Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Артюхов В.Г. -> "Биологические мембраны: структурная организация, функции, модификация физико-химическими агентами" -> 63

Биологические мембраны: структурная организация, функции, модификация физико-химическими агентами - Артюхов В.Г.

Артюхов В.Г., Наквасина М.А. Биологические мембраны: структурная организация, функции, модификация физико-химическими агентами — Воронеж, 2000. — 296 c.
ISBN 5-7455-1162-1
Скачать (прямая ссылка): biologicheskiemembrani2000.pdf
Предыдущая << 1 .. 57 58 59 60 61 62 < 63 > 64 65 66 67 68 69 .. 113 >> Следующая

Аналогичные результаты были получены и при исследовании функциональной активности АХЭ мембран эритроцитов, модифицированных фосфолипазой, в нативном состоянии и после УФ-облучения в дозе 3,0 кДж/м2 (рис. 41). Воздействие УФ-излучения в дозе 3,0 кДж/м2 на эритроцитарные мембраны, обработанные фосфолипазой D, приводит к практически полному ингибированию фермента. Следовательно, и в этом случае модификация липидной фазы мембран вызывает инактивацию АХЭ — эффект, противоположный изменениям активности белка, регистрируемым при облучении интактных мембран.
На рис. 42 показаны изменения ферментативной активности мембраносвязанной АХЭ после обработки мембран фосфолипазой D и воздействия УФ-света в дозе 4,5 кДж/м2. Видно, что в результате УФ-облучения модифицированных мембран фоточувствительность фермента изменяется незначительно. Активность АХЭ в интактных мембранах после облучения снижается на 44 %, а в обработанных фосфолипазой — на 52 % по отношению к контрольному образцу.
А, %
100
80
60
40
20
0
Рис. 41. Каталитическая активность ацетилхолинэстеразы эритроцитарных мембран, модифицированных фосфолипазой D, после УФ-облучения в дозе 3,0 кДж/м2: 1 — контроль (нативный фермент); 2 — УФ-облучение; 3 — модификация фосфолипазой D; 4 — УФ-облучение модифицированных фосфолипазой D мембран
100
ВО
60
40 20 0
Рис. 42. Функциональная активность ацетилхолинэстеразы эритроцитарных мембран, модифицированных фосфолипазой D, после УФ-об-лучения в дозе 4,5 кДж/м2: 2 — контроль (нативный фермент); 2 — УФ-облучение; 3 — модификация фосфолипазой D; 4 — УФ-облуче-ние модифицированных фосфолипазой D мембран
А, %
Рис. 43. Фоточувствительность ацетилхолинэстеразы интактных и модифицированных фосфолипазой D эритроцитарных мембран: 1 — ин-тактные мембраны; 2 — модифицированные мембраны
На рис. 43 представлены данные, характеризующие зависимость функциональных свойств мембранной АХЭ от дозы облучения для интактных и обработанных фосфолипазой D эритроцитарных мембран. Полученные результаты свидетельствуют о том, что УФ-чувствительность мембраносвязанной ацетилхолинэстеразы существенным образом зависит от структурного состояния фосфолипидных компонентов биомембраны.
Фосфолипаза D катализирует отщепление гидрофильного спирта от фосфоглицеридов и сфингомиелинов. В результате отщепления полярных головок от молекул фосфолипидов могут нарушаться электростатические взаимодействия фермента с молекулами окружающих его фосфолипидов, в частности, кислого липида — фосфатидилсерина, являющегося, по-видимому, аннулярным липидом для ацетилхолинэстеразы. Фосфатидилсерин, а также фосфатидилэтаноламин локализованы преимущественно во внутренней половине липидного бислоя. Можно предположить, что гидролиз фосфолипидов и фосфатидилсерина не вызывает конформационных изменений молекул фермента, затрагивающих его активный центр, поэтому активность АХЭ при обработке мембран фосфолипазой практически не изменяется. Необходимо отметить, что обработка мембран фосфолипазой индуцирует изменения упаковки и подвижности фосфолипидов, вязкости и асимметрии липидной фазы, белок-липидных взаимодействий. Воздействие УФ-излучения на модифицированные мембраны приводит к нарушениям в функционировании мембраносвязанной АХЭ, отличающимся по направленности от таковых при облучении интактных мембран. Эти нарушения являются результатом изменения конформационного состояния продуктов гидролиза фосфолипидов в мембране при воздействии УФ-света.
Е. А. Лапшина, И. Б. Заводник (1995) установили, что взаимодействие свободных жирных кислот (пальмитиновой, лаури-новой, каприловой) и их производных с эритроцитарной мембраной вызывает ингибирование АХЭ цельных эритроцитов и изолированных эритроцитарных мембран. Авторы считают, что воздействие жирных кислот и их производных на мембрану приводит к изменению белок-липидных контактов, возмущению нативного липидного окружения фермента, нарушению максимальной комплементарности между гидрофобной поверхностью мембранных белков и их липидным окружением. Обработка эритро-
цитов малоновым диальдегидом, способным модифицировать амино- и сульфгидрильные группы белков, образуя ряд стабильных и нестабильных аддуктов, внутри- и межбелковые сшивки, приводила к ингибированию активности АХЭ по бесконкурентному механизму.
Таким образом, выявляется различная УФ-чувствительность АХЭ интактных и модифицированных фосфолипазой D эритроцитарных мембран, обусловленная нарушением нативной конформации фермента вследствие воздействия на него фотохимических продуктов гидролиза фосфолипидов.
Большой интерес в настоящее время представляют вопросы, касающиеся всестороннего изучения процессов фотомодификации отдельных компонентов биомембран в присутствии химических соединений с различным механизмом действия, способных инициировать, усиливать или ослаблять фотохимические реакции. Одним из факторов системы низкомолекулярных регуляторов, выполняющих роль инициаторов, катализаторов, ингибиторов и влияющих на стадию инициирования, разветвления и обрыва цепи свободнорадикальных реакций, являются низкомолекулярные компоненты антиоксидантной системы (см. раздел 3.3).
Предыдущая << 1 .. 57 58 59 60 61 62 < 63 > 64 65 66 67 68 69 .. 113 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed