Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Ашмарин И.П. -> "Молекулярная биология, избранные разделы" -> 16

Молекулярная биология, избранные разделы - Ашмарин И.П.

Ашмарин И.П. Молекулярная биология, избранные разделы — М.: Медицина, 1974. — 360 c.
Скачать (прямая ссылка): molekulyarnayabiologiya1974.djvu
Предыдущая << 1 .. 10 11 12 13 14 15 < 16 > 17 18 19 20 21 22 .. 164 >> Следующая

зе
никновение в их главные функции — хранение и передачу наследственной информации — требует именно установления первичной структуры, сколь бы сложной эта задача ни была.
В настоящее время разработана целая система методов раскрытия первичной структуры нуклеиновых кислот. В основе ее лежат, во-первых, закономерности гидролиза полинуклеотидных цепочек нуклеазами или чисто химические приемы и, во-вторых, способы разделения фрагментов нуклеиновых кислот и мононуклеотидов. Закономерности гидролиза нуклеиновых кислот рассматриваются в главе II. Что касается методов разделения продуктов гидролиза, то описание их выходит за рамки задач настоящего руководства. Заметим только, что сейчас мы находимся накануне создания соответствующих достаточно практичных автоматических устройств.
Естественно, первые успехи в раскрытии первичной структуры связаны с РНК, наименьшими по размерам,— транспортными. В настоящее время перечень тРНК с полностью установленной последовательностью нуклеотидов весьма значителен. Ряд примеров приведен далее в главе IV (см. рис. 15,6, в, г).
Кроме того, раскрыта первичная структура наименьшей из ри-босомальных РНК — 5 S и ряда фрагментов других рРНК. Мы находимся также на пороге полного знания нуклеотидной последовательности РНК простейших колифагов. Важные данные накоплены о первичной структуре концевых фрагментов некоторых мРНК. В тех случаях, когда раскрывается структура тех РНК, которые синтезируются in vivo на матрице ДНК, становится одновременно известной и нуклеотидная последовательность соответствующего цистрона (гена) в силу его комплементарности соответствующей РНК. Равным образом достаточно полное знание аминокислотного кода позволяет в тех случаях, когда раскрыта первичная структура белка, определять довольно значительную часть нуклеотидной последовательности соответствующих мРНК и цистрона (исчерпывающую последовательность таким путем установить нельзя в силу вырожденное™ кода). Все эти достижения не должны, однако, создавать впечатления, что близок момент установления полной нуклеотидной последовательности представителей всех основных классов и семейств нуклеиновых кислот. Размеры многих из них столь значительны, что предстоит чрезвычайно длительная и кропотливая работа.
ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ
Физико-химические свойства нуклеиновых кислот весьма гармонично увязываются с особенностями их состава и структуры.
Известна высокая плотность нуклеиновых кислот. Она близка к 1,7 и является естественным следствием значительного содержания фосфора. Тонкие вариации плотности двуцепочечных ДНК
определяются молярной долей Г+Ц и могут быть достаточно точно установлены по формуле:
р26 = 1,658 + 0,1 [ГЦ].
где ра — плавучая плотность при 25° С, а [ГЦ] — молярная доля Г+Ц.
В соответствии с этим плотность природных ДНК находится в пределах 1,69—1,73. Не следует, однако, связывать плотность ДНК с особенно интенсивным взаимодействием оснований в ГЦ-пар ах. Достаточно указать, что денатурированная ДНК, в которой интимная связь между цепями нарушена, обладает даже несколько большей плотностью, чем нативная, 1,71—1,75, причем опять-таки плотность находится в линейной зависимости от молярной доли Г+Ц. Известное, хотя и незначительное, влияние на плотность ДНК оказывает ее третичная структура.
Седиментационные характеристики нуклеиновых кислот отражают чрезвычайно высокий молекулярный вес многих из них и некоторые особенности вторичной и третичной структур. Знание зависимости между коэффициентом седиментации и молекулярным весом разных типов нуклеиновых кислот необходимо либо для определения последнего, либо для комплексной оценки конформации, либо, наконец, для понимания данных литературы, в которых приводятся обычно седиментометрические характеристики в единицах Сведберга (5), получаемые при ультрацентрифугировании. Для первых двух целей необходимы точные зависимости, для третьей — удобнее легко запоминающиеся приближенные.
Одна из наиболее точных зависимостей выражается формулой:
0,445 lgЩ = 1,819 + lg[(S - 2,7).
Довольно объективной и хорошо запоминающейся округленной зависимостью может служить: AlsdOOO S3.
Легко убедиться, что использование этой формулы при быстрой оценке литературных данных дает отклонения от точных значений лишь до 20—25%, если молекулярные веса ДНК находятся в пределах 1—100 • 10е.
Для одноцепочечных РНК точная зависимость — 0,561gAf= = lg5ao+2,01; приближенная — M“2000SZ.
Сопоставляя зависимости для двуцепочечных ДНК и одноцепочечных РНК, следует обратить внимание на значительность влияния вторичной и третичной структур. Показатель степени в приближенных выражениях меняется почти на единицу.
Вязкость растворов нуклеиновых кислот является особенно ценным показателем для характеристики двуцепочечных ДНК. Упругие нитевидные молекулы большой длины определяют, в общем, очень высокую вязкость, а также такую ее зависимость от молекулярного веса, котррая является весьма удобной, для объективных одинок последнего. Так, например, относительная вязкость 0,01 % р#Ст?9Р0Р;ДНК С молекулярным весом 5—10*10® близка к 1,5. Такс^, же приблизительно вязкость в пять раз более концентриро-
Предыдущая << 1 .. 10 11 12 13 14 15 < 16 > 17 18 19 20 21 22 .. 164 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed