены
в царство вира (Vira). Они отличаются от других микроорганизмов своей
ультраструктурной органш зацией и наличием только одного типа нуклеиновой
кислоты-РНК или ДНК. Внеклеточная форма существования вируса называется в
и р и о н о м. Размеры вирионов колеблются от 15-20 до 300-500 нм. Они
имеют палочковидную или цилиндрическую форму (вирус табачной мозаики),
нитевидную форму в виде изгибающихся тонких нитей шириной около 10 нм и
длиной до 500 нм и более (вирусы растений и некоторые фаги), сферическую
форму, напоминающую многогранники (пикорнавирусы, аденовирусы), форму
параллелепипеда (поксвирусы) и булавовидную или сперматозоидную форму
(вирусы бактерий-фаги).
Простейшие вирионы состоят из нуклеиновой кислоты и белковой оболочки -
капсида, который плотно ее окружает. В морфологическом отношении их
характеризуют как нуклео-капсиды, а в химическом - как нуклеопротеиды.
Капсиды вирионов состоят из отдельных структурных субъединиц
(полипептидные цепи), объединенных в симметричные группы по кубическому
или спиральному типу симметрии (рис. 23, а, б). Объединения единиц с
кубическим типом симметрии называются морфологическими единицами, или
капсомерами, которые могут быть обнаружены при электронной микроскопии.
Капсиды построены из определенного числа капсомеров, характерного для
каждой группы вирусов с кубическим типом симметрии. Например, у
аденовирусов (рис. 24, а, б) капсид построен из 252 капсомеров. У
вирионов со спиральным типом симметрии структурные
32
Рис. 25. Вирус мозаики (ВТМ).
табачной
а - модель ВТМ. Изображен фрагмент вирусного капсида, построенного из
одинаковых спирально расположенных белковых субъединиц. Между
субъединицами помещается цепочка РНК, конфигурация которой целиком
определяется их спиральным расположением. Часть спирали РНК условно
показана свободной; б - вири-оны ВТМ. Электронная микроскопия.
2-639
Рис. 26. Вирус оспы.
а - строение вириона оспы (схема):
