Введение в методы микроскопического исследования - Аппельт Г.
Скачать (прямая ссылка):
При вертикально падающем свете
5,50
1,84
0,92
0,62
0,46
0,38
При наиболее косо падающем свете
2,75
0,92
0,46
0,31
0,23
0,19
2 Аппельт
17
Рис. 4. Влияние апертуры объектива на разрешающую способность. Изображения шлифов металлов (по снимкам Народного предприятия Карл Цейсс в Йене).
а — масштаб изображения 200:1 с последующим двукратным увеличением. Апохро мат 15, А 0,30 ; б — масштаб изображения 500 :1 с последующим двукратным увеличением. Фрагмент микрофотографии а. Пример бесполезного увеличения Апохромат 15, А 0,30; в — то же изображение, что и на микрофотографии б, но с апохроматом 30, А 0,65. В отличие от микрофогографии^б структуры разрешены.,
До сих пор мы говорили только о разрешающей способности микроскопа, теперь же пойдет речь об увеличении.
Как было показано в разделе 1. 1 главы 1, для возникновения изображения на сетчатке световые лучи должны попасть в глаз под углом зрения, который стягивает дугу от 2 до 4 м'инут. Структура препарата, разрешаемая объективом, может быть увеличена окуляром лишь настолько, что-—-бы она просматривалась под тем же углом, стягивающим дугу величиной от 2 до 4 минут. Это — полезное увеличение. Оно превышает А объектива в 500—1000 раз.
Например, для объектива с А = 0,65 полезное увеличение_________
составляет 325—650 раз. С его помощью можно различать все структуры, разрешаемые данным объективом. Какие бы сильные окуляры ни применялись, более тонких деталей структуры различить не удается. Большие увеличения, достигаемые таким образом, практически не имеют значения. Для них имеется специальное название — бесполезные увеличения. Если же значительно превысить верхнюю границу полезного увеличения, то на контурах деталей объекта появляются вследствие явлений дифракции световые окаймления, которые не заметны или мало заметны в пределах полезного увеличения. Они делают изображение неясным и могут даже приводить к оптическим ошибкам. Бесполезные увеличения могут принести пользу | лишь при подсчете мельчайших частичек в поле зрения,
I если при этом не требуется рассмотрение их структуры.
I Предельное полезное увеличение в обычно используемых
микроскопах достигает 1400Х. Под увеличением микроскопа понимается всегда линейное увеличение.
Глава 2
ОСНОВНЫЕ СВЕДЕНИЯ ОБ ОБЪЕКТИВЕ И ОКУЛЯРЕ
2.1. УСТРОЙСТВО объективов
В предыдущем разделе нами были рассмотрены законы оптики. Теперь мы оставим в стороне теорию и начнем описание особенностей строения микроскопа, его увеличительной оптики. Каждый объектив состоит из ряда линз, которые изготовляются из крона, флинта, плавикового шпата и кварца
и искусно вставляются в металлическую трубку — оправу.
При внешнем осмотре объектива мы видим линзу, обращенную к препарату, или фронтальную линзу, наружная поверхность которой в большинстве случаев плоская. Заднюю линзу, обращенную к окуляру, можно увидеть только в тубус или при вывинчивании объектива. Она значительно больше фронтальной линзы.
Рис. 5. Зеркальный микроскоп фирмы Бекк в Лондоне. Насадочная фотокамера без труда обеспечивает получение фотоснимков (пленьа 35 мм, 40 снимков). Над объективом имеется устройство, с помощью которого свет под углом 45° направляется в спектрограф. Под столиком микроскопа—микрометрический винт для перемещения по вертикали.
Некоторые объективы снабжены коррекционными кольцами, с помощью которых устанавливается одинаковая резкость изображения при разной толщине покровного стекла, а также изменение увеличения.
Иногда в объектив с масляной иммерсией бывает вставлена ирисовая диафрагма, которая может находиться также в специальной оправе между объективом и револьвером (см. рис. 6), благодаря чему такими объективами можно пользоваться при работе с темным полем.
1 Поскольку действующий диаметр линз объектива пропорционален его А, то, сдвигая ирисовую диафрагму,'можно уменьшать А.
Некоторые современные объективы с большим увеличением (сильные сухие системы и особенно объективы с масляной иммерсией) бывают снабжены специальным пружинящим устройством, которое предотвращает раздавливание препарата или фронтальной линзы при неосторожном опускании тубуса, что нередко происходит во время установки на фокус.
За последнее время в ряде стран, особенно в Германии, Советском Союзе и Англии, была сделана попытка заменить линзы объектива системой зеркал, что позволяет устранить некоторые оптические погрешности.
Зеркальные объективы обладают следующими преимуществами:
1) хорошей хроматической коррекцией для всех цветов спектра;
2) хорошей сферической коррекцией благодаря применению зеркал соответствующей формы;
3) большим рабочим расстоянием;
4) возможностью использования для работы с инфракрасной и ультрафиолетовой частями спектра без коррекционных линз.
Недостатком является то, что центральные пучки лучей не участвуют в образовании изображения. Поскольку освещение должно быть отрегулировано очень точно, в качестве конденсора применяется второй зеркальный объектив, снабженный центрирующим устройством.
