Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Болдырева А.А. -> "Биохимия мембран. Эдоцитоз и экзоцитоз. Том 2 " -> 20

Биохимия мембран. Эдоцитоз и экзоцитоз. Том 2 - Болдырева А.А.

Болдырева А.А. Биохимия мембран. Эдоцитоз и экзоцитоз. Том 2 — М.: Высшая школа, 1987. — 95 c.
Скачать (прямая ссылка): endocintozexocintoz1987.djvu
Предыдущая << 1 .. 14 15 16 17 18 19 < 20 > 21 22 23 24 25 26 .. 45 >> Следующая

кластеризацию рецепторов, так и специфический эндоцитоз. В макрофагах
комплекс Fab-рецептор интернализируется, а рецептор рециклизируется;
комплекс Р(аЬ)г'-рецептор не рециклизируется после внутриклеточной
аккумуляции.
Клатриновая "шуба" располагается в плазмалемме не случайно, однако
механизм узнавания мембранами клатрина неизвестен. Неясно, что является
триггером формирования клатриновой "шубы" и интернализации. Известны
мутанты фиброблас. тов с дефектом интернализации, которые связывают ЛНП в
-"неодетой" области плазмалеммы, однако интернализация происходит с
низкой скоростью. Клетки карциномы А-431 человека имеют большое число
рецепторов для ЛНП, но в плазмалемме зоны рецепторов мембраны изнутри не
покрыты клатриновой "шубой", поэтому интернализация протекает довольно
медленно. В некоторых случаях связавшиеся с мембраной вирусы далее
мигрируют по мембране к "окантованному" участку и только после этого
интернализируются.
2.3. Свойства одетых везикул. Клатрин
•Одетые (окаймленные, окантованные) везикулы и их основной "белковый
компонент - клатрин впервые выделены (1975) сначала из мозга, а потом из
других тканей. Они содержат на внешней поверхности клатриновую "шубу",
которая представляет собой корзинчатЪге структуры (^"1,2 нм) с пента- и
гексагональными ячейками (ширина 6,5 нм, длина 16,5 нм), образованные m
результате полимеризации клатрина. Эти органеллы вариабельны по своим
размерам (d"50-250 нм) даже в одной и той .же клетке. Одетая везикула
диаметром 200 нм содержит около •сотни молекул клатрина. Клатриновая
сеть, как правило, состоит из 12 пента- и 4 (или 8) гексагонов.
Клатриновая решетка локально разупорядочивает липидный бислой мембран
одетых •везикул. Помимо основного филаментозного кислого белка клатрина
(180 кД) в составе одетых везикул определяется несколько минорных белков
- 32 и 36 кД (легкие цепи клатрина), 55 я 100-150 кД. Клатриновую сеть и
сам клатрин можно отделить от мембран одетых везикул, при этом образуются
похожие на трилистник структуры - трискелионы. При определенных условиях
наблюдается агрегация трискелионов в своего рода кор-зинчатые структуры,
которыми окружены одетые везикулы.
Трискелион (630 кД; 8,4S) состоит из трех молекул клатрина и трех молекул
низкомолекулярного минорного белка. Предполагают, что эти минорные белки
крепят полигональную вершину тримера клатрина в составе трискелионов. С
мембранами одетых везикул клатрин связывают высокомолекулярные минорные
белки (50 и (или) 100-150 кД). Считают, что сборка клатрина в
45
решетчатые структуры происходит на внутренней поверхности плазмалеммы.
Образование такой решетки - сигнал для образования инвагинации
(окаймленной ямки) с комплексом лиганд - рецептор и формирования одетых
везикул. Трискелион связывается с одетыми везикулами, из которых удалена
клатриновая сеть, но не связывается с везикулами из эритроцитов; эти
везикулы не способны образовывать одетые везикулы. Очевидно, на
поверхности одетых везикул есть белок, ответственный за прикрепление
клатриновой сети.
В опытах in vitro детально изучен процесс разборки одетых: везикул и
обратный процесс сборки клатриновой сети из клатри-на и построение
"каркаса" на "раздетых" гладких везикулах^ Разборка одетых везикул
протекает при рН^8,0, при этом ионы Mg (10 мМ) стабилизируют одетые
везикулы от разборки и ускоряют сборку. Для сборки нативных одетых
везикул необходимы как клатрин, так и минорные компоненты. Ионы Mg
незаменимы на Са+2, Mn2+, Zn2+. Если одетые везикулы обработать 2М
мочевиной, то разборка приводит к появлению в среде инкубации гладких
везикул, клатриновой сети (полимеры клатрина) и легких цепей клатрина.
Если же далее среду довести до pH 8,3, то образуются трискелионы, которые
при pH 6,5 преобразуются в корзинчатые структуры диаметром 80 нм, похожие
на нативные одетые везикулы.
Итак, разборка одетых везикул протекает при щелочных значениях pH, сборка
же происходит при pH 7,0; последний процесс тормозится ацидотропными
веществами. В мембранах одетых везикул локализована протонная АТФаза
немитохондриального типа, т. е. гидролиз АТФ протекает на внешней
поверхности везикул, при этом происходит подкисление матрикса везикул.
В среде с высокой ионной силой (0,5-0,6 М KI; ^0,25М MgCl2) из одетых
везикул экстрагируется клатрин. Последующий диализ этой суспензии против
буфера с низкой ионной силой приводит к сборке корзинчатых структур, не
идентичных полностью одетым везикулам; для нормальной сборки необходимы
минорные белки. Очищенный клатрин в этих условиях не поли-меризуется.
Клатрин (8,2S) при рН^7,0 в присутствии К+ я Mg2+ образует решетчатые
структуры; в отсутствие Mg2+-агрегаты диаметром 16 нм, а при pH 7,5 в
отсутствие солен образует прозрачные растворы, содержащие линейные
волокна; в присутствии 0,2 М CH3COONa образует крупные полимеры с К&. 150
и 300S. Ограниченный протеолиз способствует разборке одетых везикул и
появлению в среде инкубации клатриновой сети без легких цепей.
Предыдущая << 1 .. 14 15 16 17 18 19 < 20 > 21 22 23 24 25 26 .. 45 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed