Современная генетика. Том 1. - Айала Ф.
Скачать (прямая ссылка):
относительно друга, и нет необходимости определять их положение
относительно мутаций, локализованных в других участках карты.
Построенная таким способом (рис. 6.12) карта тонкой структуры спонтанных
гП-мутаций показывает, что эти мутации более или менее случайно
разбросаны по генетической карте. Исключение составляют две "точки",
представляющие собой высокомутабильные участки ДНК.
6. Тонкая структура гена
171
¦ -V
1304 ; EW66
386 '
168 =
1993
1299
||': ; 1 ¦ ¦ i : i 1 1 i ' i ; ; | ' ! ! s ¦ s | : ¦ 5 h ' i ; i , ! ; i
- : i ! ! . ' ! : 1 1 i i ' ; : : i ' : 1 : ,
1519
МЗЗЙЧ ""ЯЙЧЧЙЙЙЙЯЙЙЙ 5SS Si 5^ ssaa'l.
• 1 1 : : ! ; I i -lS3 i^a. ¦u 43! и : : :
-/I-цистрон-
-><-------/1-цистрон
Рис. 6.10. Делеции, концы которых делят область rll на 47 сегментов. Семь
больших делеций, изображенных в верхней части рисунка, позволяют разбить
область на семь частей. Остальные делеции делят каждую из
этих частей на более мелкие участки. Концы, обозначенные вырезом, не
использовались при определении границ участков. Указаны границы цистронов
А и В. [Benzer S. (1961). Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 47, 403.]
Эта карта демонстрирует важный факт, что г//-мутации, приводящие к утрате
функции, т. е. к одному и тому же фенотипу, могут происходить во многих
различных точках цистрона. Ясно, что число возможных аллелей rll очень
велико. На реальность более глубокой дифференциации тонкой генетической
структуры указывает тот факт, что спонтанные точечные мутации,
расположенные в разных частях карты, ревертируют к дикому типу с
различными и характерными для каждой мутации частотами. Следовательно,
природа этих различных спонтанных мутаций, обусловливающих один и тот же
фенотип, не может быть одинаковой. Сравнение карты спонтанных мутаций с
аналогичной картой, построенной для мутаций, индуцированных специальными
химическими мутагенами, показывает, что участки повышенной мутабильности
в этих картах расположены в разных местах, хотя и специфичны для каждой
из них (рис. 6.12). Это в свою очередь свидетельствует о существовании
еще более тонкой структуры генетического материала. При картировании
мутаций, полученных всеми возможными способами, установлена
принадлежность 200 мутаций гПД-цистрону
172
Организация и передача генетического материала
^ ?
^ 'N ^ СО b- CQ ?
а- с- ^ g
А1 [01 11 11 lj
Al [о 0 1 1 1 1 l|
G G
О ¦"О 5
4J
Ala 1 1
Albl 0 1
Alb2 0 0
G "1 G 00 '¦o 00 G <¦*"> On On in On G PT15. H88
A2a 0 1 1
A2b 0 0 1 1 1
A2c 0 0 0 1 1
A2d 0 1 0 1
j A2f 0 1 0 0 1 1
A2f 0 1 1 0
A2g 1 1 1 0 1 1
A2hl 1 1 1 0 0 1
A2h2 1 1 1 0 0 0
A2h3 1 1 I 0 0 0 0
Л5 0 0 0 0 0 1 1|
|о 0 0 1 1 1 l| <
Л4 [О О О О 1 1 l[ <
Ab |0 О О О О 0 l| <
В |"6 О О 0 0 0 0| <
К * ° ? ООШЛ
^ rvj О
A3a-d 0 1 1 1
A3e 1 1 1 1
A3f 1 0 1 1
} 1 0 0 1
A3h 1 ООО
A3i 1 0 1 0
со °0 G <N
CNJ ГГ) CCj
¦ Си
Ada 0 1 1 1
A4b 1 1 1 1
A4c 1 0 1 1
A4d 1 0 0 1
A4e 1 0 0 0
A4f 1 1 0 0
1 1 1 0
r-O On On 1605 1589 PB230
A5a 0 1 1 1
A5b 0 0 1 1
A5cl 0 0 0 1
A5c2 1 0 0 1
Abd 1 ООО
H88 ? '*
A6al 0 1 1
A6a2 0 0 1
A6b 0 0 0
Abe 1 0 0
Abd 1 0 1
1231 lb05 1589 G o^ : 1299 o, сс к ~-
f Bi 0 0 0 1 1 1 1
B2 0 0 0 0 1 1 1 7
B3 0 0 1 0 1 1 1
B4 1 0 1 1 1 7 1
B5 1 0 1 0 1 1 1
< B6 1 1 1 0 1 1 1
B7 1 1 1 1 1 1 1
B8 1 1 1 0 1 1
B9a 1 1 1 1 0 0 1
B9b 1 1 1 ООО
BIO 1 1 1 1 0
6. Тонкая структура гена
173
¦ 4 -т
1272 1241
1011
(сегмент А1) •
DAP56 (сегмент А2) •
G171 "; , (сегментЛЗ)^-*".
F16 м.,
(сегмент/14.),*
548 ? ,
(сегменТ/45) I
G16 (сегмента 6)
326
(сегмент В)
Контроль,
J3 РТ1 РВ242 А105 638 Контроль
^ I
I / I
Рис. 6.11. А. Два последовательных этапа локализации новой r/3-мутации в
одном из 47 участков карты /¦//-области. Прежде всего мутант скрещивают
со штаммами, несущими делеции "большой семерки", изображенной на рис.
6.10. Число 0 в горизонтальных прямоугольниках слева означает отсутствие
выявленных рекомбинантов, число 1-присутствие рекомбинантов. Число нулей
определяет номер крупной части области, к которой принадлежит мутант.
Затем мутант скрещивают с каждой из делеций, разбивающих большой сегмент,
в которой он локализован, на более мелкие участки. Результаты, получаемые
таким образом для различных мутантов, представлены в прямоугольниках,
приведенных справа. Число нулей в строке в этом случае определяет более
мелкий участок, которому принадлежит мутация. Б. Иллюстрация результатов,
полученных при использовании метода быстрого выявления рекомбинантов
дикого типа, предложенного Бензером. В начале опыта 0,5 мл культуры
Е. coli В (пермиссивного хозяина) заражают фагами двух линий: содержащей
стандартную делецию и исследуемую мутацию. На каждую клетку при этом
должно приходиться примерно по пять фаговых частиц. После того как время,
необходимое для адсорбции фага пройдет, капли культуры наносят на полоски
стерильной бумаги и раскладывают эти полоски на поверхности чашек,
