Общая аллергология - Адо А.Д.
Скачать (прямая ссылка):
Поиски теста для определения реагинов in vitro велись в разных направлениях.
Предложенный Ridges и Augustin (1964) тест агглютинации лейкоцитов (double layer leucocyte agglutination) заключается в следующем. Хорошо отмытые лейкоциты больного аллергией (спонтанная сенсибилизация или лейкоциты иеаллергического донора после инкубации с сывороткой крови больного поллинозом (пассивная сенсибилизация) приводят в контакт с аллергеном. На этом этапе агглютинации ие наблюдается. Она наступает после добавления к реакционной смеси в качестве индикатора гетерологпчпой преципитирующей сыворотки против данного аллергена. Тест несколько громоздок, требует мтюгократпого отмывания лейкоцитов (18 раз), и пока не имеется данных о перспективах его практического использования.
Iloigne, Grossman и Storck (1955) разработали серологическую реакцию, основанную па выявлении чувствительным нефелометром минимального, ие улавливаемого визуально «помутнения» аллергической сыворотки при добавлении специфического аллергена. Однако положительные результаты получаются только в случае резко выраженных симптомов лекарственной аллергии.
Другим интересным направлением исследований по разработке теста для определения реагинов являются работы по измерению основного продукта деструкции клеток — гистамина. Было показано, что при инкубации специфического аллергена с целой кровыо или с отмытыми лейкоцитами атопических больных происходит освобождение гистамина из лейкоцитов. Реакция носит строго специфический характер и может быть воспроизведена при пассивной сенсибилизации лейкоцитов неаллергического донора сывороткой крови больных поллинозом. Исходя из этого Osier, Lichtenstein и Levy (1965) предложили in vitro модель реакции Праусиитца — Кюстиера. Авторы отмечают высокую чувствительность этой реакции, однако только лейкоциты 16—20% доноров удастся пассивно сенсибилизировать.
В 1962 г. Shelley показал возможность определения повышенной чувствительности при ряде аллергических заболеваний путем использования метода дегрануляции базофилов. А. А. Польнер (1968) в нашей лабора-торхш этим методом определял повышенную чувствительность у больных поллинозом. Он показал, что достоверны только четко полоядагельные результаты.
Для диагностики клинической аллергии у больных и индуцированной повышенной чувствительности у экспериментальных животных используются методы прямой и непрямой дегрануляции тучных клеток. Принцип реакции такой же, как в тосте Шелли, за исключением того, что •объектом, подвергающимся разрушению, являются не базофилы кролика, а тучные клетки крыс.
Schwartz и Vardinon (1966) показали, что деструкция тучных клеток сенсибилизированного животного в присутствии специфического антигена подавляется при добавлении в реакционную смесь специфических антител,
Vardinon, Levanon и Schwartz (1967) использовали метод торможения деструкции тучных клеток для диагностики повышенной чувствительности у больных аллергией. Крыс сенсибилизировали различными видами аллергенов. Перитонеальные тучные клетки, взятые у сенсибилизированных животных, разрушались в присутствии специфического аллергена. Добавление сыворотки больных, чувствительных к тому же аллергену, тормозило реакцию. Авторы отмечают высокую специфичность данного теста и указывают па преимущество его перед непрямым методом дегра-иуляции тучных клеток, так как он позволяет количественно (по титру
сыворотки, вызывающей торможение) определять концентрацию специфических аптител в исследуемой сыворотке.
В 1956 г. Black предложил диагностический тест, заключающийся в демонстрации цитотоксического эффекта аллергена в присутствии специфических антител. Живые полиморфноядерпые нейтрофилы инкубировали с исследуемой сывороткой атопического больного и специфическим аллергеном. Если у больного имелась повышенная чувствительность к данному аллергену, наступали неподвижность и лизис лейкоцитов. В контрольном препарате наблюдалось амебоидное движение клеток.
Альтерацию лейкоцитов человека при воздействии аллергена и специфических аптител наблюдали также Н. В. Медуницып, В. Б. Гервазие-ва (1967) и С. М. Титова (1967).
Лимфоциты крови атопических больиых, культивируемые в присутствии специфического аллергена, к которому у больных имеется повышенная чувствительность, трансформируются в бласты. Однако реакция трансформации лимфоцитов, являясь чрезвычайно интересным научпым фактом, не позволяет идентифицировать антитела, вызывающие бластогенез (Chalmers et al., 1966, и др.).
Другой метод определения специфической чувствительности больного с использованием циркулирующих аптител был предложен Crucliaud и Frei (1967). Танизированпые эритроциты барана обрабатывают аллергеном, к которому у больного предполагают повышенную чувствительность, и инкубируют с лимфоцитами, выделенными из периферической крови больного. При этом происходит иммунпое прилипание эритроцитов к лимфоцитам, обусловленное, по мнению авторов, наличием па лимфоцитах специфических антител. Исследования, проведенные с использованном этой методики, еще недостаточны. По-видимому, этим методом определяется аллергенсвязывающая активность сыворотки; связь его с рсагиппой активностью не ясна.
