Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Анджапаридзе О.Г. -> "Культура ткани в вирусологических исследованиях" -> 23

Культура ткани в вирусологических исследованиях - Анджапаридзе О.Г.

Анджапаридзе О.Г. Культура ткани в вирусологических исследованиях — Москва, 1962. — 207 c.
Скачать (прямая ссылка): kulturarkani1962.djvu
Предыдущая << 1 .. 17 18 19 20 21 22 < 23 > 24 25 26 27 28 29 .. 101 >> Следующая

клеток.
Раствор Хэнкса 10-кратной концентрации .... 500 мл
Лактальбумин (5% раствор) ........................ 500 »
Стерильная бидистиллированная вода ............... 4000 »
Стерильный 7,5% раствор двууглекислого натрия 35 »
Пенициллин (100000 ЕД/мл)...................... Ш »
Стрептомицин (320 мг/л)........................... 2,5 »
Нистатин (500000 ЕД/мл)........................ 1 *
16. Среда Крета. Более простая и дешевая среда по сравнению с обычно применяемой для культивирования клеток Не La средой с высоким содержанием сыворотки человека.
Гндролизат лактальбумина (5%) ...................10 мл
Лошадиная сыворотка ...................................... 5 »
Раствор Хэнкса ........................................,85 »
Раствор пенициллина, содержащий 10000ЕД/мл . . 1 »
Раствор стрептомицина (20 мг/мл).................... 0,5 »
Гидролизат лактальбумина растворяют в слегка подогрето: растворе Хэнкса, не содержащем бикарбоната натрия. Затем дс бавлением соды доводят pH до 7,4 и пропускают через фильт Зейтца. pH лошадиной сыворотки в случае необходимости такж доводят до 7,4. Как раствор гидролизата лактальбумина, та;к лошадиную сыворотку сохраняют при температуре —20°. Отдель ные ингредиенты среды соединяют непосредственно перед употреб лением, после чего pH среды доводят до 7,4.
Преимуществом этой среды, сто мнению Крета, является oi сутствие в ней специфических антител к вирусам полиомиелит* благодаря чему отпадает необходимость в отмывании культу перед их использованием для вирусологической диагностики пс лиомиелита. Среду Крета используют как в фазе выращивани клеток и получения пробирочных и матрасных культур, так и фазе инокуляции вируссодержащим материалом. В том случае если последний содержит токсические вещества, вызывающие час тичную неспецифическую дегенерацию культуры (например, э* стракт фекалий больного), в последующие дни культура нередк снова приобретает нормальный вид. Это также связано с особен ностями состава среды, содержащей необходимые для роста размножения клеток вещества.
Крет указывает, что сочетание гидролизата лактальбумин с лошадиной сывороткой обеспечивает все потребности клето HeLa в питательных веществах.
17. Среда Ленина (Lepine, Slizewier, 1956) содержит гидре лизаты казеина. По данным автора, гидролизат казеина, обога щенный цистеином, глутамином и некоторыми витаминами (ви тамин Вг, аскорбиновая кислота и др.), при добавлении сыворот ки дает быстрый рост культур тканей.
Раствор Эрла .................................... 1000 мл
Гидролизат казеина .............................. 0,5 г
Глутамин ........................................ 0,1 »
Цистеии ......................................... 0,01 »
Аскорбиновая кислота ............................ 0,025 »
Ниацин .......................................... 0,001 »
Пиридокснн ...................................... 0,001 »
Тиамин ............................... .... 0,001 »
Пантотенат кальция............................... 0,001 »
л-Аминобензойная кислота................................... 0,001 »
Холин ........................................... 0,001 »
Рибофлавин ................ ................. 0,0001 »
Фолиевая кислота ................................ 0,001 »
Биотин .......................................... 0,001 »
а-Токоферол................................................ 0,001 »
Приготовляют среду следующим образом: в 1 л раствора Эрл; растворяют 500 мг гидролизата казеина, 100 мг глутамина, 10 м
цистеина, 25 мг аскорбиновой кислоты, 200000 ЕД пенициллина,
50 мг стрептомицина, 5 мг хлоромицетина, 1 мл концентрированного раствора витаминов.
В 1 мл дистиллированной воды растворяют по 1 г ниацина или ниацинамида, пиридоксина или пиридоксаля, тиамина, панто-тената кальция, я-аминобензойной кислоты, холина, а также 100 мг рибофлавина.
Раствор стерилизуют фильтрацией. Этот раствор можно хранить при комнатной температуре.
1 мл фолиевой кислоты (растворяют 1 г фолиевой кислоты в 1 мл щелочного раствора 2,8% NaHC03). 10 мл раствора биотина (раствор 100 мг биотина в 1 л дистиллированной воды).
Среду стерилизуют фильтрацией.
Концентрации аминокислот в гидролизате близки к их концентрации в известных синтетических средах. К среде прибавляют 10—15% сыворотки животных.
18. Казеиновая среда Смирновой и Ермаковой (1959) для выращивания клеток почек обезьян.
Гидролизат казеина ................................... 1 г
Глутамин .............................................0,1 »
Предыдущая << 1 .. 17 18 19 20 21 22 < 23 > 24 25 26 27 28 29 .. 101 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed