Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Албертс Б. -> "Молекулярная биология клетки. Том 4" -> 44

Молекулярная биология клетки. Том 4 - Албертс Б.

Албертс Б., Брей Д., Льюис Дж. Молекулярная биология клетки. Том 4 — М.: Мир, 1987. — 196 c.
Скачать (прямая ссылка): molekulyarnayabiologiyakletki1987.djvu
Предыдущая << 1 .. 38 39 40 41 42 43 < 44 > 45 46 47 48 49 50 .. 102 >> Следующая

У дрозофилы есть две особенности, облегчающие маркировку клеточных клонов с помощью митотической рекомбинации. Во-первых, этот процесс можно вызывать искусственно, подвергая личинок рентгеновскому облучению (по-видимому, митотическая рекомбинация является побочным следствием повреждения хромосом). Во-вторых, громадное число изученных мутаций позволяет специально подобрать подходящий генотип гетерозиготной мухи, и в частности гены, по которым эта муха гетерозиготна. Таким образом, можно в определенное время вызвать появление в организме легко идентифицируемых клонов гомозиготных клеток практически любого желаемого типа, не прибегая к каким-либо хирургическим манипуляциям.
Размеры меченого клона определяются числом клеточных делений после возникновения клона. Обычно большие клоны образуются после облучения на ранних стадиях эмбрионального развития, а клоны меньшей величины -при более позднем облучении. Проводя облучение в разные сроки и определяя величину образующихся клонов у взрослой мухи, можно получить график роста зачатков различных частей взрослого организма на разных стадиях развития.
Еслн цель состоит просто в создании клона легко отличимых клеток, можно использовать множество генетических маркеров. Например, митотическая рекомбинация у мухн, гетерозиготной по рецессивной мутации yellow (обозначается у, а соответствующий аллель дикого типа-у + ), приводит к образованию пары мутантных клонов с генотипами у/у и у + /у + на фоне гетерозиготной ткани у/у+. Так как мутация yellow рецессивна, мутантный фенотип проявится только у клона у/у, который образует пятно желтого цвета на коричневом фоне клеток у/у+ и у+/у+. Аналогичным образом при использовании рецессивной мутации multiple wing hairs (mwh) один из рекомбинантных клонов будет опознаваться (если его клетки окажутся в крыле) в виде скопления аномальных клеток mwh/mwh, каждая из которых вместо одного волоска на кутикуле крыла образует несколько волосков (рис. 15-34). Искусственное получение митотических рекомбинаций с помощью рентгеновских лучей при использовании таких саркеров может служить мощным инструментом для анализа клональной структуры организма.
15.4.11. Поликлональные участки разделены четкими границами
Широкое плоское крыло дрозофилы, представляющее собой эпителиальную структуру,-очень удобный объект для анализа отношений между клонами. Если маркированные клоны были получены путем рентгеновского облучения, образуемые ими пятна обычно располагаются случайным образом и имеют, как правило, довольно неправильные очертания. Сравнение расположения
Ряс. 15-33. Сравнение митотической рекомбинации и нормального митоза. Отцовские хромосомы представлены серыми, материнские - белыми. Предположим, что геном содержит локус, определяющий пигментацию, с двумя аллелями: R (красный квадратик) и г (белый квадратик), поэтому гомозиготные клетки R/R изображены темнорозовыми, гетерозиготные R/r - светло-розовыми и гомозиготные г/г-белыми. А. В нормальном цикле деления материнская хромосома гетерозиготной клетки удваивается, образуя две хроматиды, соединенные в области центромеры; обе хроматиды несут аллель R. Подобным же образом удваивается отцовская хромосома, образуя тоже две хроматиды, соединенные в области центромеры н несущие аллель г. В митозе две хроматиды каждой пары расходятся, и каждая из дочерних клеток получает случайным образом ту или иную из двух идентичных хроматид как первой, так н второй пары; поэтому каждая дочерняя клетка наследует гетерозиготный геиотип Rjr.
Б. В аномальном цикле деления, где после репликации хромосом происходит митотическая рекомбинация, две хроматиды в каждой паре различны: одна из них несет аллель R, а другая обменялась участком с одной из хроматид второй хромосомы н несет аллель г. В этом случае каждая из дочерних клеток унаследует в результате случайного распределения по одной из двух материнских и двух отцовских хроматид. Таким образом, в результате митотической рекомбинации одна дочерняя клетка унаследует обе копии аллеля R, а другая-обе копни аллеля г, так что из гетерозиготной клетки R/r (светлоокрашенной) получатся две дочерние клетки с различным генотипом-одна гомозигота R/R (темиоокрашенная) и одна гомозигота г/г (белая). Затем обе дочерние гомозиготы воспроизводятся обычным образом, и их потомки образуют двойное пятно, состоящее из клона красных клеток R/R н клона белых клеток г/г, на фоне розовых клеток R/r, которые не претерпели митотической рекомбинации.
Митотическая рекомбинация определяется случайными столкновениями двух гомологичных хромосом и поэтому происходит редко; в митотическом цикле не предусмотрено закономерного спаривания хромосом (как в мейозе) для повышения частоты рекомбинации.
клонов у разных особей показывает, что потомки одной клетки могут распределяться в пространстве по-разному-их расположение не детерминировано. Однако клоны вблизи центральной оси крыла как бы разделены невидимой границей между передней и задней частями крыла, проходящей у всех мух одинаковым образом. Клоны могут быть расположены с той или другой стороны от этой границы, но никогда ее не пересекают; в тех местах, где клоны примыкают к этой границе, края соответствующих пятен бывают необычно четкими и прямыми (рис. 15-35). Каждый участок, отделенный такого роД2
Предыдущая << 1 .. 38 39 40 41 42 43 < 44 > 45 46 47 48 49 50 .. 102 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed