Методы экспериментальной микологии - Билай В.И.
Скачать (прямая ссылка):
разработки эффективных средств защиты растений. Она включает изучение
особенностей морфогенеза возбудителей, влияния внешних факторов,
компонентов питательной среды на их рост и развитие, определение
характерных биохимических свойств организмов в лабораторных условиях.
Так, например, у видов рода Fusarium установлены следующие
морфогенетические особенности: разнообразие типов спороношения (микро- и
макроконидии), определенные их соотношения в изоляте (популяции).
Микроконидии предназначены главным образов для массового заселения
субстрата, они многочисленны, но не переживают в почве, в то же время у
разных изолятов они разнокачественны (по морфологии, размерам,
физиологической зрелости, жизнеспособности).
Особое значение для сохранения видов грибов имеют переживающие в почве
структуры фитопатогенных видов, прежде всего мицелиальные и конидиальные
хламидоспоры, а также фрагменты мицелия с клетками хламидоспорового типа,
склероции, мицелиальные тяжи. Они устойчивы к воздействию различных
факторов - температуры, влажности, действию фунгицидов и др. Эти
структуры существуют как в сапрофитной фазе, так и в тканях пораженного
растения. Наличие переживающих структур создает потенциальную
инфекционность, что может быть причиной увеличения численности инокулюма
в сапрофитной или факультативно-паразитной фазе, образования рас,
резистентных к фунгицидам и вирулентных. В связи с этим для
фитопатологической характеристики отдельных видов грибов существенное
значение имеет определение наличия и способности к прорастанию различных
морфологических структур; конидий, хламидоспор, клеток мицелия склероциев
в почве, тканях растения и растительных остатках. Способность к
прорастанию нередко ингибируется споростазисом - образованием в почве
веществ различной природы, иногда летучик, ингибирующих процесс
прорастания.
430
Выяснение физиолого-биохимических механизмов действия патоге* на на
растение позволяет объяснить многие проявления его агрессивности. Обычно
действие патогена обусловлено комплексом свойств гриба и растения. Так,
при фузариозах сельскохозяйственных растений физио-лого-биохимическое
воздействие осуществляется двумя основными путями - ферментативным и
токсигенным, хотя часто они взаимосвязаны и взаимообусловлены.
Ферментативная активность гриба связана с проникновением его в ткани и
клетки, т. е. с разрушением полимеров клеточной оболочки и межклеточного
вещества растений - кутина, пектина, целлюлозы, гемицеллюлозы и др.
Потребность в источниках углерода обеспечивается за счет ферментативного
расщепления этих полимеров, освобождения легкоусвояемых мономеров,
обеспечивающих интенсивный рост и спо-роношение гриба в пораженном
растении. Путь ферментативного расщепления существенно нарушает процессы
метаболизма растения, связанные с образованием клеточной оболочки и
межклеточного вещества. Токсигенность, или фитотоксичность, патогена -
это способность его образовывать более или менее видоспецифические
вещества, ингибирующие отдельные метаболические процессы растения,
снижающие его устойчивость, урожай или вызывающие его гибель.
XIX. ВЫДЕЛЕНИЕ ГРИБОВ ИЗ ПРИРОДНЫХ СУБСТРАТОВ
XIX.1. ВЫДЕЛЕНИЕ ПОЧВЕННЫХ ГРИБОВ В ЧИСТЫЕ КУЛЬТУРЫ
XIX.1.1. ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ
Почвенные грибы - обширная и сложная экологическая группа организмов.
Среди них имеются представители, поражающие насекомых, нематод, корни
растений; многие виды развиваются на экскрементах животных, растительных
остатках; известны грибы-микоризообразо-ватели. Таким образом,
большинству грибов, обитающих в почвах, свойственна приуроченность к
определенному субстрату. Эту особенность широко используют микологи при
выделении некоторых видов и групп грибов в чистые культуры на питательные
среды. Предложено большое количество питательных сред, содержащих
различные источники углерода и азота. Подробные сведения о них изложены в
работах [51, 53, 71, 264, 353]; ниже приведен состав только некоторых, в
основном редко применяемых питательных сред.
XIX.1.2. ВЫДЕЛЕНИЕ ГРИБОВ ИЗ ПОЧВЫ
Для выделения грибов из почв обычно используют твердые (агаризо-ванные)
питательные среды с легкодоступными источниками углерода - сахарозой,
глюкозой, декстрозой. К таким средам относятся агаризо-ванная среда
Чапека, картофельно-декстрозный агар, агаризованное пивное сусло. С
помощью этих питательных сред обнаруживают и учитывают в основном
быстрорастущие и обильноспороносящие таксоны (виды Penicillium Link ex
Fr., Aspergillus Micheli ex Fr. и др.).
XIX.1.2.1. ВЫДЕЛЕНИЕ ГРИБОВ НА СЕЛЕКТИВНЫЕ СРЕДЫ
При экологическом анализе микофлоры почв, т. е. учете грибов,
приуроченных к определенным субстратам, применяют разные селективные
питательные среды. Так, целлюлозоразрушающие грибы изолируют на
питательные среды, содержащие целлюлозу (фильтровальную бумагу) или же
синтетические среды с целлюлозой либо карбоксиметил-целлюлозой. Для
выделения грибов на фильтровальную бумагу последнюю нарезают полосками,
