Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Банников Г.А. -> "Молекулярные механизмы морфогенеза" -> 35

Молекулярные механизмы морфогенеза - Банников Г.А.

Банников Г.А. Молекулярные механизмы морфогенеза — ВИНИТИ, 1990. — 117 c.
Скачать (прямая ссылка): molekulyarniemehanizmi1990.pdf
Предыдущая << 1 .. 29 30 31 32 33 34 < 35 > 36 37 38 39 40 41 .. 47 >> Следующая

67 кД [238].
Помимо пептидных сайтов взаимодействия ламммша с клеткой, в этих взаимодействиях принимают участи* -
водные остатки на молекуле ламинина. Клеч отыми ^ ц торами этого типа связывания являю юя нов» рхне лактоз ил трансф^ разы [33, 529]. Экси(,рим< .нта./ьны
действия, блокирующие связывание гаяактозилтрансфераз с углеводами ламинина, не препятствует адгезии клеток меланомы В 16, но предотвращают их распластывание на субстрате [529], Показано, что галактозилтрансфераза локализуется на поверхности ламелоподий мигрирующих клеток 1.166]. Сходные результаты получены при исследовании поведения клеток феохромоцитомы РС12 на подложке из ламинина: инициация образования нейритов и их удлинение зависело от взаимодействия галактозилтрансферазы с N -связанными олигосахаридами ламинина. Иммуноцитохимически фермент был локализован на конусе роста нейритов.
2.2.1.2.3. Энтактин
Знтактин представляет собой сульфатированный полипептид с мол. массой 148 кД, связывающийся с ламинином [ 632] ¦ Молекула содержит 1217 аминокислотных остатков,
5% N- и О -связанных углеводов и выглядит при электронной микроскопии как 2 глобулярных домена различной величины, связанные гибким стержнем длиной 17 им [406 J. Меньшая глобула принадлежит С-, а-большая N-концу молекулы [408]. Стержневой домен состоит из пяти ЭФР-подобных повторов, содержащих по 6 цистеинов на повтор, а также содержит триплет Арг-Гли-Асп, и несколько перестановок из тех же аминокислот. Кроме того, в молекуле имеются сайты связывания кальция. Показано, что последовательность Арг-Гли-Асп энтактина участвует в связывании с интегриновыми рецепторами. Последовательности, включающие консенсусы для сульфатирования по тирозину, локализованы исключительно в N -концевом глобулярном домене [406]. Глобулярные домены, особенно N-концевой, содержат несколько сайтов, легко гидролизуемых эндогенными и экзогенными протеазами. Высокая чувствительность энтактина к протеолизу, вероятно, существенна для процессов перестройки базальных мембран [155].
Ламинин и энтактин образуют эквимолярный комплекс с Kd-1-Ю нмоль, связывание которого с матриксом базальной мембраны зависит от кальция [104]. Разрушение комплекса ламинин-энтактин требует применения денатури- о
руюших агентов. По данным электронной микроскопии, под- ^
гвержденными исследованиями по связыванию меченых фраг- с ментов, в образовании комплекса участвуют С -концевой глобулярный фрагмент энтактина и домен Ш В1-цели ламини-
а
на [408, 632]. Комплексообразование увеличивает устойчивость энтактина к протеазам [155].
Энтактин, кроме ламинина, связывается еще и с коллагеном IV, причем сайт связывания с коллагеном также локализован в С -концевом глобулярном домене. -Аффинность энтактина к коллагену слабее, чем к ламинину. Энтактин и комплекс энтактин-ламинин связываются с участками тройной спирали коллагена IV, отстоящими на 80 и 18 нм от С-конца молекулы коллагена. По всей вероятности, главная функция энтактина состоит в опосредовании связывания ла-минина с молекулой коллагена IV [632].
2.2.1.2.4. Гепарансульфатпротеогликаны
Главным протеогликаном всех базальных мембран является высокомолекулярный гепарансульфатпротеогликан низкой плавучей плотности [632]. Сердцевинный белок этого про-теогликана имеет мол. массу около 500 кД. К одному из концов этого стержневого мультидоменного белка длиной около 80 нм присоединены 3 цепи гепарансульфата, увеличивающие мол. массу молекулы до 620-720 кД. Сердцевинный белок, по-видимому, состоит из 6 глобулярных доменов, разделенных короткими промежутками [363]. Анализ последовательности имеющихся к настоящему времени кДНК-вых клонов (составляющих около 40% от обшей длины молекулы} выявил существование двух различных типов структур [449]. Структура первого типа представлена глобулярными доменами, соединенными ЭФР-подобными повторами, подобными таковым же повторам ламинина. Другая структура - это ряд из восьми петель, стабилизированных одной дисульфид-ной связью на петлю-домен, характерный для членов суперсемейства иммуноглобулинов. Белок гепарансульфатпротеогли-кана чувствителен к эндогенному протеолизу [334].
Из базальных мембран различного происхождения был выделен также низкомолекулярный гепарансульфатпротеогликан (130 кД) с высокой плавучей плотностью [632]. Поскольку этот компонент имеет общие антигенные детерминанты с вы сокомолекулярным протеогликаном, предположили, iто пер является продуктом деградации последнего [^6-.]. дь к различия в пептидных картах и способах присоединения • гепарансульфата говорят в пользу того, ч го высоко- ’
комолекулярные протеогликаны базальной мем раны продуктами различных генов [632]. В, базальных мембранах
89
найдены и хондроитинсульфат/(дерматансульфатные ) цепи. К каким сердцевинным белкам присоединены эти углеводы -неизвестно [322].
Закрепление протеогликана в структуре базальной мембраны осуществляется главным образом за счет сердцевинного белка, поскольку молекула не экстрагируется из базальной мембраны при высокой концентрации солей, предотвращающей электростатическое взаимодействие цепей гепараисульфата.
Предыдущая << 1 .. 29 30 31 32 33 34 < 35 > 36 37 38 39 40 41 .. 47 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed