Молекулярные механизмы морфогенеза - Банников Г.А.
Скачать (прямая ссылка):
ние гепарина и адгезию некоторых клеток, идентична гомологичной последовательности в S-лаМинине в i J. из 20 остатков [292]. Показано, что аксоны моторных нейронов способны прикрепляться к S-ламинину и некоторым его фрагментам. Хотя сродство аксонов к S-ламинину в опытах in vitro,-не выше, чем к ламинину, на основании того что S -ламинин сконцентрирован в синаптической щели, считают, что этот белок при реиннервации обеспечивает образование новых нервно-мышечных контактов точно в тех участках, где располагались "старые*' синапсы [292]. Надежность попадания аксона в зону предсушествующего ранее синапса - около 95%, поистине удивительна, если учесть, что плошадь синаптической поверхности составляет охоло 0,1% поверхности мышечного волокна [552].
Мерозин. Специфический белок базальной мембраны ме-розин с мол. массой около 80 кД, обнаружен в базальных мембранах трофобласта. Позднее этот компонент появляется в базальных мембранах периферических нервов и поперечно-полосатых мышц [374],
Фактор Фон Виллебранлп. Этот высокомолекулярный муль-тидоменный белок, процессированная молекула которого имеет мол. массу 250 кД, секретяруется эндотел ионитами и мегакариоцитами [бЗЗ]. Длинные нитеобразные полимеры белка образуются за счет межмолекулярных дисульфидных связей между концевыми доменами молекул. Эти полимеры могут откладываться в базальных мембранах сосудов и капилляров. Большая' часть белка хранится а специализирован— ных внутриклеточных гранулах и его главная функция, по-видимому, состоит в обеспечении адгезии тромбоцитов к внеклеточному матриксу, сосудов при повреждении эндотелия сосудистой стенки [633].
Другие компоненты. В базальных мембранах эмбриональных тканей некоторых локализаций содержится фибронекгин и тенасцин. В некоторых базальных мембранах обнаруживают белки амилоида-Р и компоненты комплемента [632], аЦетилхолинэстеразу и белок агрин, который, вероятно, способствует аггрегации ацетилхолинэстераэы в участках нейро-мыщечного соединения [229]. Уже упоминались фак-торы роста из семейства щелочного ФРФ, накапливают^ ся в базальной мембране в связанном с гепарансульфатпротео-г;шканом виде. Обнаружено связывание с базальной ме s. браной коллагоназы, специфичной в отношении прот». олиза ко лагенл IV [538]. Электрофоретический анализ экстрактов
95
базальных мембран [336, 480, 483] показывает, что в этом материале содержится большое число еще неидентифи-
II кропанных компонентов.
2.2.2. Клеточные рецепторы
Из материала предыдущей главы можно сделать вывод, что молекулярные детерминанты компонентов внеклеточного матрикса, ответственные за взаимодействие с клеточной поверхностью, весьма разнообразны по своей природе. Это разнообразие предполагает существование более одного класса соответствующих рецепторов. Однако на сегодняшний день почти все, что известно в этой области, относится к взаимодействиям RDG -последовательностей белков внеклеточного матрикса с рецепторами семейства интегринов.
2.2.2.1. Интегрины
2.2.2.1.1. Структура, лиганды, специфичность
Интегрины составляют многочисленное семейство трансмембранных белков, состоящих из двух субъединиц: а и ft. Первичная структура большинства известных интегринов предсказана на основе последовательностей соответствующих к ДНК [76, 294, 530, 533]. Обе субъединицы имеют крупный внеклеточный домен, трансмембранный домен и короткий цитоплазматический домен. К характерным чертам внеклеточного домена а -субъединиц относятся: несколько сайтов связывания кальция, по структуре напоминающих Са -связывающие участки кальмодулина, сайт протеолитической деградации, расположенный у С -конца внеклеточного домена [533] и 180-членная последовательность коллаген-связы-вающего домена [505]. ./3-субъединица во внеклеточном домене содержит участок, богатый цистеином и внутрицепочеч-ными дисульфидными связями, функция которого неизвестна, а в цитоплазматическом домене последовательность фосфо-рилирования по тирозину [294]. а-и ^-субъединицы нековалентно связаны между собой, причем двухвалентные ионы благоприятствуют этой ассоциации [228]. Транспорт вновь синтезированных цепей рецептора на клеточную поверхность происходит только после того, как они объединятся [100]. Опыты с использованием сшивок близлежащих группировок [54'1] и анализ специфичности индивидуальных интегринов
9639
показывает, что активный центр, связывающий эти лиганды, образуется при участии определенных последовательностей обеих субъединиц (76, 533].
Цитоплазматические домены интегринов взаимодействуют с оелками системы цитоскелета, и эти взаимодействия являются пусковым механизмами в перестройках цитоскелета, ведущих к распластыванию и (или) миграции клеток [294] Белками цитоскелета, непосредственно взаимодействующими с цитоплазматическим доменом интегринов, являются, вероятно, талин [279] и(или) фибулин [14] .
. К настоящему времени [532] идентифицировано 11 различных а —субъединиц интегринов и 7/3—субъединиц, которые могут комбинироваться по определенным законам. Например, —субъединица может быть ассоциирована с а 1, а 2, а 3, а 4, а 5, а 6 и ау-субъединицами, в то время как субъе-дицины /3^, у8рэ и /35 своими партнерами имеют только одну определенную а -субъединицу: а 6, а4, av и av, соответственно. /3? субъединица может ассоциироваться либо с «либо с av, в то время как /Зг> субъединица интегринов имеет свой индивидуальный набор партнеров: aj , L и Lx -субьединицы [99, 203, 269, 280, 320, 532]. 11
