Методы экспериментальной микологии - Билай В.И.
Скачать (прямая ссылка):
Среда Чапека с 1%-ным дрожжевым экстрактом. Дрожжевой экстракт готовят
следующим способом: суспензию из 100 г обычных хлебопекарских дрожжей в
400 мл воды автоклавируют при давлении 2 атм 30 мин. После осаждения
надосадочную жидкость добавляют к среде Чапека. Применяют для
культивирования видов Pythium, Phytophthora и других фитопатогенных
грибов; Colletotrichum lindemuthianum на этой среде обильно спороносит.
Среда для изоляции Phytophthora tnfestans из корней (мкг/мл): 20 г
кукурузной муки; 100 пимарицина; 100 нистатина; 50 пенициллина; 50
полимиксина.
Среда для образования спороношения Phytophthora parasitica; 20 г порошка
древесного угля; 1 л воды.
Среда для получения перитециев у Drechslera (г): 6 сахарозы; 2,7 про-
лина; 1,3 К2Р04; 0,5 КС1; 0,5 MgS04; 10 мг. FeS04; 2 мг ZnS04; 1,6 мг
МпС12; 20 агара; 1 л воды.
Среда для культивирования Puccinia graminis /. tricini: к среде Чапека с
сахарозой добавляют 0,1% дрожжевого экстракта, 0,1 пептона, 1% бакто-
агара Дифко, автоклавируют при 121° С.
Среда для изоляции Graphium (конидиальной стадии Ceratocystis ulmi): 200-
300 мкг/мл циклогексимида и 10 мкг/мл стрептомицина добавляют в
картофельно-декстрозный агар.
Селективная среда для разделения видов Verticillium: 50 г высушенных
слив, разрезанных на кусочки, кипятят в 1 л воды 30 мин и отделяют
жидкость от мякоти, протирая через фильтр. На 100 г такого экстракта
добавляют 5 г лактозы, 1 г дрожжевого экстракта Дифко и 30 г агара,
доводят до 1 л дистиллированной водой (pH 5,8-6,0). Среду разливают в
чашки Петри. По характеру роста обратной стороны колонии определяют
следующие виды: V. dahliae - структура колоний узловатая и
гранулированная в результате развития черных микро-склероциев; V. albo-
atrum - темноокрашенные гифы образуют отдельные радиальные структуры; V.
tricorpus-образуются хламидоспоры, обратная сторона может быть радиальной
и гранулированной.
Приложение 9 (см. раздел XIX.2.6.). Основные питательные среды для
культивирования морских грибов
Среда GY (%): 0,1 глюкозы; 0,01 дрожжевого экстракта Дифко; 1,8 агара на
1 л морской воды. Иногда указанные выше компоненты входят в состав среды
в иных количествах (%): 0,5 глюкозы; 0,1 дрожжевого экстракта; 1,8 агара
или 1,0 глюкозы; 0,1 дрожжевого экстракта;
1,5 агара [703, 817]. Селективность этой среды для выделения грибов,
особенно растущих на погруженных панелях древесины, значительно
увеличивается, если соленость морской воды, используемой для приго-
487
товления среды, составляет приблизительно 20°/00 и если к среде добавляют
0,03% стрептомицина. Стрептомицин в указанной концентрации действует как
прекрасный ингибитор роста морских бактерий, часто загрязняющих культуры
медленно растущих морских сумчатых и несовершенных грибов. В то же время
он не подавляет развития этих грибов.
Для культивирования морских грибов используют также универсальные среды:
картофельно-декстрозный агар (КДА), декстрозо-пеп-тонный агар, среду
Чапека, обедненный агар Сабуро и др. [8] и различные среды
неопределенного состава: голодный агар с морской водой; среду, в состав
которой сходят 1,5% мальц-экстракта на 1 л морской воды; среду TG [576,
578]: 10,0 г глюкозы и 3,0 г триптона на 1 л морской воды.
Среда Вишняк в модификации Анастазиу и Черчленда [493] (г): 0,02
экстракта печени; 1,0 глюкозы; 0,2 дрожжевого экстракта; 0,1 различных
аминокислот из казеина; 15,0 агара на 1 л профильтрованной стерильной
морской воды. Для подавления бактериального загрязнения при
культивировании грибов к этой среде после стерилизации добавляют до 500
тыс. ед. пенициллина и 0,5 г стрептомицина.
Среда Тубаки [818] (г): 30,0 глюкозы; 1,0 пептона; 0,5 MgS04 • 7Н20; 0,01
FeS04 • 7Н20; 1,0 К2НР04; 0,5 дрожжевого экстракта; 15,0 агара. Доводят
объем раствора дистиллированной водой до 1 л. В качестве источника хлора
к основной среде поочередно добавляют NaCl, КС1 и MgCl2, а также смесь
этих солей (2-7%).
Среда MS-1 (модифицированная среда Чапека - Докса) [636] (г):
3.0 NaN03; 1,0 К2НР04; 0,001 FeS04 . 7Н20; 0,5 КС1; 0,5MgSO4 • 7Н20;
10.0 глюкозы на 1 л выдержанной отфильтрованной естественной морской
воды.
Среда MS-2 Густафсона и Фриза, незначительно модифицированная Джонсоном с
сотр. [636] (г): 1,0 Na2S04 • 10 Н20; 2,5Na2HP04 X X 2НаО; 1,0 КН2Р04;
0,1 СаС12; 5,5 мг MgCl2 • 6Н20; 5,5 мг MnS04 X X 4Н20; 4 мг ZnS04 • 720;
5,5 мг лимоннокислого железа; 5 мг лимонной кислоты; 1,0 1-аспарагина;
10,0 глюкозы на 1 л отфильтрованной морской воды.
Среда MS-4 (г): 25,0 NaCl; 10 MgCl2 • 6Н20; 5,0 Na2S04 • ЮН20;
2,5 СаС12 • 6Н20; 0,7 КС1; 0,2 NaHC03; 0,003 Н3В03; 0,001 FeP04 X X
4Н20; 0,1 КВг; 0,05 SrCl2 • 6Н20; 0,005 Na2Si03 • 9Н20; 0,005 NaF; 0,002
NH4N03; 10 глюкозы на 1 л дистиллированной воды. Для получения
агаризованной среды MS-4 добавляют 1,8% агара [636, 679].
Модифицированная среда MS-4 [637] (%): 2,0 NaCl; 0,5MgSO4 X X 7Н20; 0,01
К3Р04; 0*02 NH4N03; 0,05 К3С6Н207 • Н20; 0,01 СаС12 X X 6Н20; 0,06 КС1;
