Введение в методы микроскопического исследования - Аппельт Г.
Скачать (прямая ссылка):
фирмы, выпускающей прибор, и равной либо 160, либо 170 мм) рассматривают под микроскопом, пользуясь объект-микрометром или камерой для подсчета кровяных элементов, определенный отрезок структуры а и затем измеряют его длину в микроскопическом изображении. Для этой цели изображение должно быть спроецировано, включая искомый отрезок а, так как при рассмотрении в окуляр мнимого изображения такого измерения произвести
нельзя. Изображение с отрезком а, видно в микроскоп так, как если бы оно было удалено от глаза на 250 мм. Поэтому экран нужно установить на расстоянии 250 мм от выходного зрачка. В этом случае проецируемое изображение будет такой же величины, как и мнимое изображение, видимое под микроскопом. В проецируемом изображении измеряют длину отрезка х и вычисляют увеличение по следующей формуле:
Увеличение _ х в проецируемом изображении в мм микроскопа действительная длина х в мм
Если, например, 9 делений объект-микрометра == 0,09 мм и имеют в проецируемом изображении длину 45 мм, то увеличение будет 45 : 0,09 = 500 раз.
Можно обойтись и без проецирования.
О б ъ е к т-м икрометр или какой-нибудь другой измерительный прибор кладут на предметный столик таким образом, чтобы его деления проходили слева направо. Слева от микроскопа складывают стопкой книги или дощечки, на которые на уровне столика помещают линейку на расстоянии 250 мм от глаза. Правым глазом смотрят в тубус, а левым — на линейку. Тогда возникает следующая картина.
При некотором навыке обе шкалы делений можно как бы спроецировать друг на друга и затем определить, скольким миллиметрам на линейке соответствует отрезок х объект-микрометра. Необходимым условием при этом является более или менее одинаковое зрение обоих глаз наблюдателя, что может быть достигнуто также при помощи очков.
Этот способ довольно труден и сначала обычно не удается. Приходится приложить немало усилий, чтобы увидеть изображение под микроскопом и линейку одновремен-н о. Здесь нужно набраться терпения!
3.6. ЯВЛЕНИЯ, НАБЛЮДАЕМЫЕ ПРИ ЗАКЛЮЧЕНИИ ПРЕПАРАТА В РАЗЛИЧНЫЕ СРЕДЫ
При заключении прозрачных объектов в среду с таким же показателем преломления, как и объект, мы ничего не увидим, если объект не будет содержать поглощающих
— 5
— 15
-го
Рис! 39. Вид измерительных линеек при вспомогательном определении увеличения микроскопа.
а — абсолютный масштаб слева от микроскопа; б — относительный масштаб в поле зрения микроскопа.
составных частей естественного происхождения или же окрашенных включений. Получается картина абсорбции, подавляющая изображение структуры. Последнее, напротив, бывает лучше видно в средах с другими показателями преломления, причем степень видимости зависит от разницы этих показателей.
I
а
Рис. 40. Влияние среды, в которую заключен препарат, на изображение объекта (по Эрингхзузу).
а — кристалл поваренной соли (п = 1,54) в*кедровом масле (п = 1,51) при 32-кратном увеличении; б — кристалл поваренной соли в воздухе (п = 1,00).
Ниже приведены показатели преломления различных веществ, применяющихся для заключения объектов:
Воздух ...................................... 1,00
Вода......................................... 1,33
Глицерин..................................... 1,46
Кедровое масло .............................. 1,51
Канадский бальзам жидкий .................... 1,52
Гвоздичное масло............................. 1,53
Канадский бальзам твердый.................... 1,54
3.7. ЯВЛЕНИЯ ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Эти явления имеют место при чрезмерном затягивании апертурной диафрагмы конденсора в случае косого освещения; они вызывают раздвоения и даже появление множественных контуров. Вокруг круглых структур возникают круги, слева и справа от линейных образований появляются параллельные линии, которые часто бывают окружены цветными каймами.
Это явление влечет за собой не только искажение истинного строения объекта, но и приводит к ошибочным заключениям относительно его действительной величины. Иными словами, если появление множественных контуров не может быть точно распознано, то объекты кажутся гораздо больших размеров, чем они есть в действительности, так как вокруг них возникает светлый ореол. Аналогичное явление можно наблюдать на звездном небе. Если смотреть в большую подзорную трубу на очень удаленные от нас звезды, то они кажутся гораздо меньше, чем при рассмотрении их невооруженным глазом, так как картины интерференции исчезают при наблюдении в трубу. Явление интерференции под микроскопом можно воспроизвести следующим образом: если поместить на предметный столик мазок серой ртутной мази (Unguentum Hydrargvri cinereum), то можно наблюдать, как при сдвигании и раздвигании апертурной диафрагмы конденсора шарики ртути будут казаться то больших, от меньших размеров.
3.8. ЯВЛЕНИЯ ПРЕЛОМЛЕНИЯ СВЕТОВЫХ ЛУЧЕЙ НА ОБЪЕКТЕ
