Введение в методы микроскопического исследования - Аппельт Г.
Скачать (прямая ссылка):
Вместо обычно употребляемых конденсоров применяют так называемые конденсоры типа очкового стекла.
Для микрофотографических целей особенно выгодны искусно отъюстированные, вмонтированные- внутрь осветительные устройства, так как они осуществлены в камерах-микроскопах и многих других современных приборах.
18. 4. 2. Установка микроскопического изображения при сложном микроскопе
а) Микрофотография при освещении проходящим светом по методу светлого поля.
1. Первым условием для получения хороших микрофотографических снимков является безукоризненное освещение. К этому мы относим также правильное использование конденсоров. Для объективов с апертурой примерно от
0,40 и выше используют весь конденсор, а для объективов с апертурой приблизительно 0,15—0,40 — лишь нижнюю часть. При употреблении объективов с апертурой меньшей
0,15 (объективы для обзорных изображений) применяют подходящие конденсоры типа очкового стекла.
Съемку с небольшими увеличениями (ниже 60) без окуляра надо производить по возможности лишь с применением микрофотографических объективов.
2. Препарат устанавливают только по правилам освещения по Кёлеру. При установке целесообразно ввести на пути световых лучей дымчатое стекло, так как свет, применяющийся для микрофотографических целей, слишком ярок для визуального наблюдения.
При необходимости проведения специальных методов исследования (фазовый контраст, люминесценция и т. д.) установка изображения должна выполняться способами, которые требуются соответствующими специальными методами и описаны в посвященных им разделах этой книги.
3. Устраняют недостатки сферической коррекции микро-фотографической системы путем удлинения тубуса или вытягивания и закрепления окуляра (см. раздел 18.1). Фотоокуляры Цейсс-Винкеля устанавливают по растяжению камеры. В проекционных окулярах к «Мифлексу» Народного предприятия Карл Цейсс в Йене нарушения сферической коррекции устранены.
4. Устанавливают микрофотографический аппарат. При камерах с мехом подбирают растяжение камеры, необходимое для получения желаемого масштаба увеличения.
5. Вставляют фильтры.
6. Объект устанавливают на резкость с помощью телескопического визира, матового стекла или прозрачного стекла. Необходимые для съемки фильтры должны быть вставлены до этого, так как они влияют на установку.
Установку на резкость выполняют макро- и микрометрическими винтами микроскопа. Зерно матового стекла часто бывает слишком крупным; но если смазать стекло вазелином, то оно будет меньше чувствоваться. Лучше проводить точную установку на прозрачном стекле с крестом нитей при наблюдении с помощью лупы.
Часто матовые стекла снабжены прозрачным участком с крестом нитей. Микроскопическое изображение и крест должны одновременно выглядеть резкими. Переводят глаз в разные боковые положения и наблюдают при этом эа сдвигом креста и микроскопического изображения' друг относительно друга (параллакс). ^
Тонкие передвижения микроскопа нужно продолжать до тех пор, пока не будет достигнуто положение, при котором пропадает описанный параллаксический сдвиг. Крест должен быть установлен в микроскопическом изображении. Этим достигается установка на резкость.
б) Микрофотография при освещении проходящим светом по методу темного поля.
1. Установка изображения в темном поле при визуальном наблюдении, как это описано в главе 6, особенно в разделе 6.3.
2. Устранение нарушений сферической коррекции микрофотографической системы так же, как это описано в разделе а.
3. Устанавливают фотоаппарат так же, как указано в разделе а.
4. Насаживают фильтры, если они вообще необходимы.
5. Устанавливают на резкость, как это описано в разделе д:
в)* При микрофотографии при освещении падающим светом по методам светлого и темного полей установка микроскопического изображения в принципе не отличается от таковой при микрофотографии в проходящем свете.
Визуальную установку производят, руководствуясь оборудованием, применяющимся для микроскопии в падающем свете, как это описано в главе 7.
18.4.3. Установка микрофотографического изображения при работе с простым микроскопом
а) М икрофотография при освещении проходящим светом по методу светлого поля.
1. Так же как и при сложном микроскопе, для получения хорошего освещения необходимы соответствующие конденсоры.
Микрофотографические объективы имеют различные фокусные расстояния. Они нуждаются в конденсорах типа очкового стекла, которые изготовляются для того, чтобы освещать поля зрения различной величины. Поэтому для каждой микрофотографической системы должен быть подобран правильный конденсор типа очкового стекла.
Микрофотографические объективы с коротким фокусным расстоянием и соответственно большим увеличением, большей частью ввинчиваются в револьвер микроскопа. В противоположность этому длиннофокусные микрофотографические объективы с небольшим увеличением большей частью пристраивают к камере, а микроскоп не используют. Но тогда для освещения в преходящем свете необходим особый штатив. Поэтому и изготовляется сконструированный специально для этих целей макро-диаштатив (см. рис. 351, 352 и 354).
