Современная генетика. Том 3 - Айала Ф.
Скачать (прямая ссылка):
7.13. На основании данных по двум реципрокным трехфакторным скрещиваниям
иден-
тифицируют классы двойных рекомбинантов и выводят взаимное расположение
трех генов. На основании тех же данных рассчитывают и расстояния по карте
л - со1 (2,6 ед. карты) и со, - mi (5,4 ед. карты). В оставшихся двух
скрещиваниях рассматривают mi как неселек-тируемый маркер, а фенотип
"мутные бляшки" ("+ + "), как тип селектируемых рекомбинантов. Значения
частот рекомбинации в этих скрещиваниях следует умножать на 2, поскольку
не учитываются реципрокные рекомбинанты (ссох).
1.4 0.3 5.4
s - со_- с - со.----------------------------mi
L_ Г 2.6 '
7.15. Фаг X имеет больше общих генов с лямбдоидным фагом 434, чем с
фагами 21 и 82, при этом он более схож с фагом 21, чем с фагом 82. Ни
один из трех упомянутых лямбдоидных фагов не несет гена Хс1. Ген Хс1
обеспечивает функцию (кодирует репрессор) поддержания лизогенного
состояния и обусловливает иммунность клетки к суперинфекции фагом X, но
не фагом 434. Таким образом, сайт(ы) действия репрессора cl должны
располагаться между генами ell и сШ, в области, где отсутствует гомология
между последовательностями ДНК фагов X и 434. Эта область называется
областью иммунитета.
7.17. Порядок маркеров: imm-2001-
canl-42-0.
7.19. Фаг, инфицирующий Е. coli С" но дающий потомство, неспособное
реинфициро-вать Е. coli С" должен содержать ДНК дикого типа, заключенную
в капсид фага НаНь. Это явление носит название смешения фенотипов,
поскольку в ходе инфекции фагами с двумя различными генотипами, ДНК
одного из них может инкапсулироваться в белковую оболочку, синтез которой
направлялся ДНК другого генотипа. Формирующиеся таким образом фаговые
частицы будут обнаруживать фенотипическое проявление, нехарактерное для
их истинного генотипа.
Приложение 2. Ответы на задачи
281
Глава 8
8.1. D А С
\ /
В ?
8.3. D-В-Д-" 8.5.
8.7. Искомая мутация локализуется между генами str и his. Работая со
штаммом АВ313 и используя стрептомицин для селекции против родительских
клеток Hfr, студент создал условия, в которых любая мерозигота,
получившая аллель дикого типа по интересующей его мутации, получит
одновременно и тесно сцепленный с ним аллель str*. Поэтому большинство
рекомбинантов, несущих аллель дикого типа по искомой мутации, окажутся
стрептомицин-чувствительными и погибнут на содержащей стрептомицин
селективной среде. По совету преподавателя, удалив стрептомицин из
селективной среды, студент для селекции против родительских клеток Hfr
может использовать потребность в аденине (Ade "). Для этих же целей он
может воспользоваться также средой с аденином, применяя в качестве
селектирующего агента фаг Т1.
8.9. 1) Клетки F' в отличие от клеток F~ чувствительны к инфекции РНК-
содержащи-ми фагами. 2) Клетки F' легко передают селектируемые маркеры
другим штаммам F-,
в то время как клетки F подобной способностью не обладают.
8.11.
Селектируемые Селективная среда
маркеры
thr* Минимальная среда с глюко-
зой + лейцин leu* Минимальная среда с глюко-
зой + треонин thr* leu* Минимальная среда с глюкозой ага* Минимальная
среда с арабино-
зой + лейцин + треонин Порядок: thr агаЗ leu
8.13. Для появления стабильного транс-дуктанта должны произойти два
события: ДНК агаЗ * должна проникнуть в клетку и вступить в рекомбинацию
с клеточным геномом. Мельчайшие колонии возникают в результате абортивной
трансдукции, при которой ДНК агаЗ * проникает в клетку, но не
рекомбинирует с клеточным геномом. В результате ген агаЗ* не
реплицируется и не передается всем дочерним клеткам. Образование таких
микроколоний становится возможным за счет экспрессии полученного гена
агаЗ *, обеспечивающей клетку, несущую этот ген, ферментом, необходимым
для утилизации арабинозы в качестве источника углерода. Такая клетка
может расти и подвергаться делению с образованием дочерних клеток, рост
которых останавливается из-за отсутствия у них гена агаЗ *.
8.15. В этих экспериментах не осуществляется целенаправленное прерывание
конъюгации. При спонтанном прерывании возникает градиент переноса
маркеров с убыванием частоты переноса по мере удаления от точки начала
переноса.
Порядок:
thr* leu* gal* 82 к 434 381 21 424
Глава 9 9-3-
Карта по Smal
9л- З4 15 *~6 1 2* 7 фрагменты
С----------------------------- D-----5-- .
неполной
Bgl II Hga I Sma I д- рестрикции
282
Приложение 2. Ответы на задачи
9.5. Образовавшийся смешанный сайт ВатШ/BglU (GGATCT) не содержит
последовательности, которая могла бы быть узнана какой-либо из рестриктаз
Ват HI или Bgl II. В то же время рестриктаза Mbo I может расщепить ДНК по
этому сайту, поскольку узнаваемая ею последовательность короче, чем
последовательности, узнаваемые Ват HI или Bgl II.
9.7.
Hha I
Hha I
9.9. С использованием полинуклеотид-киназы осуществляют перенос 32Р от
[у = = 32Р] АТР к 5'-концу интактной молекулы ДНК фага X. Затем
необходимо провести полное расщепление меченой ДНК рестриктазой Hin dill.
