Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Айала Ф. -> "Современная генетика. Том 1." -> 85

Современная генетика. Том 1. - Айала Ф.

Айала Ф., Кайгер Дж. Современная генетика. Том 1. — М.: Мир, 1987. — 295 c.
Скачать (прямая ссылка): sovremennayagenetika1987.djvu
Предыдущая << 1 .. 79 80 81 82 83 84 < 85 > 86 87 88 89 90 91 .. 113 >> Следующая

Бактериальный геном
229
глюкозы или других простых сахаров, а также способностью расщеплять
другие типы сложных молекул, например, аминокислот или жирных кислот.
Такое расщепление сложных молекул называется катаболизмом. Мутации,
затрагивающие катаболические функции, ограничивают типы молекул, которые
могут служить источниками углерода для соответствующего мутанта.
Например, мутант с фенотипом Lac" -не способен к росту в условиях, когда
единственным источником углерода служит лактоза (молочный сахар), тогда
как дикий тип Lac + способен утилизировать лактозу. Фенотип Lac ~ может
возникать в результате мутаций в генах lacZ+ и lacY+, обусловливающих
появление мутантных генотипов lacZ и lacY, соответственно. Заметим, что
для того, чтобы определить, способен ли данный штамм к росту на
определенной среде, надо знать, затрагивает ли соответствующая мутация
анаболическую или катаболическую функцию. Например, мутант Met "
нуждается для нормального роста в среде, обогащенной метионином, тогда
как мутант Lac " не может расти на среде, содержащей в качестве источника
углерода только лактозу и нуждается в другом источнике углерода. Оба типа
мутаций служат удобными условно летальными генетическими маркерами.
Температурочувствительные мутации широко используются и в генетике
бактерий. Необходимые для нормального существования (существенные) гены,
которые невозможно выявить посредством ауксо-трофных мутаций, обычно
могут быть идентифицированы с помощью температурочувствительных мутаций.
Примерами жизненноважных функций могут служить функции, связанные с
синтезом белков или нуклеиновых кислот из молекул-предшественников -
аминокислот или нуклеотидов (подробное обсуждение мутаций, затрагивающих
синтез ДНК, содержится в главе 13).
Существуют также мутации бактерий, вызывающие устойчивость к определенным
бактериофагам или антибиотикам. Первые из них обычно влияют на
способность фага прикрепляться к бактерии-мутанту, поскольку у мутанта
несколько изменены белки мембраны. Устойчивые (резистентные) мутанты
легко отбираются при посеве клеток, подвергнутых действию какого-либо
мутагена, непосредственно на среду, содержащую данный фаг или антибиотик:
выросшая бактериальная колония и есть мутант. Мутации, вызывающие
устойчивость к определенным антибиотикам, хорошо известны, поскольку они
создают серьезную проблему для медицины и здравоохранения. Фенотип
устойчивости к фагу Т1, обозначается символом T1R (фенотип
чувствительности к фагу-Т11'). Соответственно, устойчивость и
чувствительность к антибиотику стрептомицину обозначают как StrR и Strs.
Ген чувствительности к фагу Т1 обозначается как ton, (ton+ -синоним Tls;
ген чувствительности к стрептомицину-str (str+ синоним strs).
Мутантные штаммы легко получить при действии на бактерии дикого типа
мутагенных факторов, например, рентгеновских или ультрафиолетовых лучей,
или химических мутагенов. Обработанную культуру высевают на пермиссивную
среду. Например, если нужно получить ауксотроф по определенной
аминокислоте, то сперва подвергнутые действию мутагена бактерии высевают
на среду, содержащую все 20 аминокислот. После появления колоний, их
перепечатывают на чашку с минимальной средой, для того чтобы определить,
какие из этих колоний ауксотрофные (рис. 8.1). Затем каждая из
ауксотрофных колоний с пер-
230
Организация и передача генетического материала
Рис. 8.1. Метод перепечатывания колоний, при котором бактерии быстро
переносят j с одной питательной среды на другую. На рисунке схематически
изображена последовательность операций, позволяющая идентифицировать
ауксо-трофные мутанты, способные к росту на исходной обогащенной среде,
но не образующие колоний на новой (минимальной) среде. [Stent G. S.,
Calendar R., (1978) Mol. Genetics,
2nd ed., W. H. Freeman, San Francisco.]
X j: : .
-V Vi
Прижимают к поверхности чашки Петри с выросшими колониями
Исходная чашка (полная среда)
Чашка-реплика (минимальная среда)
миссивной среды "перепечатывается" на 20 чашек Петри с минимальным
агаром, к которому добавлено по одной аминокислоте. При этом выясняется,
присутствие какой именно аминокислоты необходимо для роста мутанта. Для
отбора температурочувствительных мутантов обработанные мутагеном клетки
высевают на чашку и инкубируют при 30°С. Выросшие колонии перепечатывают
и чашку-реплику инкубируют при 42°С. Колонии, растущие при пермиссивной
температуре 30°С, но не способные к росту при 42°С, образованы ts-
мутантами. Подвергая полученные мутанты повторному (и последующему)
воздействию мутагена и производя соответствующий отбор, можно получать
штаммы, содержащие по нескольку мутаций.
Генетические элементы Е coli
Клетки Е. coli могут содержать по нескольку различных генетических
элементов, каждый из которых способен к саморепликации. Хромосома
бактерии-это длинная кольцевая молекула ДНК с мол. массой примерно в 2,5-
109 дальтон, что соответствует 3,2 х 106 н.п. Как уже обсужда-
Предыдущая << 1 .. 79 80 81 82 83 84 < 85 > 86 87 88 89 90 91 .. 113 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed